تحليل مشية منخفضة التكلفة للنمط الفينومابي لنماذج الماوس من الأمراض العصبية العضلية

Behavior

Your institution must subscribe to JoVE's Behavior section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

تحليل البصمة هو بديل منخفض التكلفة لبرامج تحليل المشية الرقمية للباحثين تحديد حجم تشوهات الحركة في الفئران. بسبب سرعتها، والبساطة، والإمكانات الطولية، وهو مثالي للنماذج الفينومية السلوكية لنماذج الماوس.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Wertman, V., Gromova, A., La Spada, A. R., Cortes, C. J. Low-Cost Gait Analysis for Behavioral Phenotyping of Mouse Models of Neuromuscular Disease. J. Vis. Exp. (149), e59878, doi:10.3791/59878 (2019).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

قياس الحركة الحيوانية هو أداة سلوكية شائعة تستخدم لوصف النمط الظاهري لمرض معين، أو إصابة، أو نموذج المخدرات. طريقة منخفضة التكلفة لتحليل مشية أظهرت هنا هو مقياس بسيط ولكن فعال من تشوهات مشية في نماذج murine. يتم تحليل آثار الأقدام عن طريق طلاء أقدام الماوس بطلاء غير سام قابل للغسل والسماح للموضوع بالسير عبر نفق على ورقة. تصميم نفق الاختبار يستفيد من سلوك الماوس الطبيعي وتقاربها للأماكن المظلمة الصغيرة. يتم قياس طول الخطوة، وعرض خطوة، وانتشار اصبع القدم من كل ماوس بسهولة باستخدام مسطرة وقلم رصاص. هذا هو أسلوب راسخة وموثوق بها، وأنها تولد العديد من المقاييس التي هي مماثلة للنظم الرقمية. هذا النهج حساس بما فيه الكفاية للكشف عن التغيرات في خطوة في وقت مبكر من العرض العرضي النمط الظاهري، ونظرا لنهجها غير الغازية، فإنه يسمح لاختبار المجموعات عبر مدى الحياة أو العرض العرضي الفينوتي.

Introduction

تتطلب الحركة التنسيق العصبي والعضلي الهيكلي المعقد، ويمكن أن يؤدي العجز في جانب واحد من مسارات المحرك إلى تشوهات مشية يمكن ملاحظتها1،2. تحليل مشية هو أداة حاسمة للباحثين اختبار نماذج الماوس لأنه يوفر بيانات سلوكية قابلة للقياس الكمي حول كيفية تأثير مرض معين، أو إصابة، أو المخدرات على حركة الحيوان3. ومع ذلك، يتطلب تحليل المشية الرقمية شراء جهاز المشي، والكاميرا، والبرامج المرتبطة بها، والتي يمكن أن تكون باهظة التكلفة للباحثين. وغالبا ما يستخدم تحليل مشية بشكل متقطع لتتبع التغيرات الطولية في وظيفة المحرك، وبالتالي قد يكون من الصعب تبرير النفقات إذا استخدمت بشكل متقطع4. على الرغم من أن التحليلات الرقمية قد توفر مقاييس مشية أكثر تفصيلاً من تحليل البصمة البسيط، فإن هذه التدابير الأكثر تعقيداً ليست دائماً ضرورية أو ذات صلة بتوصيف النمط الظاهري السلوكي5.

هنا نقدم طريقة تحليل بصمة يدوية منخفضة التكلفة كبديل سريع وحساس لبرامج تحليل مشية رقمية6و7. وقد ثبت تحليل البصمة اليدوية للكشف عن اختلافات كبيرة مشية في العديد من نماذج مرض المورين10،11 ،12،13،14،15،16،17، وفي حالة واحدة على الأقل ، حددت هذه الطريقة منخفضة التكلفة التغييرات في مشية أن لم يتم الكشف عنها من قبل برنامج تحليل مشية رقمية مشتركة12. التكلفة الإجمالية للمواد اسمية، ويمكن تكييفها بسهولة مع نماذج أبحاث القوارض الأخرى.

في حين أن هناك العديد من مقاييس المشي المختلفة التي يمكن استخلاص البيانات منها، فإن الطريقة التي نصفها تركز على ثلاثة مقاييس محددة: طول الخطوة، وعرض الخطوة (المعروف أيضًا باسم "عرض المسار")، وانتشار اصبع القدم. ومن المهم ملاحظة أن البارامترات التي يتعين تقييمها ينبغي أن تحدد على أساس كل نموذج على حدة. لم يتم تصميم هذه الطريقة لتحليل مشية لقياس الوظيفة المعرفية ، ولا ينصح للدراسات التي تتطلب قياسات حيوية ميكانيكية معقدة من مشية16.

نقدم بيانات سلوكية من مجموعة من الفئران قبل وبعد الأعراض النمذجة X-المرتبطة ضمور العضلات العمود الفقري وبولبار (SBMA)، وهو مرض عصبي عضلي يتميز بانحطاط الخلايا العصبية الحركية وضمور العضلات. هذه الفئران تطوير العجز التدريجي في مشية التي تتزامن مع ظهور الأنماط الظاهرية الأخرى الخاصة بالأمراض. وهذا يدل على صحة وخصوصية هذه الطريقة، ويؤكد أنه يمكن أن يميز بشكل موثوق بين الحيوانات المتأثرة وغير المتأثرة.

كانت الفئران التجريبية في هذه الدراسة 2.5 (قبل الأعراض) و 9 أشهر من العمر (بعد أعراض) BAC fxAR121 الفئران المعدلة وراثيا على خلفية C57BL/6 (نexpt= 12). تم إنشاء هذا النموذج في مختبرنا، وقد وصفت تماما كنموذج الماوس قوية من SBMA9. واستُخدمت القمامة غير المحورة وراثياً كضوابط (nctrl=8). SBMA هو مرض محدود الجنس الذي يتجلى تماما في الذكور فقط، لذلك تم استخدام الفئران الذكور حصرا لهذه الدراسة. خلال مراحل التخطيط، يجب على الباحثين أن يأخذوا في الاعتبار اعتبارات المعاهد الوطنية للصحة حول الجنس كمتغير بيولوجي لتحديد أحجام المجموعات وتكوينها18.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

تم استعراض جميع الاختبارات التي أجريت مع الفئران والموافقة عليها من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها (IACUC) من جامعة ديوك. ويجب أن يكون الموظفون المسؤولون عن الاختبار والتهديف أعمى عن النمط الجيني الحيواني أو الحالة التجريبية إلى أن يتم الانتهاء من تحليل المشية وتسجيل الأوراق للمجموعة بأكملها.

1. اختبار إعداد المواد

  1. إجراء اختبار مع نفق بنيت من 3 قبل قطع لوحات الاكريليك واضحة التي هي 0.375 بوصة سميكة. تجميع النفق عن طريق لصق لوحات جنبا إلى جنب مع مانع التسرب التي تربط على وجه التحديد الاكريليك ولن تنبعث الروائح عند تجفيفها.
    1. بالنسبة للفئران القياسية C57BL/6، استخدم قياسات النفق التالية: 2.5 في. يجب أن تكون الفئران قادرة على المشي بشكل مريح من خلال النفق واتخاذ ما يكفي من الخطوات (>4) بحيث يمكن قياس مشية.
  2. بناء غرفة الهدف مع لوحات الاكريليك الرمادي قبل قطع 0.375 بوصة سميكة، لصقها جنبا إلى جنب مع نفس مانع التسرب كما تستخدم في النفق. القياسات الداخلية للغرفة هي 4 بوصة واسعة، 4 بوصة طويلة، و3 بوصة. تطابق افتتاح هذه الغرفة لفتح النفق (2.5 في. واسعة × 3.0 في. طويل القامة). لأن الفئران تفضل بطبيعة الحال المساحات المظلمة إلى المساحات مضاءة جيدا، واستخدام المواد التي هي مبهمة ومظلمة في اللون.
  3. استخدم الورق لتتبع الخطوات السميكة والسلسة (يعمل ورق الألوان المائية بشكل جيد). قطع شرائط أوراق الفردية لتكون أوسع قليلا وأطول من عرض وطول النفق. إذا كان استخدام أبعاد النفق الموضحة هنا، وقطع الأوراق إلى 15 في.
  4. استخدم لونين متناقضين (على سبيل المثال، الأخضر والأرجواني) من الطلاء غير السام القائم على المياه القابل للغسل. تعيين لون واحد للأطراف الخلفية، والثاني للأطراف الأمامية. الفئران سوف لعق الطلاء المتبقية من أقدامهم بعد الاختبار، لذلك يجب أن يكون الطلاء المحدد غير سامة تماما.
  5. استخدام اثنين من فرش الطلاء برميل جولة، واحد لكل لون الطلاء (~ 0.5 سم في القطر، مدبب / وأشار تلميح فرشاة).
  6. حدد مسطرة مع علامات وصولا إلى ملليمتر، والفرجار مع قياسات وصولا الى 0.1 ملم.
  7. اختياري: للالحيوانات مع القلق العالي أو الدافع المنخفض، وتوفير حافز سلوكي في غرفة الهدف. وهذا يمكن أن تشمل كميات صغيرة من بذور عباد الشمس المعقمة (وضعت في القفص المنزلي 2 أيام قبل الاختبار للسماح بالسكن). في يوم الاختبار، ضع بذور عباد الشمس داخل غرفة الهدف لتشجيع الفئران على المشي من خلال دون توقف.

2 - جمع البيانات

  1. إذا تم إجراء الاختبار في غرفة منفصلة، تكييف الفئران إلى الغرفة الجديدة لمدة 30 دقيقة ثم بدء الاختبارات السلوكية. بالإضافة إلى ذلك، لأن الفئران هي ليلية بشكل طبيعي، تأكد من أن جميع الفئران مستيقظة تماما ويقظة لمدة 5 دقائق على الأقل قبل الاختبار.
  2. قم بإعداد إعداد الاختبار عن طريق وضع النفق فوق الورق ووضع علامة على الورق باستخدام معرف الماوس وتاريخ الاختبار. ضع غرفة الهدف في نهاية النفق، وربط كلا الطرفين المفتوحين. إضافة بذور عباد الشمس في نهاية النفق (داخل غرفة الهدف) للتحفيز إذا لزم الأمر.
  3. إزالة الماوس ليتم اختبارها من قفصها وقبضة عليه بحزم من قبل scruff لها، والتأكد من السيطرة على الذيل لتحقيق الاستقرار في حركة أطرافه الخلفية.
  4. الطلاء forepaws حتى الجانب السفلي بأكمله من جميع أصابع القدم ومركز القدم مغطاة بالكامل في الطلاء. كرر هذا مع لون المتناقضة من الطلاء على الكفوف الخلفية. مسح أي طلاء أن الماوس يحصل على أجزاء أخرى من الجسم مع قطعة قماش رطبة نظيفة لمنع اللطخات التي قد تتداخل مع جمع البيانات.
    ملاحظة: يجب إجراء معالجة الماوس من قبل الباحثين ذوي الخبرة لتقليل الإجهاد الحيواني.
  5. وضع الماوس في بداية النفق والسماح لها بالمشي على طول الطريق إلى غرفة الهدف، ومن ثم استرداد الماوس، ومسح بلطف قبالة قدميه بقطعة قماش مبللة بالماء، وإعادته إلى قفص منزله.
  6. السماح للورق مع آثار أقدام لتجف تماما قبل تسجيل. مسح أسفل منطقة الاختبار والنفق مع الإيثانول أو ما يعادلها حل التنظيف بين كل الحيوان.

3- معايير التهديف

  1. استخدم الخطوات التي يتم متباعدة باستمرار مع آثار أقدام واضحة وغير ملطخة لتسجيل النقاط. الشكل 1B هو مثال جيد على تسلسل البصمة التي يمكن تسجيلها. من أجل توليد بيانات تسجيل كافية، يجب أن يكون هناك ما لا يقل عن خطوتين متتاليتين من كل قدم، ولكن ينصح 4-6 خطوات لكل قدم. لا تقم بتضمين البصمة الأولى والأخيرة على الورق، حيث أنه من غير المرجح أن تمثل مشية عادية لأن الماوس يغير سرعة المشي.
  2. استخدام طول خطوة، عرض خطوة، وانتشار اصبع القدم كثلاثة مقاييس مختلفة من مشية التي يمكن تحليلها باستخدام هذا الأسلوب.
    ملاحظة: طول الخطوة والعرض تتطلب مطبوعات تسلسلية واضحة حيث يتم تعريف منطقة القدم الأمامية بشكل جيد في الطلاء. لا يتطلب انتشار أصابع القدم مطبوعات متسلسلة لتسجيل النقاط، فقط مطبوعات واضحة من أصابع القدم الأولى والأخيرة على قدم واحدة. ومع ذلك، إذا لم يتم تضمين بصمة معينة في قياسات طول أو عرض خطوة، فإنه لا يمكن تسجيل لانتشار اصبع القدم. يتم تقييم جميع التدابير الثلاثة بالسنتيمترات.
    1. تعريف طول الخطوة على أنه المسافة بين اثنين من آثار أقدام متتابعة التي تم إنشاؤها من قبل نفس القدم (أي خطوة واحدة) (الشكل1A، 1B).
      1. باستخدام قلم رصاص، ارسم دائرة من 2-4 مم حول منطقة القدم الأمامية لكل من آثار أقدام الأطراف الأمامية (المحددة بالألوان المخصصة أعلاه) في خطوة واحدة ورسم خط بينهما باستخدام مسطرة.
      2. سجل المسافة بين طبعتين من منتصف كل دائرة (أي مركز كل وسادة قدم) كـ Right-Fore 1 (RF1) أو Left-Fore 1 (LF1).
      3. كرر لكافة الخطوات التي يمكن تسجيلها (RF2، LF2، RF3، LF3 وهلم جرا).
      4. كرر لأقدام الأطراف الخلفية اليمنى واليسرى.
      5. متوسط جميع المسافات الفردية سجلت خطوة لكل طرف. للتحليل الإحصائي، يمكن أن يكون متوسط أعضاء المجموعة الفردية معا.
    2. تعريف عرض الخطوة على أنه مقياس المسافة بين الأطراف الأمامية اليسرى واليسرى أو الأطراف الخلفية (الشكل1A، 1B).
      1. لتقييم هذه المسافة، رسم وقياس خط من منطقة القدم الأمامية الدائرة من طرف خلفي واحد يتقاطع عموديا مع خط لطول خطوة على الطرف الخلفي المقابل.
      2. كرر هذا لجميع مطبوعات الأطراف الخلفية التي يمكن تسجيلها، ومن ثم متوسط القياسات. طريقة حساب لعرض خطوة هو نفسه للصدارة والأطراف الخلفية.
    3. تعريف انتشار أصابع القدم على أنه المسافة بين أصابع القدم الأولى والأخيرة على بصمة واحدة من طرف الصدارة أو الطرف الخلفي (الشكل1A، 1B).
      1. استخدم الفرجار لقياس المسافة بين طرف طباعة اصبع القدم الأول وطرف طباعة اصبع القدم الأخيرة.
      2. كرر لجميع مطبوعات الأطراف الخلفية التي يمكن تسجيلها ومتوسط القياسات. طريقة حساب انتشار اصبع القدم هي نفسها بالنسبة للأطراف الأمامية والخلفية.
  3. إذا كان لا يمكن تسجيل ورقة، والسماح للالحيوان للراحة لمدة 10 دقائق قبل محاولة مرة أخرى.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

مع أعداد كافية من الحيوانات، وهذا الإجراء قادر على الكشف عن الاختلافات مشية بين الأنماط الجينية الماوس، في نفس الضغط مع مرور الوقت. يظهر الشكل 1B آثار ًا تمثيلية لصور البصمة التي تم جمعها في مختبرنا، وذلك باستخدام نموذج ماوس من ضمور العضلات المرتبط بـ X العمود الفقري وBulbar (SBMA)، وهو اضطراب عصبي يؤثر على الخلايا العصبية الحركية المنخفضة والعضلات الهيكلية. لقد أبلغنا سابقا أن الذكور BAC fxAR121 الفئران المعدلة وراثيا تطوير فقدان الوزن كبيرة، والإعاقة في قوة قبضة،وتقصير طول خطوة في الأعمار ما بعد الأعراض بالمقارنة مع الضوابط القمامة غير المعدلة وراثيا 9.

هنا نقدم نتائج تحليل مشية من مجموعة من ما قبل الأعراض (2.5 أشهر من العمر) وما بعد الأعراض (9 أشهر من العمر) BAC fxAR121 المعدلة وراثيا وlittermate السيطرة على الفئران الذكور (الشكل2). قبل ظهور المرض، BAC fxAR121 الفئران المعدلة وراثيا عرض طول خطوة مماثلة، عرض خطوة، وانتشار اصبع القدم بالمقارنة مع الضوابط غير المعدلة وراثيا littermate بهم. بعد ظهور المرض، BAC fxAR121 الفئران المعدلة وراثيا عرض أقصر بكثير طول خطوة (فforelimb= 0.001، فالطرف الخلفي= 0.009) (الشكل2A). وكشف تحليل طولي مماثل عن عدم وجود اختلافات في عرض الخطوة في أي من العمرين المختبرين (p2.5months=0.709, p9 months=0.204) (الشكل2B). بعد أعراض BAC fxAR121 الفئران المعدلة وراثيا لديها أيضا أضيق بكثير انتشار اصبع القدم الخلفي (ع = 0.01) من الضوابط القمامة مطابقة العمر (الشكل2C). BAC fxAR121 الفئران نموذج مرض عصبي عضلي الذي يؤثر في المقام الأول على الأطراف الخلفية، لذلك لم يتم جمع تدابير مفصلة من مشية الأطراف الأمامية. ونحن نشجع الباحثين الذين يستخدمون طريقة تحليل مشية هذه على النظر في النمط الظاهري لنماذج الماوس الخاصة بهم واختيار مقاييس مشية الأطراف الخلفية أو الأطراف الخلفية وفقا لذلك.

Figure 1
الشكل 1: مقاييس تحليل مشية واستكشاف الأخطاء وإصلاحها.
A. تمثيل تخطيطي لتحليل مشية على الفئران، تصور طول خطوة، عرض خطوة، واصبع القدم انتشار المعلومات. B.مثال تمثيلي لتسلسل بصمة تحليل مشية التي يمكن تسجيلها، تصور قياس جميع المعلمات الثلاثة. جيم- أمثلة تمثيلية لتسلسلات أثر تحليل المشية الإشكالية التي لا يمكن تسجيلها. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: SBMA BAC fxAR121 الفئران المعدلة وراثيا تظهر التدريجي، النمط الظاهري مشية العصبية التي يمكن الكشف عنها عن طريق تحليل مشية.
A.على الرغم من عدم وجود اختلافات في الأعمار قبل الأعراض (2.5 أشهر, نctl= 11, نexpt=12), BAC fxAR121 الفئران تطوير انخفاض كبير في طول خطوة بالمقارنة مع الضوابط القمامة غير المعدلة وراثيا في مراحل ما بعد الأعراض (9 أشهر، نctl= 8، نexpt= 12). ب. لم يتم الكشف عن أي تغييرات في عرض خطوة في أي من العمر. C.أعراض SBMA BAC fxAR121 الفئران المعدلة وراثيا عرض انخفاض كبير في انتشار اصبع القدم الخلفي مقارنة مع الضوابط القمامة غير المعدلة وراثيا. N = 8-12/group. ANOVA مع اختبار توكي ما بعد مخصص * p < 0.05, ** p < 0.01. أشرطة الخطأ تمثل SEM. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

باستخدام طريقة تحليل مشية منخفضة التكلفة الموضحة أعلاه، نعرض التعرف الناجح على العديد من المعلمات من خلل المشية في العصور ما بعد الأعراض في نموذج الماوس BAC fxAR121 من SBMA. انخفاض في طول خطوة تتفق مع الدراسات السابقة SBMA من نماذج الماوس والمرضى الإنسان9. كما نبين لأول مرة أن هناك اختلافات كبيرة في انتشار اصبع القدم الخلفي في الفئران SBMA أعراض بالمقارنة مع الضوابط القمامة غير المعدلة وراثيا. ومن المثير للاهتمام، يمكن أن يكون سبب انخفاض في انتشار اصبع القدم الخلفي من ضعف في العضلات مخلب الموسعة، وضيق في العضلات المرن مخلب، أو التعصيب العصب الفقراء2،19، وهو ما يتفق أيضا مع مسببات SBMA.

يجب تشغيل الفئران بسهولة إلى غرفة الهدف بسبب تفضيلها السلوكي الطبيعي للمساحات المظلمة الصغيرة، ولكن بعض الفئران قد لا تتحرك باستمرار من خلال النفق. إذا قفز الماوس أو توقفه أو استدار داخل النفق (راجع الأمثلة في الشكل 1C)،كرر التبيّر بعد فترة راحة على ورقة تسجيل جديدة. قد تكون النتائج قابلة للإنقاذ إذا توقف الماوس في بداية النفق لأنه غالباً ما يمكن أن يكون دفع بلطف إلى تشغيل إلى مربع الهدف.

تطبيق الكثير من الطلاء أو القليل جدا ً على أقدام الماوس يمكن أن يؤدي إلى نتائج غير قابلة للاستخدام. الطلاء الزائد يمكن أن يؤدي إلى طباعة ملطخة أو مشوهة، في حين أن الطلاء غير كافية يمكن أن تنتج مطبوعات باهتة أو لا يمكن التعرف عليها (الشكل1C). في كلتا الحالتين، كرر الاختبار على ورقة تسجيل نظيفة لمنع قياسات غير دقيقة.

الفئران الصغيرة جدا (<3 أشهر من العمر) هي أكثر عرضة للقفز إلى الأمام في النفق، في حين أن كبار السن (> 8 أشهر من العمر) أو الفئران phenotypic جدا هي أكثر عرضة لوقف أو مقاومة الحركة إلى الأمام تماما. إضافة حافز سلوكي (بذور عباد الشمس) في غرفة الهدف يمكن أن تساعد على تقليل تواتر السلوكيات إشكالية عن طريق تشجيع الفئران غير المتحمسة لاجتياز النفق دون توقف.

وينبغي أن تعكس أبعاد النفق أبعاد الموضوع؛ إذا كنت تستخدم الفئران التي هي أكبر بكثير أو أصغر من متوسط فأر المختبر (بسبب العمر أو النظام الغذائي أو الطفرات الوراثية)، نوصي بتغيير أبعاد النفق وغرفة الهدف لتتناسب مع حجم الحيوان. في النفق، يجب أن تكون الفئران قادرة على المشي بشكل مريح في خط مستقيم، ولكن ينبغي أن يكون بعض الصعوبة في الالتفاف لتثبيط هذا السلوك. يجب أن تتطابق غرفة الهدف مع ارتفاع النفق وينبغي أن تناسب الفئران بشكل مريح داخل الغرفة.

قد لا يتمكن الباحثون الذين يستخدمون طريقة تحديد لقطة اصبع القدم للفئران الخاصة بهم من جمع البيانات عن انتشار اصبع القدم، ولكن لا يزال من المحصلة تدابير أخرى من المشيمثل طول خطوة وعرض خطوة لا يزال يمكن جمعها. لقطة اصبع القدم لا تؤثر بشكل كبير مشية في الفئران طالما لا يتم قص أكثر من اثنين من أصابع القدم لكل ماوس20.

هذه الطريقة تحليل مشية لا تعكس الوظيفة المعرفية، لذلك لا ينبغي أن تستخدم كمقياس للإدراك. وينبغي للآخرين الذين يعتزمون استخدام هذه الطريقة النظر في المجموعات العصبية العضلية المتضررة في نموذج الماوس، ومن ثم اختيار مقاييس الطرف الخلفي أو الصدارة وفقا لذلك. لا ينصح بهذه الطريقة لتحليل مشية للباحثين الذين يدرسون استجابات الألم التي تتطلب حقن لوح القدم، أو للدراسات التي تتطلب القياسات الميكانيكية الحيوية للحركة التي لا يمكن وصفها من قبل آثار أقدام وحدها، مثل القياسات الزمنية للأطراف الحركة أو دوران مشترك21.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.

Acknowledgments

ويود أصحاب البلاغ أن يشكروا أ. م. على المساعدة في تحديد هوية الحيوانات. وقد تم دعم هذا العمل بمنح من المعاهد الوطنية للصحة في الولايات المتحدة (R01 7 RF1 AG057264 إلى A.R.L.S. و C.J.C. و R01 NS100023 إلى A.R.L.S) وجمعية ضمور العضلات (منحة البحوث الأساسية لA.R.L.S.، منحة التنمية إلى C.J.C.).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Caliper n/a n/a must have markings down to 0.1 mm
Craft Glue E6000 n/a
Footprint Paint (Tempera Paint) Artmind n/a must be non-toxic
Round Barrel Paintbrushes Symply Simmons n/a 0.5 cm diameter
Ruler n/a n/a must have markings down to millimeters
Scoring Paper (Watercolor Pads) Canson n/a cut to size
Tunnel and Goal Chamber Interstate Plastics n/a cut to size

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Clarke, K. A., Still, J. Development and consistency of gait in the mouse. Physiology & Behavior. 73, (1-2), 159-164 (2001).
  2. Mendes, C. S., et al. Quantification of gait parameters in freely walking rodents. BMC Biology. 13, 50 (2015).
  3. Carter, R. J., Morton, J., Dunnett, S. B. Motor coordination and balance in rodents. Current Protocols in Neuroscience. Chapter 8 Unit 8 (2001).
  4. Tillerson, J. L., Caudle, W. M., Reveron, M. E., Miller, G. W. Exercise induces behavioral recovery and attenuates neurochemical deficits in rodent models of Parkinson's disease. Neuroscience. 119, (3), 899-911 (2003).
  5. Pallier, P. N., Drew, C. J., Morton, A. J. The detection and measurement of locomotor deficits in a transgenic mouse model of Huntington's disease are task- and protocol-dependent: influence of non-motor factors on locomotor function. Brain Research Bulletin. 78, (6), 347-355 (2009).
  6. Sugimoto, H., Kawakami, K. Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress. Journal of Visualized Experiments. (143), (2019).
  7. Carter, R. J., et al. Characterization of progressive motor deficits in mice transgenic for the human Huntington's disease mutation. Journal of Neuroscience. 19, (8), 3248-3257 (1999).
  8. Barlow, C., et al. Atm-deficient mice: a paradigm of ataxia telangiectasia. Cell. 86, (1), 159-171 (1996).
  9. Cortes, C. J., et al. Muscle expression of mutant androgen receptor accounts for systemic and motor neuron disease phenotypes in spinal and bulbar muscular atrophy. Neuron. 82, (2), 295-307 (2014).
  10. D'Hooge, R., et al. Neuromotor alterations and cerebellar deficits in aged arylsulfatase A-deficient transgenic mice. Neuroscience Letters. 273, (2), 93-96 (1999).
  11. Fernagut, P. O., Diguet, E., Labattu, B., Tison, F. A simple method to measure stride length as an index of nigrostriatal dysfunction in mice. Journal of Neuroscience Methods. 113, (2), 123-130 (2002).
  12. Guillot, T. S., Asress, S. A., Richardson, J. R., Glass, J. D., Miller, G. W. Treadmill gait analysis does not detect motor deficits in animal models of Parkinson's disease or amyotrophic lateral sclerosis. Journal of Motor Behavior. 40, (6), 568-577 (2008).
  13. Harper, S. Q., et al. RNA interference improves motor and neuropathological abnormalities in a Huntington's disease mouse model. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 102, (16), 5820-5825 (2005).
  14. Lin, C. H., et al. Neurological abnormalities in a knock-in mouse model of Huntington's disease. Human Molecular Genetics. 10, (2), 137-144 (2001).
  15. Sopher, B. L., et al. Androgen receptor YAC transgenic mice recapitulate SBMA motor neuronopathy and implicate VEGF164 in the motor neuron degeneration. Neuron. 41, (5), 687-699 (2004).
  16. Tillerson, J. L., Caudle, W. M., Reveron, M. E., Miller, G. W. Detection of behavioral impairments correlated to neurochemical deficits in mice treated with moderate doses of 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine. Experimental Neurology. 178, (1), 80-90 (2002).
  17. Wheeler, V. C., et al. Early phenotypes that presage late-onset neurodegenerative disease allow testing of modifiers in Hdh CAG knock-in mice. Human Molecular Genetics. 11, (6), 633-640 (2002).
  18. Clayton, J. A., Collins, F. S. Policy: NIH to balance sex in cell and animal studies. Nature. 509, (7500), 282-283 (2014).
  19. Maricelli, J. W., Lu, Q. L., Lin, D. C., Rodgers, B. D. Trendelenburg-Like Gait, Instability and Altered Step Patterns in a Mouse Model for Limb Girdle Muscular Dystrophy 2i. PLoS One. 11, (9), e0161984 (2016).
  20. Castelhano-Carlos, M. J., Sousa, N., Ohl, F., Baumans, V. Identification methods in newborn C57BL/6 mice: a developmental and behavioural evaluation. Lab Animals. 44, (2), 88-103 (2010).
  21. Lakes, E. H., Allen, K. D. Gait analysis methods for rodent models of arthritic disorders: reviews and recommendations. Osteoarthritis Cartilage. 24, (11), 1837-1849 (2016).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics