Cystometriska och externa Urethral Sphincter mätningar i vaken råttor med inopererad kateter och elektroder som möjliggör upprepade mätningar

Published 1/30/2018
0 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





By clicking "Submit", you agree to our policies.

 

Summary

Det här protokollet beskriver först det kirurgiska ingreppet av permanent implantation av en urinblåsan kateter kombinerat med externa urethral sphincter elektroder, och andra, mätning av funktionen av urinblåsan och externa urinrörets slutmuskel inopererad vaket djur.

Cite this Article

Copy Citation

Foditsch, E. E., Roider, K., Sartori, A. M., Kessler, T. M., Kayastha, S. R., Aigner, L., et al. Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements. J. Vis. Exp. (131), e56506, doi:10.3791/56506 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Nedre urinvägarna funktion bedöms främst genom cystometriska urinblåsan funktion analys hos gnagare. Konventionella cystometries utförs vanligtvis som terminal analys under uretan anestesi. Det är väl känt att narkos droger kan påverka urinblåsa funktion. Därför är syftet med denna teknik att utföra cystometriska mätningar av urinblåsan och externa urethral sphincter lätt återhållsamma vaken råttor. För detta ändamål är en urinblåsa kateter inopererad i urinblåsan kupolen. Därefter två elektroder implanteras bilaterala till externa urethral sphincter och en marken elektrod sys till en icke-lyhörd skelettmuskulaturen. Urinblåsan katetern och tre elektroderna är slutligen tunneled subkutant i hals-regionen och fästs till en sele. Med denna teknik, kan de nedre urinvägarna mätas vid flera tidpunkter på samma djur att bedöma nedre urinvägarna funktion. Den huvudsakliga tillämpningen av denna teknik är uppföljning av samtidiga urinblåsan och externa urethral sphincter funktionen i vaken friska råttor och efter induktion av en sjukdom eller skada. Dessutom kan efterföljande nedre urinvägarna övervakning utföras under utvärderingen av den sjukdom/skadan och att övervaka behandlingseffektivitet.

Introduction

För att analysera urin förvaring och tömning funktion och dysfunktion, har de flesta studier använt gnagare modeller. Genom sekventiell aktivering av reflexer produceras urinering. Samordning av dessa reflexer är avgörande för effektiv tömning1. Cystometriska inspelning tekniker ger värdefulla verktyg för att analysera funktionen urinblåsan under dess neurala kontroll1.

De flesta konventionella cystometries hos råttor är klar som en singel, slutliga analys i anestesi, främst uretan2, och fokusera på urinblåsan enbart. I vissa patologier som neurogen nedre urinvägarna dysfunktion (NLUTD) är dock inte bara urinblåsan, men även urinblåsan utlopp, den externa urinrörets ringmuskeln, dysfunktionella3,4. Detta gör NLUTD svårt att uppföljning, om bara urinblåsan undersöks i en enda cystometriska mätning. För att få tillförlitliga resultat som är jämförbara med människor, är det viktigt att noggrant mäta både urinblåsan och externa urethral sphincter funktionen och dess interaktioner2. Dessutom är det viktigt att utföra funktionella analyser i vaken råttor eftersom anestesi är mycket sannolikt att förändra urinblåsan funktion2,5,6. En bra cystometriska inspelning i vaket djur är grunden för identifieringen av urinblåsan funktion och fel7.

Små djur cystometry stationen används (t.ex., Catamount cystometry station (CCS)) är en enhet att utföra cystometriska analyser i vaken smådjur8. Med hjälp av en permanent urinblåsan kateter och implanterade externa urethral sphincter elektroder, kan repetitiva mätningar utföras över en längre tidsperioder2. Således, CCS ger ett värdefullt verktyg för icke-neurogen och NLUTD utvärderingar i gnagare modellen, där patomekanism kan ändra under kort - eller medelfristiga uppföljning. Denna metod inkluderar dessutom en artefakt-reducerad cystometriska analys med hjälp av en fasthållning för att dimensionera urinblåsan vaken råttor.

I detta papper beskriver vi den kirurgisk metoden för att permanent implantat en kateter i urinblåsan och externa urethral sphincter elektroder, tillsammans med cystometriska mätningar i vaken råttor.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alla förfaranden beskrivs här godkändes av österrikiska statliga etikkommitté för djurförsök (Bundesministerium für Wissenschaft, Forschung und Wirtschaft, WF / V /3b) och var i enlighet med föreningen för bedömning av laboratorium Djur vård riktlinjer för användning av djur. Råttor som används för detta tillvägagångssätt var kvinnliga, 12-vecka-gammal Lewis råttor. Använd sterila instrument i hela protokollet.

1. materiella beredning

  1. Tillverkning av katetern
    1. Skär katetern (polyeten rör PE-50) i lämplig längd (20-25 cm) för att passa storleken på djuret.
      Obs: Lämna några extra längd för tunnlar och enklare hantering.
    2. Blossa ena änden upp med en lättare att få en rundad spets. Kontrollera om sista lämpliga öppning och trubbiga änden av katetern.
    3. Placera en 2 mm lång silikon tub över katetern tills den ligger precis nedanför utsvängda slutet.
  2. Tillverkning av elektroder
    1. Förbereda en polytetrafluoreten-belagd ståltråd på 20-25 cm (lämplig längd beroende på storleken av djuret).
    2. Förbereda en silvertråd 2 cm i längd och vrid ändarna tills en liten ögla kvar. Remsor av 2 mm av Teflon isoleringen i ena änden. Löda den tvinnad silvertråd som avslutning på den avskalade ståltråd.
    3. Applicera konventionella nagellack på zonen beläggning. Förbered 4 mm lång polyeten slangen över regionen bestruket och försegla i slutet genom att man värmer komprimera tången.

2. djurens förberedelse

  1. Anestesi
    1. Använd en lämplig anestesi cocktail godkända av Institutionen för allmän anestesi.
    2. Förbereda anestesi cocktail med medetomidin (0,15 mg/kg), midazolam (0.08 mg/kg) och fentanyl (0,01 mg/kg), och injicera intramuskulärt genom en 1 mL spruta med en 27 Gauge nål.
  2. Kirurgisk beredning
    1. Raka buken med en elektrisk rakhyvel, inklusive genitala regionen och bakre regionen på nivån för scapulae.
    2. Desinficera buk och hals regioner med 70% etanol första och sedan 3 alternerande scrubs med povidon-jodlösning.

3. urinblåsa katetern Implantation

  1. Utföra en låg mittlinjen laparotomi på nivå i tredje och fjärde spenen (ca 2 till 2,5 cm i längd) med hjälp av en skalpell för huden och en kirurgisk sax för buken muskel.
  2. Exponera blåsan genom att styra den buk-väggen i cranio-kaudala riktning och fixa det i detta läge genom att placera baksidan av en pincett bakom urinblåsan att undvika omplacering.
  3. Placera en handväska-sträng sutur runt urinblåsan kupolen med en 6-0 monofilament icke-resorberbar sutur med en Kona-tip kanyl.
  4. Incisionsfilm urinblåsan kupolen inuti handväskan-strängen, antingen genom skalpell tip eller 18G nål, infoga urinblåsan katetern (se protokollet steg 1).
  5. Infoga katetern förfyllda med steril fysiologisk 0,9% natriumkloridlösning och försiktigt dra in urinblåsan katetern tills blossade öppning av katetern är placerad precis under urinblåsan dome.
  6. Säkra handväska-sträng suturen runt katetern och göra en stop-sutur runt Kateterkroppen för ytterligare fixering.
  7. Kontrollera läckage via urinblåsan kupolen långsamt fyller urinblåsan genom katetern med steril fysiologisk 0,9% natriumkloridlösning.

4. urinrörets ringmuskel elektrod Implantation

  1. Förbered tre elektroder för implantation (se protokollet steg 1).
  2. Markera en elektrod med en färgad permanent tuschpenna för ytterligare identifiering av framtida null elektroden. Desinficera elektroder med 70% etanol.
    Obs: Katetrar är inte lämpliga för värme och kemisk sterilisering procedurer. Istället kalla sterilisera elektroderna för 24 h.
  3. Utöka buken snittet av kirurgisk sax upp till blygdbenet, men skär inte blygdbenssammanfogningen.
  4. Identifiera urinröret och skapa en trubbig ficka med fina tången på båda sidor av urinröret, men undvika trauma av fartyg eller nerver.
  5. Identifiera lämpliga fett påsar nära urinröret inom detta fönster.
  6. Fixa elektroder bilateralt till lämpligt fett påsen med 6-0 monofilament icke-resorberbar sutur.
    Obs: Slutliga placering av elektroderna bör bilaterala vid mitten av regionen av urinröret.
  7. Knyt två elektroderna tillsammans med 6-0 monofilament icke-resorberbar sutur.
  8. Sutur markerade null elektroden till bukväggen muskeln inom avstånd från urinröret. Knyt alla tre elektroder tillsammans med en enda sutur.

5. tunnel

  1. Gör en liten hud snitt mellan scapulae för tunnlar.
  2. Tunnel elektrod sladdar till halsen och göra en sista kontroll för rätt placering och kontrollera position elektroder efter tunneling.
  3. Tunnel urinblåsan katetern till scapulae nivå - var uppmärksam på blåsan medan tunneling katetern Undvik urinblåsan vrida. För detta ändamål, Håll katetern strax före in urinblåsan kupolen för att undvika vridning av blåsan.
  4. Stäng magmusklerna genom kontinuerliga eller intermittenta stygn med en 4-0 polyfilament resorberbar sutur. Nära huden snittet av avbrutna madrass suturer.
  5. Stretch djur till sin fulla längd ha maximal dilatation av elektroden ledningar och kateter.
  6. Fixa katetern och elektroden ledningar genom en sjunkit in sutur till axel muskler.
  7. Nära huden av en enda söm med 4-0 sutur.

6. sele passande

  1. Passar en sele för att djuret genom att dra selen över huvudet av djuret och dra frambenen till slutet läge mellan de två silikon remsorna. Kontrollera sele storleken av väga av djuret före operationen med distributören.
  2. Tunnel urinblåsan katetern till centrala hål för sele och elektroder genom skräddarsydda hålet av en drill anpassas till storleken på elektroden trådarna.
  3. Justera selen genom att dra silikon remsorna. Justera selen så att det inte är för lös, men säkerställa utrymme kvar för att behålla rörliga förmågan hos råtta.
  4. Använd en kabel rem fixar kisel remsor.
  5. Skär längden på urinblåsan katetern till 3 cm ovanför sele, ansluta till 23-G proppen och äntligen fixa det till selen.

7. tillverkning av elektrod kontakt

  1. Förbered tre små värme-krympslangar (en annan färg för null elektroden). Förbered två ytterligare värme krympslangar i lämplig större storlek.
  2. Förkorta längden på elektroden trådarna till en optimal längd för att kunna koppla in senare till kvinnliga kontakten utan att vara för lös eller för kort. Remsor av Teflon isoleringen av de tre kablarna (ca 2 mm), och vrida ståltråd till en sträng.
  3. Placera stort värmer krympslangar över alla ledningar, placera de små rören individuellt för alla tre trådarna och använda färgade röret för null elektroden.
  4. Löda elektroderna till den manliga 3-anslutning-kontakten. Placera null elektroden i mitten och krympa området tre små enskilda rör ovan lödda.
  5. Krympa först av de större rör slutet av enskilda tube ändelser och sista stora röret till manlig kontakt gränsen.
  6. Anslut hankontakten till honkontakten fast till sele och fixa med en bit tejp för ytterligare säkerhet.

8. efter operationen vård

  1. Rengöra kirurgiska områden och desinficera med povidonjod.
  2. Placera djuret på en värmedyna tills vaken och ge 0,9% natriumkloridlösning för vatten substitution, baserat på riktlinjerna som lokala djurens vård under och efter operation.
  3. Administrera analgetika (meloxikam 1 mg/kg) och antibiotika (sulfadoxinum 200 mg, trimethoprimum 40 mg, 15 mg/kg) som en kombinerad injektionslösningen subkutant. Två gånger dagligen, ge analgetika (morgon och kväll), och en gång per dag ger antibiotika, fem efterföljande dagar.
  4. Fortsätt med antibiotika vid samma dos över hela uppföljningsperioden på två till tre injektioner per vecka.
  5. Kontrollera dagligen för lämplig montering av selen och utföra en kirurgisk fältbesiktning, speciellt i halsen regionen. Justera selen om det blir för hårt genom att försiktigt dra på silikon remsorna.
  6. Spola katetern regelbundet en gång per vecka för att undvika en blockad.

9. förberedelser inför cystometriska mätning

  1. Utföra de första cystometriska mätningarna efter sex postoperativa dagarna.
    Obs: Tidigare mätningar kan påverkas av smärtstillande medicinering och/eller urothelial irritation på grund av katetern implantation.
  2. Slå på huvudbrytaren, datorn och EMG förstärkaren.
  3. Fyll sprutpumpen med rumstemperatur värms 0,9% natriumklorid. Öppna de tre sätt kontakterna en efter den andra i ett fallande sätt, start från pumpen, och spola rören.
    Obs: Kontrollera noga för kvarvarande luftbubblor, som bubblor kommer att förändra cystometriska mätningarna.

10. kalibrering

  1. Starta programmet uroflowmeter programvaran och gå till kalibrering.
  2. Nära tre sätt kontakten till pumpen och djur.
  3. Öppna ventilen till anslutna manometern och tryck på noll i programmet.
  4. Justera trycket på manometern till 100 mmHg, och trycker 100 mmHg i programmet. Tryck på bekräfta om du vill spara justeringen kalibrering. Fönstret stängs automatiskt.
  5. Stäng ventilen till manometern och öppna trevägs kontakterna från pumpen till djuret vara redo för mätning.

11. animal databas (djur DB)

  1. För att registrera djur, ge djuret en koncis ID.
  2. Ange ytterligare data, till exempel datum för SCI, start av behandling, datum för katetern implantation, experimentella gruppen och födelsedatum av djuret.
  3. För att slutligen logga data, tryck på ”lagra post” och spara filen.

12. mätning inställningar innan inspelning

  1. Starta programmet genom att trycka på startknappen.
  2. Djuret och trycker på tare skala och noll tryck.
    Obs: Var uppmärksam medan placera djuret i fasthållning, sådan att ingen kabel har fastnat, eftersom detta kan leda till en borttagning av en tråd av EMG kabeln.

13. djurens förberedelse

  1. Stickproppen dras katetern och EMG stickkontakten ur selen.
  2. Sätta på råtta i fasthållning. Stäng fasthållning och lås selen med en klämma.
  3. Få katetern och EMG kontakten ur fasthållning.
  4. Placera fasthållning i enheten catamount. Sätta svansen genom röret och fixa röret med tejp för att undvika rörelser.
  5. Anslut hankontakten EMG till inspelning honkontakten EMG.
  6. Tryck på noll tryck igen och Anslut sedan katetern till fyllning/inspelning röret. Kontrollera trycket i programvaran.
    Obs: Trycket ska vara positiv, runt 5-10 cm H2O vid baslinjen. Om trycket är negativa, koppla bort katetern från kanylen, tryck på noll tryck och sedan återansluter katetern.

14. inspelning

  1. Om den katetern och EMG-kabeln är ansluten, tryck på Kör pump och inspelning.
  2. Anpassa fyllning hastigheten experimentella behov i μL/min.
  3. Notera tid den inspelning börjat och rumstemperaturen i Loggboken.
  4. För att stoppa den cystometriska inspelning, stoppa pumpen genom att trycka på Kör pump och tryck på inspelning igen.
    Obs: Pumpen kommer att vara avstängd och den grön lampan på pumpen är avstängd.
  5. Koppla katetern och använda 23G propp kontakten Stäng katetern slutet. Koppla från EMG kabeln.
  6. Öppna framsidan av fasthållning och vägleda råtta ur fasthållning.
    Obs: Hantera råttan noggrant och övervaka kablarna för att undvika någon låsning av kablar.
  7. Koppla in katetern i selen. Anslut igen EMG kontakten vid sele, och sätta en bit tejp runt pluggen.
    Obs: Om djuret har en nedre urinvägarna sjukdomstillstånd, uttrycka blåsan i slutet manuellt för att undvika overdistention av blåsan.
  8. Lägger djuret tillbaka till dess buren.
  9. Stäng programmet genom att trycka på exit.
  10. Ren fasthållning och bägare.
  11. Nära tre sätt kontakterna till pumpen och djur outlet.
  12. Stäng av datorn, EMG enheten och systemet via huvudbrytaren.
    Obs: Data som sparas i mappen separat ”loggad data” med filen undermapp av uppmätta råtta-ID. Enda inspelningar är sorterade i enda råtta ID mappar efter datum.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

En schematisk visar processen för vaken cystometriska mätningar presenteras i figur 1 och den inre anatomin för urinblåsan katetern implantation visas i figur 2. Operationen tar ca 2 h. postoperativ analgesi och antibiotika, som beskrivs i protokollet, täcka smärta och infektioner under fem dagar efter operationen. Inga tecken på någon smärta märktes därefter. Två gånger daglig inspektion av buken, buksmärta suturen och hals suturen är nödvändigt att bibehålla djurets hälsa. Sele kontroll (position och täthet) bör utföras en gång dagligen i de första fem dagarna och senare på en regelbunden basis. Buken suturer avlägsnas på 10th postoperativa dagen.

Vi använda mjuka, icke-woody sängkläder för de första 10 dagarna efter operationen för att undvika inflammation. Sängkläderna byts minst två gånger i veckan för att ytterligare sänka risken för inflammation. Djur hålls i samma hölje, som gruppboende ökar risken för sele, katetern eller elektrod kabel bita av bur kompisar.

Katetern bör tömmas minst en gång per vecka, antingen under en cystometriska mätning eller genom att spola katetern manuellt med 1-3 mL steril 0,9% natriumkloridlösning på en låg infusionshastighet (figur 3). Vanlig antibiotika täckning av djuren ytterligare minskar risken för infektioner och urinvägar stenbildning. Övervakning vätska upptag är ytterligare en viktig punkt att förhindra urin stenbildning. Citronsyra i låga koncentrationer (2-3%) administreras antingen intravesically via katetern eller i dricksvattnet att förhindra njursten bildas.

Framgången för det kirurgiska ingreppet, samt att upprätthålla urinblåsan katetern och elektroder intakt, är omkring 80%. I de återstående 20% av fallen var det största problemet avlossning av elektroden trådarna från kontakten. En försiktig fastsättning av elektroden trådarna till selen är således avgörande att undvika elektrod förlust.

Cystometriska mätningar görs oftast tills tre på varandra följande cykler för tömning registreras per mätning, som tar mellan 20-40 min, beroende på ångesten och Hanteringsstatus råttans. Den första cystometriska mätningen görs vanligen en vecka efter katetern implantation kirurgi.

Läs ut parametrar cystometriska inspelningen finns baslinjen trycket, tröskel trycket, maximal överaktiv trycket, annullerade volym, Genomsnittligt flöde, tömning tid, medeltryck, efterlevnad av urinblåsan, och samtidig läsa av den yttre urethral sphincter EMG-aktivitet (figur 4).

På varandra följande cystometriska mätningar under uppföljningsperioden kan utföras under minst fyra veckor efter operationen. Om raden katetern spolas regelbundet, är katetern blockeringen inga problem. Regelbunden hantering och optisk kontroll råttor bör utföras under hela uppföljningsperioden.

Om katetern är snodda eller blockerad, kommer intravesical trycket öka linjärt upp till mycket höga tryck (över 100 cm H2O). I det här fallet fyllning ska stoppas och synliga katetern slutet bör kontrolleras för veck. Om inga veck ses, bör katetern kontrolleras för ett blockerat utlopp. För detta ändamål kan katetern spolas manuellt via katetern. Om vätska inte lätt flyter in i urinblåsan, kan dra fram och tillbaka lätt försökas. För ett sista försök, kan en sura rodnad lösning (citronsyra 2-3%) användas att rensa blockerade regionen inom katetern. Denna lösning kan ha en högre chans att lösa upp blockaden, ännu, urinblåsan kommer att vara irriterad efter framgångsrika spolning och mätningar i följd bör endast utföras två dagar efter spolning med sura lösning. Om ingen vätska kan spolas in i urinblåsan, katetern blockeras permanent och inga ytterligare mätningar är möjliga, och djuret är förlorad för uppföljning.

Figure 1
Figur 1: Schematisk ritning av cystometriska mätningarna i vaken råttor. Denna siffra har anpassats från2. (en) Illustration av den urodynamiska setup. (b) Lab tågstation för urodynamiska granskning. (c), Implantation av den externa urethral sphincter Elektromyografi elektroder sidled till urinröret, intraoperativ Visa. (d), utsikt över urinblåsan dome i urinblåsan katetern implantation, intraoperativ stund Visa. (e) efter implantation av elektroder och kateter, råtta kommer att förses med en sele att säkert lagra kontakter och kopplingar. (f) mänskliga urodynamik. Siffror i b-e avser legenden i en. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 2
Figur 2: inre anatomin hos råtta för urinblåsan katetern implantation. Denna siffra har ändrats från8.

Figure 3
Figur 3: Flushing av katetern raden av en råtta. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 4
Figur 4: urodynamiska tracings i ett djur 12 dagen efter katetern implantation. (en) representant urodynamiska spårning från en naiv råtta. Överst visas urinblåsan trycket spårning, i mitten utsöndras urinen vikt spårning, och på botten externa urethral sphincter EMG spårning. (b), Zoom-fönstret från en naiv djur 60 s, tagna från (en). En viktig anmärkning är att det finns mindre externa urethral sphincter EMG aktivitet under tömning än före och efter tömning. Överst visas urinblåsan trycket spårning, i mitten utsöndras urinen vikt spårning, och på botten externa urethral sphincter EMG spårning. Längst ner visas en värme tomt med tiden matchade frekvens spektrogram (motsvarande frekvens vid den aktuella tiden). Rött representerar en hög effekt och blå representerar låg effekt. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Det här protokollet beskriver det kirurgiska ingreppet av en permanent kateter och urinrörets ringmuskel elektroder implantation och den cystometriska inspelning teknik i vaken, lätt återhållsamma råttor inklusive båda samtidig analys av urinblåsan och yttre urethral sphincter.

Kritiska steg under kirurgi är noggrann implantation av urinblåsan katetern, undvika läckage och omfattande manipulation. Dessutom är en noggrann implantation av elektroderna bilaterala till urinrörets externa sfinktern avgörande för en sund mätning av den externa urethral sphincter. En noggrann undersökning av kirurgiska fälten efter implantation är också avgörande för att bibehålla djurets hälsa. Antibiotika täckning under uppföljning hjälper till att förebygga infektioner längs raden kateter, liksom förekomsten av urinvägsinfektioner.

Under cystometriska mätning blir en hanteras råtta lugnare och mer avslappnad än en råtta som inte hanterades tidigare. Således skilja cystometriska inspelningen i dess resultat. Dessutom fasthållning erbjuder råttan ett begränsande utrymme med ett mörkt främre område att känna sig mer bekväm och minskar därför stressnivåer. I andra publicerade vaken cystometriska mätningar, kan råttor fritt flytta i mäta buren. Dock detta bär en högre artefakt risk under mätningen och kan öka tiden för inspelning, och också stressnivån i djuret. I friska råttor, kan optimal cystometriska mätningen replikeras på flera mätpunkter av tid under uppföljning. Under cystometriska mätningen är problem som ofta uppstår böjd katetrar eller ett misstag i stegvis överledning av protokollet. Om en teknisk eller programvara fel inträffar, rekommenderas en förnyad initiering av cystometriska mätning och stegvis upprepning av protokollet för felsökning.

Begränsningar av denna teknik är den variabilitet cystometriska inspelningar, strukturella förändringar i urinblåsans vävnaden på grund av implanterade katetern, vilket kan hämma histologiska eller molekylär biologiska undersökningar av denna vävnad, och den enda bostäder av djuren under uppföljningsperioden. Dessutom denna teknik har endast testats hos honråttor, tillämpligheten och utfall för hanråttor har inte ännu undersökts.

Den största fördelen med denna teknik är samtidig mätning av urinblåsan och externa urethral sphincter, samt inställningen vaken mätning. Således finns en mer translationell undersökning av de nedre urinvägarna i vaket djur, i jämförelse med den inre, terminala cystometriska analysen i anestesi5,6,9,10. Med detta synsätt kan dessutom progressionen av en nedre urinvägarna dysfunktion eller patologi följas på samma djur över tid, liksom behandling framgångar. Särskilt kan NLUTD undersökas på en tid, som inte var möjligt i full utsträckning med gemensamma cystometriska teknik2.

Avslutningsvis används presenteras operationen och cystometriska mätning för flera, artefakt-reducerad analyser av de nedre urinvägarna, inklusive samspelet mellan urinblåsan och den externa urethral sphincter vaken råttor.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna har något att avslöja.

Acknowledgements

Författarna har inte några bekräftelser.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Polyethylene tubing PE 50 Becton Dickinson 427411 Catheter
Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) Ethicon EH7403H Suture
Teflon coated steel wire Cooner wire AS631 Electrode material
Silver wire 0.250 mm World Precision Instruments AGW1030 Electrode material
Rotilabo - PVC tube Carl Roth 97241 Harness
Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) Ethicon V4940H Suture
Quick Connect Single Harness SAI Infusion Technologies QCH-23CW Harness
Shrinking tubes ChiliTec 17894 Electrode soldering
Soldering wire Pb60 Sn40 Stannol LD0029 Electrode soldering
Fluxing agent 157 Castolin Eutectin 157 0150 Electrode soldering
Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box Preci-dip 801-87-050-10-001101 Electrode soldering
Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box Preci-dip 890-18-003-10-001101 Electrode soldering
Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis) Catamount Research and Development Inc. CAT-CYT-R
Differential amplifier with active headstage AD instruments DP-311 EMG amplifier
Restrainer Medium size for rats 200-300 g emka Technologies HLD-RM
Uro Dyn Software Zürich of University MTA-based
Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age Charles River, Sulzfeld, Germany animals

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. Rodent models for urodynamic investigation. Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).
  2. Schneider, M. P., et al. A novel urodynamic model for lower urinary tract assessment in awake rats. BJU Int. 115, Suppl 6. 8-15 (2015).
  3. Cruz, C. D., Cruz, F. Spinal cord injury and bladder dysfunction: new ideas about an old problem. Scientific World Journal. 11, 214-234 (2011).
  4. de Groat, W. C., Yoshimura, N. Plasticity in reflex pathways to the lower urinary tract following spinal cord injury. Exp Neurol. 235, 123-132 (2012).
  5. Matsuura, S., Downie, J. W. Effect of anesthetics on reflex micturition in the chronic cannula-implanted rat. Neurourol Urodyn. 19, 87-99 (2000).
  6. Cannon, T. W., Damaser, M. S. Effects of anesthesia on cystometry and leak point pressure of the female rat. Life Sci. 69, 1193-1202 (2001).
  7. Patra, P. B., Thorneloe, K. S. Enhanced sensitivity to afferent stimulation and impact of overactive bladder therapies in the conscious, spontaneously hypertensive rat. J Pharmacol Exp Ther. 338, 392-399 (2011).
  8. Herrera, G. M., Meredith, A. L. Diurnal variation in urodynamics of rat. PloS One. 5, e12298 (2010).
  9. Chang, H. Y., Havton, L. A. Differential effects of urethane and isoflurane on external urethral sphincter electromyography and cystometry in rats. Am J Physiol Renal Physiol. 295, F1248-F1253 (2008).
  10. Yaksh, T. L., Durant, P. A., Brent, C. R. Micturition in rats: a chronic model for study of bladder function and effect of anesthetics. Am J Physiol. 251, R1177-R1185 (1986).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Video Stats