Cystometric और बाह्य मूत्रमार्ग प्रत्यारोपित कैथेटर और दोहराया माप के लिए अनुमति इलेक्ट्रोड के साथ जाग चूहों में दबानेवाला माप

Published 1/30/2018
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Biology

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Summary

यह प्रोटोकॉल पहले बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला इलेक्ट्रोड के साथ संयुक्त मूत्राशय कैथेटर के स्थायी आरोपण के सर्जिकल प्रक्रिया का वर्णन करता है, और दूसरा, मूत्राशय और बाहरी मूत्रमार्ग के समारोह की माप प्रत्यारोपित जागर पशुओं में दबानेवाला ।

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Foditsch, E. E., Roider, K., Sartori, A. M., Kessler, T. M., Kayastha, S. R., Aigner, L., et al. Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements. J. Vis. Exp. (131), e56506, doi:10.3791/56506 (2018).

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Abstract

लोअर मूत्र पथ समारोह मुख्य रूप से कुतर में cystometric मूत्राशय समारोह विश्लेषण के माध्यम से मूल्यांकन किया है । पारंपरिक cystometries आमतौर पर urethane संज्ञाहरण के तहत टर्मिनल विश्लेषण के रूप में प्रदर्शन कर रहे हैं । यह सर्वविदित है कि संवेदनाहारी दवाओं मूत्राशय समारोह को प्रभावित कर सकते है । इसलिए, इस तकनीक का उद्देश्य मूत्राशय और बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला के हल्के से नियंत्रित जाग चूहों में cystometric माप प्रदर्शन करने के लिए है । इस प्रयोजन के लिए, एक मूत्राशय कैथेटर मूत्राशय गुंबद में प्रत्यारोपित है । बाद में, दो इलेक्ट्रोड बाह्य मूत्रमार्ग दबानेवाला करने के लिए द्विपक्षीय प्रत्यारोपित कर रहे हैं और एक जमीन इलेक्ट्रोड एक गैर-उत्तरदायी कंकाल की मांसपेशी के लिए सिलाई है. मूत्राशय कैथेटर और तीन इलेक्ट्रोड अंततः गर्दन क्षेत्र के लिए चमड़े के नीचे सुरंग और एक दोहन करने के लिए चिपका रहे हैं । इस तकनीक के साथ, कम मूत्र पथ कम मूत्र पथ समारोह का आकलन करने के लिए एक ही जानवर में एकाधिक समय बिंदुओं पर मापा जा सकता है । इस तकनीक का मुख्य अनुप्रयोग है अनुवर्ती एक साथ मूत्राशय और बाह्य मूत्रमार्ग दबानेवाला स्वस्थ चूहों जाग में समारोह और एक बीमारी या चोट के प्रेरण के बाद । इसके अलावा, बाद में कम मूत्र पथ की निगरानी रोग के मूल्यांकन के दौरान किया जा सकता है/

Introduction

मूत्र भंडारण और शूंय समारोह और शिथिलता का विश्लेषण करने के लिए, सबसे अध्ययन कुतर मॉडल का इस्तेमाल किया है । सजगता के अनुक्रमिक सक्रियण के माध्यम से, पिशाब का उत्पादन किया है । इन सजगता का समन्वय कुशल अशक्तता के लिए आवश्यक है1. Cystometric रिकॉर्डिंग तकनीक अपने तंत्रिका नियंत्रण के तहत मूत्राशय समारोह के विश्लेषण के लिए मूल्यवान उपकरण प्रदान1

चूहों में सबसे पारंपरिक cystometries एक एकल, संज्ञाहरण में अंतिम विश्लेषण के रूप में किया जाता है, मुख्य रूप से2urethane, और मूत्र मूत्राशय पर पूरी तरह ध्यान केंद्रित । हालांकि, तंत्रिकाजन्य कम मूत्र पथ में शिथिलता (NLUTD) की तरह कुछ विकृतियों में, न केवल मूत्राशय, लेकिन यह भी ब्लैडर आउटलेट, बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला, बेकार है3,4. यह NLUTD मुश्किल का पालन करने के लिए बनाता है, अगर केवल मूत्राशय एक एकल cystometric माप में जांच की है । विश्वसनीय परिणाम है कि मनुष्यों के लिए तुलना कर रहे हैं पाने के लिए, यह सही मूत्राशय दोनों और बाह्य मूत्रमार्ग दबानेवाला समारोह और इसकी बातचीत को मापने के लिए आवश्यक है2. इसके अलावा, यह संज्ञाहरण के रूप में जाग चूहों में कार्यात्मक विश्लेषण करने के लिए महत्वपूर्ण है बहुत से बदल मूत्राशय समारोह2,5,6की संभावना है । जाग पशुओं में एक अच्छा cystometric रिकॉर्डिंग मूत्राशय समारोह और खराबी की पहचान के लिए आधार है7

छोटे जानवर cystometry स्टेशन का इस्तेमाल किया (जैसे, Catamount cystometry स्टेशन (सीसीएस)) एक इकाई छोटे जागर जानवरों में cystometric विश्लेषण प्रदर्शन करने के लिए8है । एक स्थायी मूत्राशय कैथेटर और प्रत्यारोपित बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला इलेक्ट्रोड के माध्यम से, दोहराव माप एक लंबे समय से अधिक अवधि के लिए किया जा सकता है2. इस प्रकार, सीसीएस कुतर मॉडल में गैर तंत्रिकाजन्य और NLUTD मूल्यांकन के लिए एक मूल्यवान उपकरण प्रदान करता है, जिसमें pathomechanisms कम या मध्यम अवधि के अनुवर्ती के दौरान बदल सकते हैं । इसके अतिरिक्त, इस विधि एक मूर्ति-एक निरोधक जाग चूहों में मूत्राशय माप आचरण का उपयोग करके कम cystometric विश्लेषण भी शामिल है ।

इस पत्र में, हम शल्य दृष्टिकोण का वर्णन करने के लिए स्थाई रूप से एक मूत्राशय कैथेटर और बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला इलेक्ट्रोड प्रत्यारोपण, जाग चूहों में cystometric माप के साथ साथ ।

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Protocol

सभी प्रक्रियाओं यहां वर्णित ऑस्ट्रिया के सरकारी नीतिशास्त्र समिति द्वारा पशु अनुसंधान के लिए अनुमोदित (Bundesministerium फर Wissenschaft, Forschung und Wirtschaft, WF/वी/3b) थे और प्रयोगशाला के आकलन के लिए संघ के साथ अनुपालन में थे पशु देखभाल पशु उपयोग के लिए दिशानिर्देश । इस दृष्टिकोण के लिए इस्तेमाल किया चूहों महिला, 12 सप्ताह पुराने लुईस चूहों थे । प्रोटोकॉल भर बाँझ उपकरणों का प्रयोग करें ।

1. सामग्री की तैयारी

  1. कैथेटर का निर्माण
    1. पशु के आकार फिट करने के लिए उचित लंबाई (20 से 25 सेमी) में कैथेटर (पॉलीथीन टयूबिंग पीई-५०) में कटौती ।
      नोट: सुरंग और आसान हैंडलिंग के लिए कुछ अतिरिक्त लंबाई छोड़ दें ।
    2. एक हल्का एक गोल टिप पाने के लिए के साथ एक अंत भड़कना । अंतिम उचित खोलने और कैथेटर के कुंद अंत के लिए जांच करें ।
    3. कैथेटर पर एक 2 मिमी लंबे सिलिकॉन ट्यूब प्लेस जब तक यह सिर्फ भड़के हुए अंत से नीचे निहित है ।
  2. इलेक्ट्रोड के निर्माण
    1. 20-25 सेमी (पशु के आकार के आधार पर उपयुक्त लंबाई) के एक polytetrafluoroethylene लेपित इस्पात तार तैयार करें ।
    2. लंबाई में एक चांदी के तार 2 सेमी तैयार है और एक छोटे पाश रहता है जब तक छोर मोड़ । एक छोर पर Teflon इंसुलेशन के 2 मिमी पट्टी । टांका मुड़ चांदी के तार को समाप्त करने के लिए छीन इस्पात तार ।
    3. कोटिंग क्षेत्र में पारंपरिक नेल पॉलिश लागू करें । लेपित क्षेत्र में 4 मिमी लंबे पॉलीथीन टयूबिंग तैयार है, और compressing संदंश के लिए गर्मी लागू करने से अंत सील ।

2. पशु तैयारी

  1. संज्ञाहरण
    1. एक उचित संज्ञाहरण एक सामांय संज्ञाहरण के लिए संस्था द्वारा अनुमोदित कॉकटेल का प्रयोग करें ।
    2. medetomidine के साथ संज्ञाहरण कॉकटेल तैयार (०.१५ मिलीग्राम/किग्रा), मिडियाजोलम (०.०८ मिलीग्राम/किग्रा), और fentanyl (०.०१ मिलीग्राम/किग्रा), और एक 1 एमएल सिरिंज के साथ एक 27 गेज सुई के द्वारा पेशी इंजेक्षन ।
  2. सर्जिकल तैयारी
    1. scapulae के स्तर पर जननांग क्षेत्र और वापस क्षेत्र सहित एक बिजली के रेजर के साथ पेट दाढ़ी ।
    2. ७०% इथेनॉल पहले और फिर povidone-आयोडीन समाधान के साथ 3 बारी सफ़ाई के साथ उदर और गर्दन क्षेत्रों को संक्रमित ।

3. मूत्राशय कैथेटर आरोपण

  1. एक कम मध्य-पंक्ति laparotomy तीसरे और चौथे (लंबाई में २.५ सेमी) के स्तर पर एक त्वचा और पेट की मांसपेशी के लिए एक शल्य कैंची के लिए एक स्केलपेल का उपयोग करके निपल प्रदर्शन ।
  2. cranio-caudal दिशा में पेट की दीवार का मार्गदर्शन करके मूत्राशय को बेनकाब करें और पुनः स्थिति से बचने के लिए मूत्राशय के पीछे एक संदंश के पीछे रखकर इस स्थिति में इसे ठीक करें ।
  3. एक बटुआ-एक शंकु टिप सुई के साथ एक 6-0 गैर अवशोषित monofilament टांका का उपयोग करने के लिए मूत्राशय गुंबद के चारों ओर एक पर्स रखें ।
  4. काटकर पर्स के अंदर मूत्राशय गुंबद-स्ट्रिंग, या तो स्केलपेल टिप या 18G सुई द्वारा, मूत्राशय कैथेटर डालने के लिए (देखें प्रोटोकॉल चरण 1) ।
  5. कैथेटर बाँझ शारीरिक ०.९% सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ भरा हुआ डालें और सावधानी से वापस लेने के मूत्राशय कैथेटर जब तक कैथेटर के भड़के खोलने बस मूत्राशय गुंबद के नीचे तैनात है ।
  6. कैथेटर के आसपास पर्स-स्ट्रिंग सीवन सुरक्षित और आगे निर्धारण के लिए कैथेटर शरीर के आसपास एक बंद टांका बनाते हैं ।
  7. मूत्राशय गुंबद के माध्यम से रिसाव के लिए जांच धीरे से बाँझ शारीरिक ०.९% सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ कैथेटर के माध्यम से मूत्राशय भरने ।

4. मूत्रमार्ग दबानेवाला इलेक्ट्रोड आरोपण

  1. आरोपण के लिए तीन इलेक्ट्रोड तैयार करें (देखें प्रोटोकॉल चरण 1).
  2. मार्क भविष्य नल इलेक्ट्रोड की आगे की पहचान के लिए एक रंगीन स्थाई महसूस कलम के साथ एक इलेक्ट्रोड । ७०% इथेनॉल के साथ इलेक्ट्रोड को संक्रमित ।
    नोट: कैथेटर गर्मी और रासायनिक नसबंदी प्रक्रियाओं के लिए उपयुक्त नहीं हैं । इसके बजाय ठंड 24 एच के लिए इलेक्ट्रोड निष्फल ।
  3. सर्जिकल कैंची से जघन हड्डी तक पेट चीरा का विस्तार, लेकिन जघन symphysis कटौती नहीं है ।
  4. मूत्रमार्ग की पहचान और मूत्रमार्ग के दोनों किनारों पर ठीक संदंश का उपयोग करके एक कुंद जेब बनाने के लिए, लेकिन जहाजों या नसों के आघात से बचें ।
  5. इस खिड़की के भीतर मूत्रमार्ग के पास उपयुक्त वसा पाउच की पहचान करें ।
  6. 6-0 गैर-अवशोषित monofilament टांका का उपयोग करके उचित वसा थैली के लिए द्विपक्षीय इलेक्ट्रोड को ठीक करें ।
    नोट: इलेक्ट्रोड की अंतिम स्थिति मूत्रमार्ग के मध्य क्षेत्र में द्विपक्षीय होना चाहिए.
  7. दो इलेक्ट्रोड के साथ एक साथ टाई 6-0 गैर-अवशोषित monofilament टांका.
  8. मूत्रमार्ग की दूरी के भीतर उदर दीवार पेशी के लिए चिह्नित नल इलेक्ट्रोड टांका. सभी तीन इलेक्ट्रोड एक साथ एक ही सीवन टाई ।

5. सुरंग

  1. सुरंग बनाने के लिए scapulae के बीच एक छोटी सी त्वचा चीरा बनाओ ।
  2. सुरंग इलेक्ट्रोड गर्दन करने के लिए तारों और सही स्थान के लिए एक अंतिम जांच करते हैं, और सुरंग के बाद इलेक्ट्रोड की स्थिति की जाँच करें.
  3. scapulae स्तर के लिए सुरंग मूत्राशय कैथेटर-मूत्राशय घुमा से बचने के लिए कैथेटर सुरंग जबकि मूत्राशय के लिए ध्यान देना । इस प्रयोजन के लिए, बस मूत्राशय गुंबद में प्रवेश करने से पहले कैथेटर पकड़ मूत्राशय के घुमा से बचने के लिए ।
  4. एक 4-0 polyfilament अवशोषित टांका के साथ लगातार या बाधित टांके से पेट की मांसपेशियों को बंद करें । बाधित गद्दे टांके द्वारा त्वचा चीरा बंद करें ।
  5. इलेक्ट्रोड तारों और कैथेटर के अधिक से अधिक निरोध है करने के लिए अपनी पूरी लंबाई के लिए पशु खिंचाव.
  6. एक डूब में कंधे की मांसपेशी को टांका कैथेटर और इलेक्ट्रोड तारों को ठीक करें ।
  7. 4-0 टांका के साथ एक भी सिलाई द्वारा त्वचा बंद करो ।

6. हार्नेस फिटिंग

  1. पशु के सिर पर दोहन खींच और दो सिलिकॉन स्ट्रिप्स के बीच एक अंत स्थिति के लिए forelimbs खींचने के द्वारा पशु के लिए एक दोहन फिट । वितरक के साथ शल्य चिकित्सा करने से पहले पशु के वजन से दोहन आकार की जाँच करें ।
  2. एक ड्रिल इलेक्ट्रोड तारों के आकार के लिए समायोजित द्वारा कस्टम बनाया छेद के माध्यम से दोहन और इलेक्ट्रोड के केंद्रीय छेद करने के लिए मूत्राशय कैथेटर सुरंग.
  3. सिलिकॉन स्ट्रिप्स खींच द्वारा दोहन को समायोजित करें । दोहन को समायोजित करें तो यह भी ढीला नहीं है, लेकिन कुछ जगह सुनिश्चित करने के लिए चूहे की चलती क्षमता को बनाए रखने रहता है ।
  4. सिलिकॉन स्ट्रिप्स को ठीक करने के लिए एक केबल पट्टा का उपयोग करें ।
  5. दोहन के ऊपर 3 सेमी करने के लिए मूत्राशय कैथेटर की लंबाई में कटौती, 23-जी डाट करने के लिए कनेक्ट, और अंत में यह दोहन करने के लिए तय ।

7. इलेक्ट्रोड कनेक्टर का निर्माण

  1. तीन छोटे गर्मी हटना ट्यूबों (नल इलेक्ट्रोड के लिए एक अलग रंग) तैयार करें । एक उपयुक्त बड़े आकार में दो और गर्मी हटना ट्यूबों तैयार करें ।
  2. इलेक्ट्रोड तारों की लंबाई को कम करने के लिए एक इष्टतम लंबाई के लिए बाद में प्लग करने में सक्षम होना करने के लिए महिला प्लग के बिना भी ढीला जा रहा है या बहुत कम. तीन तारों के Teflon इन्सुलेशन बंद पट्टी (लगभग 2 मिमी), और एक स्ट्रिंग के लिए स्टील के तारों मोड़.
  3. प्लेस बड़ी गर्मी सभी तारों पर ट्यूब हटना, छोटे ट्यूबों सभी तीन तारों के लिए व्यक्तिगत रूप से जगह है, और नल इलेक्ट्रोड के लिए रंगीन ट्यूब का उपयोग करें ।
  4. टांका पुरुष 3 कनेक्शन-प्लग करने के लिए इलेक्ट्रोड । बीच में नल इलेक्ट्रोड प्लेस, और टांका क्षेत्र के ऊपर तीन छोटे व्यक्तिगत ट्यूबों हटना ।
  5. व्यक्तिगत ट्यूब अंत और पुरुष प्लग सीमा के लिए अंतिम बड़ी ट्यूब की समाप्ति पर बड़ा ट्यूबों के पहले हटना ।
  6. महिला दोहन करने के लिए तय संबंधक के लिए पुरुष प्लग कनेक्ट, और आगे की सुरक्षा के लिए टेप का एक टुकड़ा के साथ तय ।

8. सर्जरी के बाद देखभाल

  1. साफ सर्जिकल क्षेत्रों और povidone-आयोडीन के साथ संक्रमित ।
  2. जाग जब तक एक हीटिंग पैड पर पशु प्लेस और पानी प्रतिस्थापन के लिए ०.९% सोडियम क्लोराइड समाधान देने के दौरान और सर्जरी के बाद स्थानीय पशु देखभाल के दिशा निर्देशों के आधार पर ।
  3. एनाल्जेसिक प्रशासन (meloxicam 1 मिलीग्राम/) और एंटीबायोटिक दवाओं (sulfadoxinum २०० मिलीग्राम, trimethoprimum ४० मिलीग्राम, 15 मिलीग्राम/एक संयुक्त इंजेक्शन समाधान के रूप में चमड़े के नीचे । दो बार दैनिक, एनाल्जेसिक (सुबह और शाम) दे, और प्रति दिन एक बार एंटीबायोटिक दवाओं, पांच बाद के दिनों के लिए दे ।
  4. पूरे अनुवर्ती अवधि में एक ही खुराक पर एंटीबायोटिक दवाओं के साथ जारी रखें प्रति सप्ताह दो से तीन इंजेक्शन ।
  5. दोहन की उचित फिटिंग के लिए दैनिक जांच करें और एक शल्य चिकित्सा क्षेत्र निरीक्षण, विशेष रूप से गर्दन क्षेत्र का प्रदर्शन । अगर यह ध्यान से सिलिकॉन स्ट्रिप्स पर खींच द्वारा भी तंग हो जाता है दोहन समायोजित करें ।
  6. एक नाकाबंदी से बचने के लिए प्रति सप्ताह एक बार नियमित रूप से कैथेटर फ्लश ।

9. Cystometric मापन के लिए तैयारी

  1. छह पोस्ट-ऑपरेटिव दिनों के बाद पहली cystometric माप करते हैं ।
    नोट: पहले माप एनाल्जेसिक दवा और/या urothelial कैथेटर आरोपण के कारण जलन से प्रभावित किया जा सकता है ।
  2. मुख्य स्विच, कंप्यूटर, और ईएमजी एम्पलीफायर चालू करें ।
  3. कमरे के तापमान ०.९% सोडियम क्लोराइड गर्म के साथ सिरिंज पंप भरें । तीन तरह कनेक्टर्स एक अवरोही तरीके में दूसरे के बाद एक खुला, पंप से शुरू, और ट्यूब फ्लश ।
    नोट: शेष हवा बुलबुले के लिए ध्यान से जाँच करें, बुलबुले cystometric माप बदल जाएगा के रूप में.

10. अंशांकन

  1. प्रोग्राम uroflowmeter सॉफ़्टवेयर प्रारंभ करें और अंशांकन पर जाएं ।
  2. पंप और जानवर के लिए तीन तरह के कनेक्टर बंद करें ।
  3. कनेक्टेड नापने के लिए वाल्व खोलें और प्रोग्राम में शूंय दबाएं ।
  4. १०० mmHg करने के लिए नापने पर दबाव समायोजित करें, और प्रोग्राम में १०० mmHg बटन दबाएँ । अंशांकन समायोजन को सहेजने के लिए पुष्टि करें दबाएँ । विंडो स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा ।
  5. नापने को बंद करने के लिए वाल्व और पंप से पशु को माप के लिए तैयार होने के लिए तीन तरह connectors खुला ।

11. पशु डाटाबेस (पशु DB)

  1. जानवरों का पंजीकरण करने के लिए, पशु एक संक्षिप्त आईडी दे ।
  2. इस तरह के विज्ञान की तारीख के रूप में आगे डेटा दर्ज करें, उपचार की शुरुआत, कैथेटर आरोपण की तारीख, प्रयोगात्मक समूह, और पशु की जन्मतिथि.
  3. अंत में डेटा लॉग इन करने के लिए, प्रेस "स्टोर रिकॉर्ड" और फ़ाइल को बचाने के लिए ।

12. रिकॉर्डिंग से पहले माप सेटिंग्स

  1. स्टार्ट बटन दबाकर सॉफ्टवेयर प्रोग्राम शुरू करें ।
  2. पशु और प्रेस धड़ा स्केल और शूंय दबाव का चयन करें ।
    नोट: इस तरह की है कि कोई केबल फंस गया है, के रूप में इस ईएमजी केबल के एक तार को हटाने के लिए नेतृत्व कर सकता है, जबकि निरोध में जानवर रखने, ध्यान देना ।

13. पशु तैयारी

  1. कैथेटर प्लग निकालें और दोहन से ईएमजी प्लग डिस्कनेक्ट ।
  2. छलनी में चूहा डाल दिया. छलनी बंद करो और एक क्लैंप के साथ दोहन ताला ।
  3. कैथेटर और ईएमजी प्लग बाहर निरोधक प्राप्त करें ।
  4. catamount यूनिट में निरोधक लगाएं । ट्यूब के माध्यम से पूंछ रखो और आंदोलनों से बचने के लिए टेप के साथ ट्यूब को ठीक ।
  5. रिकॉर्डिंग महिला ईएमजी कनेक्टर के लिए पुरुष ईएमजी प्लग कनेक्ट ।
  6. प्रेस शूंय दबाव एक बार फिर और फिर भरने के लिए कैथेटर कनेक्ट/ सॉफ्टवेयर में दबाव की जांच करें ।
    नोट: दबाव सकारात्मक होना चाहिए, लगभग 5-10 cm H2बेसलाइन पर हे । दबाव नकारात्मक है, तो प्रवेशनी से कैथेटर डिस्कनेक्ट करें, शून्य दबाव दबाएँ, और उसके बाद कैथेटर पुन: कनेक्ट करें ।

14. रिकॉर्डिंग

  1. कैथेटर और ईएमजी केबल जुड़े हुए हैं, तो पंप और रिकॉर्डिंग चलाएँ दबाएँ ।
  2. μL/मिनट में प्रयोगात्मक जरूरतों के लिए भरने की गति अनुकूलन ।
  3. समय रिकॉर्डिंग शुरू होता है और लॉग बुक में कमरे के तापमान पर ध्यान दें ।
  4. cystometric रिकॉर्डिंग को रोकने के लिए, पंप और प्रेस रिकॉर्डिंग एक बार फिर से चलाने पंप बंद करो ।
    नोट: पंप बंद हो जाएगा और पंप पर हरी बत्ती बंद है ।
  5. कैथेटर डिस्कनेक्ट और कैथेटर अंत बंद करने के लिए 23G डाट प्लग का उपयोग करें । ईएमजी केबल डिस्कनेक्ट कर ᱶ ।
  6. विवशता के सामने खुले और चूहे को छलनी से बाहर गाइड ।
    नोट: संभाल चूहे ध्यान से, और तारों की निगरानी के लिए केबल के किसी भी लॉकिंग से बचने के ।
  7. कैथेटर दोहन में वापस प्लग । फिर से दोहन करने के लिए ईएमजी प्लग प्लग, और प्लग के आसपास टेप का एक टुकड़ा डाल दिया ।
    नोट: यदि पशु एक रोग कम मूत्र पथ की स्थिति है, मूत्राशय के overdistention से बचने के लिए मैंयुअल रूप से अंत में मूत्राशय व्यक्त करते हैं ।
  8. पशु को अपने घर के पिंजरे में वापस रखो ।
  9. प्रोग्राम बाहर निकलें दबाकर बंद करें ।
  10. छलनी और यूरिन को साफ करें ।
  11. पंप और पशु आउटलेट के लिए तीन तरह connectors बंद ।
  12. कंप्यूटर, ईएमजी इकाई, और मुख्य स्विच के माध्यम से सिस्टम शट डाउन करें ।
    नोट: डेटा अलग फ़ोल्डर "लॉग इन डेटा" में मापा चूहे आईडी के सबफ़ोल्डर फ़ाइल के साथ सहेजा जाता है । एकल रिकॉर्डिंग की तारीख से एकल चूहे आईडी फ़ोल्डरों में हल कर रहे हैं ।

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Representative Results

एक योजनाबद्ध जाग cystometric माप की प्रक्रिया दिखा रहा है चित्रा 1 में प्रस्तुत किया और मूत्राशय कैथेटर आरोपण के लिए आंतरिक एनाटॉमी चित्रा 2में दिखाया गया है । सर्जरी के बारे में 2 एच. पश्चात analgesia और एंटीबायोटिक दवाओं, प्रोटोकॉल में वर्णित के रूप में, सर्जरी के बाद पांच दिनों में दर्द और संक्रमण को कवर लेता है । इसके बाद किसी भी दर्द का कोई संकेत नहीं देखा गया । दो बार दैनिक सावधान निरीक्षण पेट, पेट सीवन, और गर्दन सीवन पशु के स्वास्थ्य को बनाए रखने के लिए आवश्यक है । दोहन नियंत्रण (स्थिति और जकड़न) पहले पांच दिनों में एक बार दैनिक और बाद में एक नियमित आधार पर आयोजित किया जाना चाहिए । उदर टांके 10वें पोस्ट ऑपरेटिव दिवस पर हटाया जा सकता है ।

हम पहले 10 दिनों के लिए सर्जरी के बाद सूजन से बचने के लिए नरम, गैर वुडी बिस्तर का उपयोग करें । बिस्तर एक सप्ताह में दो बार बदल जाता है और सूजन के जोखिम को कम करने के लिए । जानवरों के एक आवास में रखा जाता है, के रूप में समूह आवास दोहन के जोखिम बढ़ जाती है, कैथेटर, या इलेक्ट्रोड केबल पिंजरे साथियों द्वारा काट ।

कैथेटर से कम एक बार प्रति सप्ताह फ्लश किया जाना चाहिए, या तो एक cystometric माप के पाठ्यक्रम में या एक कम अर्क गति पर बाँझ ०.९% सोडियम क्लोराइड की 1-3 मिलीलीटर के साथ मैन्युअल रूप से कैथेटर निस्तब्धता (चित्रा 3). पशुओं के नियमित एंटीबायोटिक कवरेज और संक्रमण और मूत्र पत्थर गठन के जोखिम को कम कर देता है । द्रव की निगरानी के लिए मूत्र पत्थर गठन को रोकने के लिए एक और प्रमुख बिंदु है । कम सांद्रता में साइट्रिक एसिड (2-3%) या तो intravesically कैथेटर के माध्यम से या पीने के पानी में मूत्राशय गठन को रोकने के लिए प्रशासित है ।

शल्य प्रक्रिया की सफलता दर, साथ ही मूत्राशय कैथेटर और इलेक्ट्रोड बरकरार बनाए रखने, ८०% के आसपास है । मामलों की शेष 20% में, मुख्य समस्या प्लग से इलेक्ट्रोड तारों की टुकड़ी थी. इस प्रकार, इलेक्ट्रोड तारों की एक सावधान लगाव दोहन करने के लिए इलेक्ट्रोड हानि से बचने के लिए महत्वपूर्ण है.

Cystometric माप आम तौर पर किया जाता है जब तक तीन लगातार voiding चक्र माप, जो 20 से ४० मिनट के बीच लेता है, चिंता और चूहे की स्थिति को संभालने के आधार पर के बीच दर्ज कर रहे हैं । पहली cystometric माप आमतौर पर कैथेटर प्रत्यारोपण सर्जरी के बाद एक सप्ताह किया जाता है ।

मुख्य cystometric रिकॉर्डिंग के मापदंडों को बाहर पढ़ा आधारभूत दबाव, दहलीज दबाव, अधिकतम दखल देने के दबाव, शून्य मात्रा, औसत प्रवाह, शून्य समय, औसत दबाव, मूत्राशय के अनुपालन, और एक साथ बाहर पढ़ें बाह्य मूत्रमार्ग दबानेवाला ईएमजी-गतिविधि (आरेख 4) ।

अनुवर्ती अवधि में लगातार cystometric माप सर्जरी के बाद कम से कम चार सप्ताह के लिए किया जा सकता है । कैथेटर लाइन नियमित रूप से फ्लश किया जाता है, तो कैथेटर रुकावट कोई समस्या नहीं है । नियमित हैंडलिंग और चूहों के ऑप्टिकल नियंत्रण पूरे अनुवर्ती अवधि के दौरान किया जाना चाहिए ।

कैथेटर की गुत्थी या अवरुद्ध है, तो intravesical दबाव रैखिकता बहुत उच्च दबाव तक बढ़ जाएगा (ऊपर १०० cm H2O) । इस मामले में, भरने बंद कर दिया जाना चाहिए और दिखाई कैथेटर अंत गुत्थी के लिए जाँच की जानी चाहिए । कोई गुत्थी नहीं देखा जाता है, कैथेटर एक अवरुद्ध आउटलेट के लिए जाँच की जानी चाहिए । इस प्रयोजन के लिए, कैथेटर कैथेटर के माध्यम से मैन्युअल रूप से फ्लश किया जा सकता है । यदि द्रव आसानी से मूत्राशय में बहने नहीं है, वापस खींच और हल्के से आगे की कोशिश की जा सकती है । एक अंतिम प्रयास के लिए, एक अंलीय निस्तब्धता समाधान (साइट्रिक एसिड 2-3%) कैथेटर के भीतर बाधित क्षेत्र को साफ करने की कोशिश करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । इस समाधान के लिए नाकाबंदी भंग करने के लिए एक उच्च मौका हो सकता है, अभी तक, मूत्राशय सफल निस्तब्धता और लगातार माप के बाद चिढ़ हो जाएगा केवल दो दिन अंलीय समाधान के साथ निस्तब्धता के बाद किया जाना चाहिए । कोई तरल पदार्थ मूत्राशय में फ्लश किया जा सकता है, कैथेटर स्थायी रूप से अवरुद्ध है और कोई आगे माप संभव है, और पशु पालन के लिए खो दिया है ।

Figure 1
चित्रा 1: जाग चूहों में cystometric माप के योजनाबद्ध ड्राइंग । यह आंकड़ा2से रूपांतरित किया गया है । (a) urodynamic सेटअप का चित्रण । () urodynamic परीक्षा के लिए लैब स्टेशन । () बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला electromyography इलेक्ट्रोड मूत्रमार्ग, intraoperative देखने के लिए पार्श्व का आरोपण । () मूत्राशय कैथेटर आरोपण, intraoperative देखने के क्षण में मूत्राशय गुंबद के देखें । () इलेक्ट्रोड और कैथेटर के आरोपण के बाद, चूहे को सुरक्षित रूप से प्लग और कनेक्टर्स स्टोर करने के लिए एक दोहन के साथ फिट किया जाएगा । () मानव urodynamics । b-e में संख् याएं aमें लेजेंड से संबंधित हैं । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्रा 2: मूत्राशय कैथेटर आरोपण के लिए चूहे की आंतरिक एनाटॉमी । यह आंकड़ा8से संशोधित किया जा चुका है ।

Figure 3
चित्रा 3: एक चूहे की कैथेटर लाइन के निस्तब्धता । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 4
चित्रा 4: कैथेटर आरोपण के बाद एक जानवर 12 दिन में Urodynamic अनुरेखण । () प्रतिनिधि एक भोले चूहे से अनुरेखण urodynamic. शीर्ष पर मूत्राशय दबाव अनुरेखण दिखाया है, मध्य स्रावित मूत्र वजन अनुरेखण में, और नीचे बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला ईएमजी अनुरेखण पर । () ६० एस, () से लिया के एक भोले जानवर से खिड़की ज़ूम । एक महत्वपूर्ण टिप्पणी है कि वहां कम बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला ईएमजी गतिविधि से पहले और शूंय के बाद से voiding के दौरान है । शीर्ष पर मूत्राशय दबाव अनुरेखण दिखाया है, मध्य स्रावित मूत्र वजन अनुरेखण में, और नीचे बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला ईएमजी अनुरेखण पर । तल पर, एक गर्मी साजिश समय मिलान आवृत्ति spectrogram के साथ दिखाया गया है (आवृत्ति को वर्तमान समय बिंदु पर इसी) । लाल एक उच्च शक्ति का प्रतिनिधित्व करता है और नीले कम शक्ति का प्रतिनिधित्व करता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

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Discussion

इस प्रोटोकॉल एक स्थाई कैथेटर और मूत्रमार्ग दबानेवाला इलेक्ट्रोड आरोपण के सर्जिकल प्रक्रिया का वर्णन करता है और जाग में cystometric रिकॉर्डिंग तकनीक, दोनों मूत्राशय के एक साथ विश्लेषण सहित हल्के से रोका चूहों और बाह्य मूत्रमार्ग दबानेवाला ।

सर्जरी के दौरान महत्वपूर्ण कदम मूत्राशय कैथेटर के सावधान आरोपण, रिसाव और व्यापक हेरफेर से बचने कर रहे हैं । इसके अलावा, मूत्रमार्ग बाहरी दबानेवाला के लिए द्विपक्षीय इलेक्ट्रोड का एक सटीक आरोपण बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला की एक ध्वनि माप के लिए महत्वपूर्ण है. प्रत्यारोपण के बाद शल्य क्षेत्रों का एक बंद निरीक्षण भी पशुओं के स्वास्थ्य को बनाए रखने के लिए आवश्यक है । अनुवर्ती के दौरान एंटीबायोटिक कवरेज कैथेटर लाइन के साथ संक्रमण को रोकने में मदद करता है, साथ ही मूत्र पथ के संक्रमण की घटना ।

cystometric माप के दौरान, एक संभाला चूहे शांत हो जाएगा और अधिक एक चूहे जो पहले से संभाला नहीं था की तुलना में आराम । इस प्रकार, cystometric रिकॉर्डिंग इसके परिणाम में अलग हो सकता है । इसके अलावा, निरोधक एक अंधेरे सामने क्षेत्र के साथ एक परिष्कृत अंतरिक्ष चूहे प्रदान करता है और अधिक आरामदायक महसूस करते है और इस प्रकार, तनाव का स्तर कम कर देता है । अंय प्रकाशित जाग cystometric माप में, चूहों को स्वतंत्र रूप से मापने के पिंजरे में ले जा सकते हैं । हालांकि, इस माप के दौरान एक उच्च मूर्ति जोखिम भालू और रिकॉर्डिंग के समय में वृद्धि हो सकती है, और भी जानवर में तनाव का स्तर । स्वस्थ चूहों में, इष्टतम cystometric माप अनुवर्ती के दौरान एकाधिक मापने के समय बिंदुओं पर दोहराया जा सकता है. cystometric माप के दौरान, आमतौर पर होने वाली समस्याओं की गुत्थी कैथेटर या प्रोटोकॉल के चरण-वार आचरण में एक गलती कर रहे हैं । कोई तकनीकी या सॉफ़्टवेयर त्रुटि तब होती है, तो cystometric माप और stepwise दोहराने के प्रोटोकॉल का पुन: आरंभ अत्यधिक समस्या निवारण के लिए अनुशंसित है ।

इस तकनीक की सीमाएं cystometric रिकॉर्डिंग की अंतर-पशु परिवर्तनशीलता हैं, प्रत्यारोपित कैथेटर के कारण मूत्राशय के ऊतकों में संरचनात्मक परिवर्तन, जो इस ऊतक के ऊतकीय या आणविक जैविक परीक्षाओं में बाधा उत्पन्न कर सकते हैं, और अनुवर्ती अवधि के दौरान पशुओं के एकल आवास । इसके अलावा, इस तकनीक केवल महिला चूहों में परीक्षण किया गया है, प्रयोज्य और पुरुष चूहों के लिए परिणाम अभी तक जांच नहीं किया गया है ।

इस तकनीक का मुख्य लाभ मूत्राशय की एक साथ माप और बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला, साथ ही साथ जाग माप सेटिंग है । इस प्रकार, जाग पशुओं में कम मूत्र पथ की एक और अधिक अनुवाद परीक्षा उपलब्ध है, संज्ञाहरण में एकल, टर्मिनल cystometric विश्लेषण की तुलना में5,6,9,10। इसके अलावा, इस दृष्टिकोण के साथ, एक कम मूत्र पथ रोग या विकृति की प्रगति समय के साथ ही जानवर में पीछा किया जा सकता है, साथ ही उपचार सफलताओं । विशेष रूप से, NLUTD एक समय पाठ्यक्रम में जांच की जा सकती है, जो आम cystometric तकनीक2के साथ एक पूर्ण सीमा तक संभव नहीं था ।

निष्कर्ष में, प्रस्तुत शल्य चिकित्सा और cystometric माप एकाधिक, कम मूत्र पथ के कम विश्लेषण के लिए उपयोग किया जाता है, मूत्र मूत्राशय की बातचीत और जाग चूहों में बाहरी मूत्रमार्ग दबानेवाला सहित.

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgements

लेखकों को कोई पावती नहीं है ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Polyethylene tubing PE 50 Becton Dickinson 427411 Catheter
Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) Ethicon EH7403H Suture
Teflon coated steel wire Cooner wire AS631 Electrode material
Silver wire 0.250 mm World Precision Instruments AGW1030 Electrode material
Rotilabo - PVC tube Carl Roth 97241 Harness
Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) Ethicon V4940H Suture
Quick Connect Single Harness SAI Infusion Technologies QCH-23CW Harness
Shrinking tubes ChiliTec 17894 Electrode soldering
Soldering wire Pb60 Sn40 Stannol LD0029 Electrode soldering
Fluxing agent 157 Castolin Eutectin 157 0150 Electrode soldering
Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box Preci-dip 801-87-050-10-001101 Electrode soldering
Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box Preci-dip 890-18-003-10-001101 Electrode soldering
Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis) Catamount Research and Development Inc. CAT-CYT-R
Differential amplifier with active headstage AD instruments DP-311 EMG amplifier
Restrainer Medium size for rats 200-300 g emka Technologies HLD-RM
Uro Dyn Software Zürich of University MTA-based
Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age Charles River, Sulzfeld, Germany animals

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References

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