Multimodala självlysande och Positronic-emission Tomography/Computational tomografisk avbildning av multipelt myelom benmärgen xenograft i NOG möss

Cancer Research

Your institution must subscribe to JoVE's Cancer Research section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Här använder vi självlysande, röntgen, och positron-emission tomography/beräknade datortomografi imaging för att studera hur hämmande mTOR aktivitet påverkar benmärgen-rekonstituerades myelom tumörer i xenograft modell. Detta möjliggör fysiologiskt relevanta, icke-invasiv och multimodala analyser av anti myelom effekten av behandlingar riktar sig benmärgen-rekonstituerades myelom tumörer i vivo.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Gastelum, G., Chang, E. Y., Shackleford, D., Bernthal, N., Kraut, J., Francis, K., Smutko, V., Frost, P. Multimodal Bioluminescent and Positronic-emission Tomography/Computational Tomography Imaging of Multiple Myeloma Bone Marrow Xenografts in NOG Mice. J. Vis. Exp. (143), e58056, doi:10.3791/58056 (2019).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Multipelt myelom (MM) tumörer engraft i benmärgen (BM) och deras överlevnad och progression är beroende av komplexa molekylära och cellulära interaktioner som finns inom denna mikromiljö. Ännu vara den BM närmiljön inte enkelt replikerade i vitro, vilket potentiellt begränsar den fysiologiska betydelsen av många i vitro och ex vivo experimentella modeller. Dessa problem kan övervinnas genom att utnyttja en xenograft modell i vilken luciferas (LUC)-transfekterade 8226 MM celler kommer specifikt engraft i mus skelettet. När dessa möss ges lämpliga substrat, kan D-luciferin, effekter av terapi på tumörtillväxt och överlevnad analyseras genom att mäta förändringar i självlysande bilder (BLI) producerad av tumörer i vivo. BLI data kombinerat med positronic-emission tomography/computational tomografi (PET/CT) analys metabola märkpenna 2-deoxy - 2-(18F) fluoro-D-glukos (18F-FDG) används för att övervaka förändringar i tumör metabolism över tid. Dessa imaging plattformar möjliggör flera noninvasiv mätningar inom den tumör/BM mikromiljö.

Introduction

MM är en obotlig sjukdom som består av maligna plasma B-celler som infiltrera BM och orsaka bendestruktion, blodbrist, nedsatt njurfunktion och infektion. MM gör upp 10-15% av alla hematologiska maligniteter1 och är den vanligaste cancerformen att involvera de skelett2. Utvecklingen av MM härstammar från de onkogena omvandlingen av långlivade plasmaceller som är etablerade i den stilbildande centrerat av lymfvävnad innan så småningom homing till BM3. BM kännetecknas av ytterst heterogen nischer; inklusive olika och viktiga cellulära komponenter, regioner låg pO2 (hypoxi), omfattande vaskularisering, komplexa extracellulära matriser och cytokin och tillväxtfaktor nätverk, alla bidrar till MM tumorgenesis4. Utvecklingen av en disseminerad MM xenograft-modellen som kännetecknas av tumörer som är strikt rekonstituerades i BM skulle således vara ett mycket kraftfullt och kliniskt relevanta verktyg att studera MM patologi i vivo5,6. Många tekniska hinder kan dock begränsa effektiviteten i de flesta xenograft-modeller, vilket gör dem dyra och svåra att tillämpa. Detta inkluderar problem med enhetliga och reproducerbara tumör engraftment inom den BM nischen, en förlängd tid till tumörutveckling och begränsningar i möjligheten att direkt observera och mäta förändringar av tumör tillväxt/överlevnad utan att behöva offra möss under loppet av de experiment7,8.

Detta protokoll används en modifierad xenograft-modell som utvecklades ursprungligen av Miyakawa o.a. 9, i som en intravenös (IV) utmaning med myelomceller resulterar i ”sprids” tumörer som konsekvent och reproducibly engraft i BM av NOD/SCID/IL-2γ(null) (NOG) möss10. I situ visualisering av dessa tumörer sker genom den stabila transfection i det 8226 mänskliga MM cell med en LUC allel och seriellt mäta förändringar i BLI producerad av dessa rekonstituerades tumör celler6. Viktigast av allt, kan denna modell utökas för att utnyttja olika andra LUC-uttrycka mänskliga MM cellinjer (t.ex., U266 och OPM2) med en liknande benägenhet att specifikt engraft i skelettet av NOG möss. Identifiering av tumörer av självlysande avbildning av mössen följs genom att mäta upptaget av radioaktiva sonder (till exempel 18F-FDG) av PET/CT. tillsammans, möjliggör detta ytterligare karakterisering av kritiska biokemiska vägar (dvs, förändringar i ämnesomsättningen, förändringar i hypoxi och induktion av apoptos) inom den tumör/BM mikromiljö. De stora styrkan i denna modell kan belysas av tillgången till ett brett utbud av radiomärkt, självlysande och fluorescerande sonder och markörer som kan användas för att studera MM progression och patologi i vivo.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alla djur förfaranden som beskrivs nedan godkändes av den institutionella djur vård och användning kommittén (IACUC) av det större Los Angeles VA Healthcare systemet och utfördes sterila och patogenfria villkor.

1. beredning av luciferas-uttryckande 8226 celler (8226-LUC)

  1. Upprätthålla de mänskliga MM cell fodrar, 8226, i RPMI-1640 medium kompletteras med 10% fetalt bovint serum (FBS) och 1% penicillin-streptomycin vid 37 ° C i en fuktad atmosfär som innehåller 95% luft och 5% koldioxid (CO2).
  2. Generera stabil LUC-uttryckande reporter 8226 celler genom transfecting 1 x 106 8226 celler med en luciferas reporter vektor följt av ett urval med hygromycin (100-350 mg/mL) som tidigare beskrivs6.
  3. Upprätthålla cellerna under sterila odlingsskålar standardvillkor för 2-3 veckor, ändra medium varannan dag, tills inrättandet av ett stabilt transfekterade 8226 cellinje har genererats.
  4. Bekräfta i vitro luciferas aktiviteten i 1 x 106 transfekterade celler/100 µL fosfatbuffrad saltlösning (PBS) genom att lägga till luciferas substratet, D-luciferin (150 µg/mL arbetslösning i förvärmd odlingsmedium), och mäta den mareld i cellerna i ett provrör eller plattan med 96 brunnar med en luminometer6.

2. ortotop Xenograft modell

  1. Upprätthålla NOG möss (4-6 veckor gamla, manlig eller kvinnlig) steril/patogenfria villkor i en lämplig djurens vård anläggning.
  2. Förbereda 8226 LUC-transfekterade cellerna för IV injektion i NOG möss (~ 5 x 106 celler/mus) på dagen för experimentet. Tvätta cellerna 3 x i iskall PBS, räkna dem och återsuspendera dem i iskall PBS (minus antibiotika och FBS) med en slutlig koncentration på 5 x 106 celler/200 µL av PBS) i ett sterilt provrör. Hålla cellerna på is och utmana möss så snart som möjligt (inom 30-120 min).
  3. Söva musen (med isofluran, 1-3% i luften på 0,5 - 1 L/min) och placera djuret i ryggläge på en värmedyna med huvudet vänd bort. Kontrollera graden av anesthetization genom att nypa tån. Tillämpa oftalmologiska salva till ögonen.
  4. Injicera 8226-LUC celler i möss genom svans (200 µL/injektion) använder en 1 mL spruta av insulin och en 26-G nål.
    Obs: En värmelampa kan användas för att värma svansen, därmed utvidga venen och öka effekten av injektioner.
  5. Tillbaka djuret till deras hem bur och övervaka djuren tills de har återhämtat sig helt.
  6. Bekräfta engraftment av 8226-LUC celler i mus skelettet genom att mäta BLI hos sövda möss (beskrivs nedan och visas i figur 1A).
    Obs: BM exudat kan också färgas för mänskliga CD45 uttryck med hjälp av flödescytometri (figur 1B) eller genom immunohistokemi av skördade ben (figur 1 c).

3. mätning av BLI In Vivo

Obs: Vanligtvis mätbara BLI från rekonstituerades tumörer hos möss kan observeras första mellan 10-20 dagar postchallenge, men detta kan behöva bestämmas experimentellt.

  1. Söva musen (med isofluran, 1-3% i luften på 0,5 - 1 L/min) och kontrollera nivån av anesthetization genom att nypa tån. Tillämpa oftalmologiska salva till ögonen.
  2. Ge djuret en IP-injektion (200 µL/injektion) av ”in-vivo-grade” D-luciferin substrat (30 mg/mL utspädd i steril koksaltlösning).
  3. Mäta den BLI inom 5-10 min, efter injektion av luciferin substratet (även om aktiviteten BLI kan vara observerbara i möss för upp till 45-60 min), genom att placera den sövda djuren i ryggläge i små-djur imaging system (figur 2 ). Välj självlysande och Röntga analys och förvärva bilder (figur 3).
    1. Mäta den genomsnittliga radiansen (fotoner/s/cm2/steradian) i valda områden av intresse (ROIs) använda bildprogram (figur 4).
    2. Tillbaka djuret till dess buren och övervaka det tills det har helt återhämtat sig (cirka 15-20 min).

4. behandling av möss med riktad terapi

  1. Mäta baslinjen BLI och Slumpa djuren i behandlingsgrupperna (4-8 möss/grupp).
  2. Behandla möss med en IP-injektion (200 µL/injektion) av temsirolimus (0.2 - 40 mg/kg mus) med hjälp av en regim med fem dagliga IP injektioner följt av 2 dagars vila och en ytterligare fem dagliga injektioner11.
  3. Mäta aktiviteten luciferas (fotoner/s/cm2/steradian) 2 x per vecka som beskrivs i avsnitt 3 och tomt ändringen av BLI över tid. Förändringar i tumören BLI kan presenteras som följetong bilder på möss (figur 5B).
    Obs: Det rekommenderas att daglig övervakning av djuren utföras förrän de presenterar följande symtom (vanligtvis inom 45-60 dagar från första utmaning): vikt förlust (förlust av mer än 10% i förhållande till vikt före implantation) och/eller hind lem förlamning, då de bör bli euthanized använder en CO2 kammare följt av cervikal dislokation.

5. PET/CT analys med 18F-FDG att mäta förändringar i tumör Metabolism

  1. Snabbt djuren i deras hem bur genom att ta bort deras mat för 24 h före försöket att undvika överskott ospecifika upptaget av 18F-FDG.
  2. Förbereda 18F-märkt FDG PET sonder (50-100 µCi/injektion i steril koksaltlösning) på dagen för experimentet. Registrera tid och aktivitet av 18F-FDG sonden med en dos kalibrator.
    Obs: Eftersom 18F har en relativt kort halveringstid (~ 2 h), en noggrann beredning och planering för användning av dessa sonder måste fastställas.
  3. Söva djuret (med isofluran, 1-3% i luften på 0,5 - 1 L/min) och placera den i ryggläge på en värmedyna med huvudet vänd bort. Kontrollera graden av anesthetization genom att nypa tån. Tillämpa oftalmologiska salva till ögonen.
  4. Injicera den sond via svans venen (100 µL/injektion) med hjälp av en skärmad 1 mL insulinspruta och en 26-G nål.
    Obs: En värmelampa kan användas för att värma svansen, därmed utvidga venen och öka effekten av injektioner.
  5. Mäta kvarvarande radioaktiviteten i nål/sprutan i en dos kalibrator och anteckna aktivitet och tid.
    Obs: Standardisering av mus inkubation, dosering och timing är viktigt att säkerställa data reproducerbarhet och jämförbarhet.
  6. Upprätthålla möss under narkos och vid 37 ° C med en värmedyna under hela perioden av sonden upptag (~ 45-90 min).
    Obs: Det är viktigt att mössen förblir quiescent och vid 37 ° C att undvika icke-specifikt upptag av sonden.
  7. Ragla injektionerna 18F-FDG sondens inträffar vid cirka 20 - 30 minuters mellanrum för att säkerställa liknande märkning gånger i möss.
    Obs: Rätt arbetsflöde och tidpunkten för sonden injektionerna resulterar i optimal och reproducerbara imaging villkoren.
  8. Mäta 18F-FDG aktiviteten i en PET/CT små djur imaging system i valda områden av intresse som motsvarar engrafted tumörer (figur 6).
    Obs: Inledningsvis, en 10-minuters statiska PET exponering och en 2-minuters CT exponering rekommenderas, men de exakta exponeringstiderna kan behöva bestämmas experimentellt.
  9. Tillbaka djuren till deras hem burar och övervaka dem tills återhämtat sig helt. Hus på möss i en dedikerad avkastning rum för 24 h medan de sonden sönderfaller till bakgrundsnivåer.
    Obs: På grund av den korta halveringstiden 18F, flera mätningar med en frisk sond kan göras så ofta som 2 x per vecka.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

I inledande pilotstudier utvecklades IV injektioner av 8226-LUC celler i nicka/SCID möss inte BM-rekonstituerades MM tumörer, även om skivepitelcancer MM tumörerna enkelt bildades (100% framgång). Däremot genereras IV utmaningar med 8226 celler i NOG möss (inom 15-25 dagar) tumörer i skelettet (och endast sällan bildas tumörer i icke-skelettet, till exempel levern eller mjälten). Eftersom tumörer i skelettet inte kunde bekräftas visuellt genom att fysiskt undersöka djuren, hade andra metoder anses bekräfta lyckad tumör engraftment och placeringen av tumörer inom BM (figur 1). Liknande betänkanden Miyakawa o.a. 9, humant IgG, producerad av 8226 celler, kunde detekteras i serum hos utmanade NOG möss med hjälp av ELISA (inga data anges), även om dessa uppgifter bekräftas endast engraftment och inte den plats eller omfattningen av tumörer. Seriell avbildning av flera djur visar fördelningen av BM-rekonstituerades MM tumörer (figur 4). Den BLI som produceras av dessa rekonstituerades tumör celler kan då mätas seriellt och icke-invasivt för att bedöma förändringar i tumörens tillväxt och överlevnad hos möss som behandlats med den mTOR hämmare temsirolimus (figur 5). Slutligen användes PET/CT-analys för upptaget av 18F-FDG i tumörer att demonstrera temsirolimus-medierad förändringar i glukosmetabolismen och att detta korrelerade med förändringar i tumörtillväxt (figur 6). Dock av stabilt transfecting 8226 celler med ett luciferas-allel, tillsammans med en optisk imaging/X-stråle analys, kunde den exakta platsen och distribution av MM tumörer i skelettet musen snabbt och icke-invasivt bestämmas.

Figure 1
Figur 1: bekräftelse av engraftment 8226-Luc celler i mus skelettet. (A) NOG möss utmanades med 5 x 106 8226-LUC2 celler IV (mus till vänster) eller med saltlösning (mus till höger). Efter 15 dagar, mössen fick en IP-injektion av D-luciferin substrat och avbildas med hjälp av en liten-djur imaging system. (B) möss offrades, i lårbenet samlades och den BM cellulära exsudat skördades. Uttryck för mänskliga CD45 bestämdes av flödescytometri med en PE-konjugerad anti-human CD45 antikroppen. (C), denna panel visar en immunohistokemi seriell avsnitt av mus lårbenet färgas för hypoxi med pimonidazole (övre paneler) eller mänskliga CD45 (nedre panelerna) hos möss utmanas med 8226 (rätt panelerna) eller saltlösning (kontroll; vänster paneler). Asterisken anger placeringen av ett stort blodkärl i avsnitten följetong. Skalstapeln = 100 µm. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Figure 2
Figur 2: sövda NOG möss visar positionering i imaging system före mätning BLI signal från benmärgen-rekonstituerades MM tumörer. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 3
Figur 3: uppställning av den optisk imaging och Röntga analys av självlysande signalen som samlats in från NOG möss. När djuren har varit framgångsrikt utmanat och engraftment av tumörer i BM har bekräftats, kan mössen vara randomiserade i behandlingsgrupperna. Vid olika tidpunkter under experimentet, kan djuren övervakas för ändringar i BLI. Eftersom förfarandet är noninvasiv, skulle övervakningsfrekvensen för kunna ändras för att återspegla den förväntade tillväxten av tumörer, samt hur snabbt cancercellerna svarar på behandling. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 4
Figur 4: Serial avbildning av flera djur visar fördelningen av benmärgen-rekonstituerades MM tumörer. Regionkommittén sevärdheter (ROI) för varje mus identifieras. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 5
Figur 5: förändringar i BLI av rekonstituerades tumörer i NOG möss under en anti-MM terapeutiska regimen. (A) denna panel visar en förändring i genomsnittlig glans (p/s/cm2/ser) i temsirolimus (20 mg/kg mus)-behandlade NOG möss utmanas IV med 5 x 106 celler. När mössen observerades för att vara positivt för rekonstituerades tumörer, randomiserades de till olika behandlingsgrupperna. Mössen fick fem IP-injektioner dagligen, följt av 2 dagars vila och, sedan en ytterligare fem IP-injektioner av temsirolimus (staplarna på x-axeln visar dagarna behandling) eller kontroll av fordon. På olika dagar, mössen fick IP-injektioner av ”i vivo-grade” D-luciferin, och BLI mättes med en optisk imaging plattform. Värdena representerar den genomsnittliga radiance (p/s/cm2/ser) ± ett 95% konfidensintervall. (B) Detta Kaplan-Meier tomt visar förändringen i andelen överlevande möss över tid. Möss som hade nått slutpunkt kriterierna (dvs, en förlust av > 10% kroppsvikt eller bakben förlamning) var humant avlivas. (C), denna panel visar representativa bilder av möss tagit dagar 28, 35 och 40, visar förändringar i aktiviteten LUC. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 6
Figur 6: Serial imaging och relativa förändringar i de 18F-FDG upptaget av PET/CT. (A) denna panel visar seriell avbildning av samma mus för Mareld (optisk imaging/X-stråle) avbildning och 18F-FDG upptag av PET/CT. BLI mättes hos sövda möss och PET/CT bildtagning av samma mus spelades 24 h senare. Musen fastade under natten och på dagen för studien, mottog en IV injektion 50 µCi 18F-FDG. Mössen bibehölls under anestesi under sonden upptag ruvning (60 min) och sedan analyserades för 18F-FDG upptag av PET/CT-analys. Tumörer (T1 och T2) indikeras. H = hjärta, K = njure och B = urinblåsan. (B) denna panel visar relativa förändringar (i procent av kontrollgrupp tumörer) i 18F-FDG upptag kontroll möss (ingen behandling) eller temsirolimus (20 mg/kg mus)-behandlade möss (mätt vid dagar 22, 35 och 40). Data presenteras som medelvärdet (n = 5 möss) ± 1 S.D. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Trots en mängd prekliniska xenograft-modeller MM6,9,11,12,13fortfarande möjligheten att studera tumören/BM interaktioner inom den BM mikromiljö svårt 14. de metoder som beskrivs här tillåt för den snabba och reproducerbara engraftment av 8226-LUC tumörer celler i skelettet av NOG möss.

De kritiska steg i detta protokoll inblandade inrättandet av luciferas-uttryckande MM cellinjer och kontrollen av ett stabilt uttryck luciferas in vitro-15. När cellinjer har fastställts, NOG möss utmanas av IV injektion och engraftment av tumörer till skelettet bekräftas genom att mäta den BLI aktivitet i vivo (vanligtvis inom 10-20 dagar postchallenge) (figur 1A). Användning av NOG möss är viktigt eftersom andra nedsatt immunförsvar stammar (såsom nicka/SCID) inte utgör vanligtvis BM-rekonstituerades tumörer. Den relativt hög framgången på implantation (> 90%) och korta intervallet att iaktta en positiv BLI signal gör denna modell perfekt för en hög genomströmning och längsgående analys av anti-MM terapeutiska modaliteter (figur 4). En annan mycket viktig aspekt av denna modell är att cellinjer som BM-rekonstituerades MM behålla deras morfologiska och immunologiska funktioner av överordnade cellinjer (t.ex., 8226, U266); de har konsekvent och reproducerbart tillväxtmönster och uppvisar egenskaper av patientens sjukdomar, såsom ökande serumnivåerna humant IgG paraprotein och bildandet av ben lesioner.

Fördelen med denna strategi är utnyttjandet av dessa kraftfulla bildteknik upprepade gånger studera biokemiska och molekylära komponenter i den tumör/BM mikromiljö under loppet av sjukdomsförloppet och som svar på anti-tumör terapier. I detta experiment fann vi att inriktning mTOR aktivitet hos möss med BM-rekonstituerades myelom tumörer resulterade i en minskning av självlysande mätningar som kunde observeras över tid. Vi fann dessutom att förändringar i upptaget av 18F-FDG sonden (figur 6B) i dessa samma tumörer var korrelerade till förändringar i självlysande signalen (figur 5B). En annan viktig komponent i detta förfarande är att flera biokemiska variabler kan mätas inom tumören med tiden. Detta är särskilt viktigt eftersom tumör progression är en dynamisk process som kännetecknas av förändringar i fysiologi och mikromiljö egenskaper. Sålunda, detta förfarande, på grund av sin icke-invasiva karaktär och den relativt korta halveringstiden av sonderna, tillåter flera longitudinella analyser av förändringar i den tumör respons på behandling.

Efter mastering tekniken, presenterar de framtida tillämpningarna av teknik en stor flexibilitet. Exempelvis skulle användning av andra självlysande eller fluorescerande Taggar (t.ex., fluorescently taggade antikroppar) också kunna utnyttjas, som kunde olika andra 18F-märkt sonder och radiofarmaceutiska föreningar att studera specifika biokemiska vägar eller processer i den tumör/BM mikromiljö. På grund av den korta halveringstiden för många av dessa radionucleotides, kunde flera seriella mätningar göras under ett specifikt experiment studera drog upptag, distribution, kinetik och förfall. Med denna xenograft modell, MM förmåga att utnyttja anaerob glykolys och andra metaboliska vägar (dvs, fettsyra syntesen) genom att använda andra sonder (t.ex.,18F-fluoro-2deoxyglucose [18F-FDG] och 18 F-fluoro-4-Thia-Palmitate [FTP])16,17, liksom förmågan att mäta anti-proliferativ effekterna av behandling med en annan allmänt används sonden (dvs.3'-deoxy-3'-[18F] fluorothymidine [ 18F-FLT]) kan ingå i de experimentella mönster. Dessutom kan det vara möjligt att direkt mäta celldöd genom att använda 18F-Annexin B1 för att mäta apoptos i vivo18. Många av dessa föreningar är kommersiellt tillgängliga.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författaren Kevin Francis är anställd av Perkin-Elmer.

Acknowledgments

Detta arbete stöds av en VA MERIT grant1I01BX001532 från det USA Institutionen för veteraner frågor biomedicinsk laboratorieforskning och utveckling Service (BLRDS) att P.F. och E.C. erkänner stöd från den VA klinisk vetenskap R & D Service ( Merit Award I01CX001388) och VA rehabilitering R & D Service (Merit Award I01RX002604). Ytterligare stöd kom från UCLA fakulteten utsäde bidrag till J.K. Dessa innehållet representerar inte nödvändigtvis åsikter oss Department of Veterans Affairs eller den amerikanska regeringen.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
8226 human myeloma cell line ATCC CCL-155
NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ Mice (NOG) Jackson Labs 5557
VivoGlo Luciferin substrate Promega P1041
Hypoxyprobe-1Kit HPL HP1-100
PE-CD45 (clone H130) BD Biosciences 555483 Used for flow cytometry to identify human CD45+ tumor cells in BM exudate
rabbit anti-human CD45 (clone D3F8Q) Cell Signaling Technology 70527 Primary antibody used for Immunohistochemistry of excised bone
Goat Anti-rabbit IgG (HRP conjugated) ABCAM ab205718 Seconday antibody used for Immunohistochemistry of excised bone
Dual-Luciferase Reporter Assay System Promega E1910
pGL4.5 Luciferase Reporter Vector Promega E1310
IVIS Lumina XRMS In Vivo Imaging System Perkin Elmer
Sofie G8 PET/CT Imaging System Perkin Elmer

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Raab, M. S., Podar, K., Breitkreutz, I., Richardson, P. G., Anderson, K. C. Multiple Myeloma. The Lancet. 374, (9686), 324-339 (2009).
  2. Galson, D. L., Silbermann, R., Roodman, G. D. Mechanisms of Multiple Myeloma Bone Disease. BoneKEy Reports. 1, 135 (2012).
  3. Anderson, K. C., Carrasco, R. D. Pathogenesis of Myeloma. Annual Review of Pathology. 6, 249-274 (2011).
  4. Reagan, M. R., Rosen, C. J. Navigating the Bone Marrow Niche: Translational Insights and Cancer-Driven Dysfunction. Nature Reviews Rheumatology. 12, (3), 154-168 (2016).
  5. Frost, P., et al. Mammalian Target of Rapamycin Inhibitors Induce Tumor Cell Apoptosis in Vivo Primarily by Inhibiting Vegf Expression and Angiogenesis. Journal of Oncology. 2013, 897025 (2013).
  6. Mysore, V. S., Szablowski, J., Dervan, P. B., Frost, P. J. A DNA-Binding Molecule Targeting the Adaptive Hypoxic Response in Multiple Myeloma Has Potent Antitumor Activity. Molecular Cancer Research. 14, (3), 253-266 (2016).
  7. Podar, K., Chauhan, D., Anderson, K. C. Bone Marrow Microenvironment and the Identification of New Targets for Myeloma Therapy. Leukemia. 23, (1), 10-24 (2009).
  8. Campbell, R. A., et al. Laglambda-1: A Clinically Relevant Drug Resistant Human Multiple Myeloma Tumor Murine Model That Enables Rapid Evaluation of Treatments for Multiple Myeloma. International Journal of Oncology. 28, (6), 1409-1417 (2006).
  9. Miyakawa, Y., et al. Establishment of a New Model of Human Multiple Myeloma Using Nod/Scid/Gammac(Null) (Nog) Mice. Biochemical and Biophysical Research Communications. 313, (2), 258-262 (2004).
  10. Ito, M., et al. Nod/Scid/Gamma(C)(Null) Mouse: An Excellent Recipient Mouse Model for Engraftment of Human Cells. Blood. 100, (9), 3175-3182 (2002).
  11. Frost, P., et al. In Vivo Antitumor Effects of the Mtor Inhibitor Cci-779 against Human Multiple Myeloma Cells in a Xenograft Model. Blood. 104, (13), 4181-4187 (2004).
  12. Asosingh, K., et al. Role of the Hypoxic Bone Marrow Microenvironment in 5t2mm Murine Myeloma Tumor Progression. Haematologica. 90, (6), 810-817 (2005).
  13. Storti, P., et al. Hypoxia-Inducible Factor (Hif)-1alpha Suppression in Myeloma Cells Blocks Tumoral Growth in Vivo Inhibiting Angiogenesis and Bone Destruction. Leukemia. 27, (8), 1697-1706 (2013).
  14. Fryer, R. A., et al. Characterization of a Novel Mouse Model of Multiple Myeloma and Its Use in Preclinical Therapeutic Assessment. PLoS One. 8, (2), e57641 (2013).
  15. Gould, S. J., Subramani, S. Firefly Luciferase as a Tool in Molecular and Cell Biology. Analytical Biochemistry. 175, (1), 5-13 (1988).
  16. Czernin, J., Phelps, M. E. Positron Emission Tomography Scanning: Current and Future Applications. Annual Review Medicine. 53, 89-112 (2002).
  17. Pandey, M. K., Bhattacharyya, F., Belanger, A. P., Wang, S. Y., DeGrado, T. R. Pet Imaging of Fatty Acid Oxidation and Glucose Uptake in Heart and Skeletal Muscle of Rats: Effects of Cpt-1 Inhibition. Circulation. 122, (21), (2010).
  18. Wang, M. W., et al. An in Vivo Molecular Imaging Probe (18)F-Annexin B1 for Apoptosis Detection by Pet/Ct: Preparation and Preliminary Evaluation. Apoptosis. 18, (2), 238-247 (2013).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics