Электрофоретического разделения белков

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

В этом видео мы продемонстрируем метод электрофоретического разделения белков на поли-acrylimide гель-электрофореза (PAGE).

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Chakavarti, B., Chakavarti, D. Electrophoretic Separation of Proteins. J. Vis. Exp. (16), e758, doi:10.3791/758 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Электрофорез используется для разделения сложных смесей белков (например, из клеток, субклеточных фракций, колонна фракций, или иммунопреципитатах) в целях изучения субъединицы композиций, а также для проверки однородности белка образцов. Она также может служить для очистки белков для использования в дальнейших приложений. В электрофореза в полиакриламидном геле, белки мигрируют в ответ на электрическое поле через поры в матрице полиакриламидном геле; размер пор уменьшается с увеличением концентрации акриламида. Сочетание размера пор и белка плату, размер и форма определяет скорость миграции белка. В этом блоке стандартный метод Laemmli описывается для разрывных гель-электрофореза в денатурирующих условиях, т. е. в присутствии додецилсульфата натрия (SDS).

Protocol

Полный текст протокола для этого экспериментальный подход доступен в текущих протоколов в области молекулярной биологии .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Comments

10 Comments

  1. Hi nice demo but I did not understand why the presenters kept on showing an agarose gel electrophoresed DNA gel in between as a representation instead of a protein gel.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 15, 2008 - 1:11 PM
  2. SYPROorange and SYPROruby staining - two fluorescent-based protein detection methods - can appear like ethidium bromide stained DNA gels.  So those gels you are speaking of may actually be protein gels. 

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 16, 2008 - 9:34 AM
  3. Yeah possible,  but then why do we see only a single band.I guess SYPRO detection methods would detect the entire protein panel and not specific bands. unless otherwise they are detecting some specific enzyme activity using flourescent detection methods.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 16, 2008 - 9:52 AM
  4. We loaded BSA.

    Thanks.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 17, 2008 - 2:12 AM
  5. Please not that we showed polyacrylamide gel electrophoresis and not agarose gel electrophoresis.

    Thanks.

    Bulbul Chakravarti

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 17, 2008 - 2:08 AM
  6. why cannot i see the video...? pls help me..

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2008 - 3:35 AM
  7. i can see it now..thanks...

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2008 - 4:50 AM
  8. my network is poor, I can not enjoy the video

    Reply
    Posted by: Huang C.
    March 15, 2009 - 6:30 AM
  9. Hello, Please shoot me an email at nikitab@jove.com and we'll figure something out for you. Cheers, Nikita

    Reply
    Posted by: Anonymous
    March 22, 2009 - 10:26 PM
  10. Hi, thanks what can I download your video ? please help me

    Reply
    Posted by: violet s.
    January 14, 2012 - 10:35 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics