Lebensdaueranalyse: Messung der Langlebigkeit von C. elegans

Abstract

Quelle: Cornwell, A.B., et al. Die Replik-Set-Methode: Ein High-Throughput-Ansatz zur quantitativen Messung von Caenorhabditis elegans Lifespan. J. Vis.  (2018).

Dieses Video beschreibt eine traditionelle, plattenbasierte Methode zur Messung der Lebensdauer von C. elegans. Das Beispielprotokoll misst die Lebensdauer von Würmern, die mit RNAi behandelt werden.

Protocol

Das folgende Protokoll ist ein Auszug aus Cornwell et al, The Replica Set Method: A High-Throughput Approach to Quantitatively Measure Caenorhabditis elegans Lifespan, J. Vis. Exp.  (2018). 1. Verhinderung der Nachkommenproduktion durch Zugabe von 5-Fluor-2′-Deoxyuridin (FUdR) Tiere bis L4-Stufe bei 20 °C anbauen. Prüfen Sie, ob sich…

Representative Results

Abbildung 1: Die traditionelle und die Replikatsatzmethode zum Scoring der C.elegans-Lebensdauer (A). Die traditionelle Methode zum Scoring der Lebensdauer von C. elegans. Mehrere kleine synchronisierte Populationen von isogenen Tieren pro Zustand werden im Laufe der Zeit verfolgt. Die gleiche Population von Tieren wird während des gesamten Studiengan…

Materials

FuDR (5-Fluoro-2'-deoxyuridine)	Alfa Aesar	L16497
24 Well Culture Plates	Greiner Bio-One	#662102
600 µL 96-well plates	Greiner Bio-One	#786261
2mL 96-well plates	Greiner Bio-One	#780286
96-pin plate replicator	Nunc	250520
C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Ahringer	Source Bioscience	C. elegans RNAi Collection (Ahringer)	See also Kamath et. al, Nature 2003.
C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Vidal	Source Bioscience	C. elegans ORF-RNAi Resource (Vidal)	See also Rual et. al, Genome Research 2004. This library is also available from Dharmacon.
L4440 Empty Vector Plasmid	Addgene	1654	https://www.addgene.org/1654/