Summary
हम यहां नवजात capsaicin उपचार के लिए तरीकों का वर्णन चूहों और atopic जिल्द की सूजन पर formaldehyde सांस लेना के प्रभाव की जांच करने के लिए भाँप formaldehyde के जोखिम में atopic जिल्द की सूजन पैदा करने के लिए ।
Abstract
Atopic जिल्द की सूजन क्रोनिक खुजली एक्जिमा reदोन्ही है और विशेष रूप से विकसित देशों में दुनिया भर में विद्यमान है । आनुवंशिक और पर्यावरणीय कारकों के बीच जटिल बातचीत atopic जिल्द की सूजन के pathophysiology में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाने के लिए जाना जाता है । हालांकि, हम अभी भी इस रोग के रोगजनन की एक विस्तृत तस्वीर का अभाव है । इस प्रकार, यह महत्व का है atopic जिल्द की सूजन की प्रगति elucidating के लिए उपयुक्त पशु मॉडल विकसित करना । इसके अलावा, इस तरह के atopic जिल्द की सूजन पर वायु प्रदूषक के रूप में पर्यावरणीय कारकों के प्रभाव की जांच रोग की समझ का विस्तार । यहां, हम नवजात capsaicin उपचार और चूहों को formaldehyde के एक निरंतर एकाग्रता के जोखिम के लिए एक प्रोटोकॉल के साथ चूहों में atopic जिल्द की सूजन उत्प्रेरण के लिए एक विधि का वर्णन करने के लिए शिशु और किशोर में atopic जिल्द की सूजन के विकास पर प्रभाव प्रकट अवधि. इन प्रोटोकॉल सफलतापूर्वक कई प्रयोगों के लिए लागू किया गया है और अंय पदार्थों के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है ।
Introduction
atopic जिल्द की सूजन (विज्ञापन) प्रगति पर formaldehyde (एफए) साँस लेना के प्रभाव से पूछताछ करने के लिए, हम विज्ञापन प्रेरण के लिए एक प्रोटोकॉल की स्थापना की और एफए के पुराने जोखिम के लिए एक पारंपरिक संचलन चैंबर विकसित की है ।
विज्ञापन एक पुरानी सूजन त्वचा आनुवंशिक गड़बड़ी और पर्यावरण के बीच जटिल बातचीत के लिए जिंमेदार ठहराया रोग है1,2ट्रिगर । एक उचित पशु मॉडल के लिए नैदानिक राज्य में विज्ञापन का अध्ययन करने के लिए आवश्यक है । यह सबसे महत्वपूर्ण है जब elucidating पर्यावरण कारकों के प्रभाव के तहत विज्ञापन के रोगजनन । इसके अलावा, बेहतर विज्ञापन प्रगति पर पर्यावरण ट्रिगर के प्रभाव की जांच करने के लिए, यह व्यक्तिगत पर्यावरणीय कारकों अलग और जोखिम की डिग्री यों तो आवश्यक है ।
हम नवजात capsaicin उपचार द्वारा प्रेरित विज्ञापन के एक उपंयास चूहा मॉडल का प्रदर्शन किया है । इस विज्ञापन मॉडल3 epicutaneous संवेदीकरण, आनुवंशिक रूप से इंजीनियर विज्ञापन मॉडल, और विज्ञापन4के सहज माउस मॉडल द्वारा प्रेरित विज्ञापन मॉडल के रूप में अंय विज्ञापन मॉडलों पर कुछ गुण है । सबसे पहले, इस मॉडल 3 सप्ताह है, जो शिशु विज्ञापन से मेल खाती है और इस तरह नेकां/ंगा माउस के रूप में विज्ञापन के अंय सहज माउस मॉडल से पहले की उंर में लक्षण की तरह विकसित करता है । कुछ मामलों में, आनुवंशिक रूप से इंजीनियर विज्ञापन मॉडल के विपरीत, एक 20-सप्ताह की अवधि में विज्ञापन मॉडल उपस्थिती और अनायास पतन के लक्षण । इसके अलावा, विज्ञापन की प्रेरण प्रक्रिया मॉडल में लक्षण की तरह है कि epicutaneous संवेदीकरण मॉडल है, जो और अधिक एलर्जी संपर्क जिल्द की सूजन के परिप्रेक्ष्य में प्रेरण प्रक्रिया के समान है की तुलना में आसान है ।
हम एक ऐक्रेलिक ग्लास चैंबर और एक पारंपरिक चिकित्सा ऑक्सीजन नियामक5 शिशु और किशोर समय में विज्ञापन के विकास पर एफए साँस लेना के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए का उपयोग करके एक जानवर मॉडल के लिए एफए प्रदर्शन के लिए उपंयास प्रोटोकॉल शुरू की है । नियामक ने हमें पशुओं को प्रवाह दरों और समाधान एकाग्रता का समायोजन करके गैस की निरंतर एकाग्रता के लिए बेनकाब करने की अनुमति दी है । पिछले अध्ययनों पशु मॉडल के लिए एफए के जोखिम के कई तरीके की सूचना दी है । Xu एट अल. एक्सपोजर विधि वर्णित है जिसमें एफए समाधान सीधे त्वचा6करने के लिए लागू किया गया था । एक और हाल के अध्ययन एफए गैस एक विशेष वाष्पशील सॉल्वैंट्स जनरेटर, मॉडल ४९१२7का उपयोग कर जोखिम के प्रोटोकॉल को संबोधित किया । पिछले अध्ययनों के तरीकों की तुलना में, नई विधि और अधिक आसानी से सुसज्जित है और एफए के अलावा अंय समाधान के लिए लागू किया जा सकता है ।
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Protocol
- 5 मिलीग्राम/एमएल Capsaicin समाधान तैयार करने के लिए, जोड़ने के ५० मिलीग्राम Capsaicin के बीच ८० और १००% इथेनॉल के 1 मिलीलीटर में एक 15 मिलीलीटर शंकु ट्यूब ।
- शंकु ट्यूब के लिए सामांय खारा के 8 मिलीलीटर जोड़ें । ट्यूब जोरदार हिला जब तक कोई अलग परतों दिखाई दे रहे हैं
- सुई capsaicin समाधान (10 & #181; एल/चमड़े के नीचे ऊतक में, midline और पीठ पर एक नवजात Sprague-Dawley चूहे की गर्दन ।
- जन्म (क्रिटिकल) के बाद 12 ज से ४८ ज के बीच capsaicin उद्धार ।
नोट: यदि इंजेक्शन कुछ दिनों से अधिक की देरी है, जिल्द की सूजन विकसित नहीं होगा या यह केवल कुछ हफ्तों के लिए बनी रहेगी । अगर इंजेक्शन बहुत जल्दी है, गंभीर दर्द के कारण श्वसन संकट हो सकता है । - सांस की गिरफ्तारी से नवजात चूहों को रोकने के लिए capsaicin इंजेक्शन के कारण, सांस लेने को प्रोत्साहित करने के लिए नवजात के सीने में धक्का या एक ऑक्सीजन चैंबर में नवजात जब तक श्वसन सामांय हो जाता है । & #160; जबसे capsaicin-प्रेरित दर्द & #160; खरच श्वास को हतोत्साहित करना, सामान्य संज्ञाहरण & #160 जोड़ना; सकेन & #160;p ossibly खराब सांस लेने में कठिनाई । इस प्रकार, प्रयोग करने वालों को चूहों के अस्तित्व को बढ़ाने के लिए anesthesics का उपयोग नहीं करना चाहिए ।
- जन्म (क्रिटिकल) के बाद 12 ज से ४८ ज के बीच capsaicin उद्धार ।
- माप के द्वारा खुजली सहज scratching व्यवहार गिनती द्वारा
- तैयार प्लास्टिक मंडलों (20 सेमी x 30 cm x 20 cm) एक दर्पण से सुसज्जित पूर्ण कवरेज के लिए अनुमति देने के लिए देखने और छेद के लिए चूहों सांस लेने के लिए अनुमति देने के लिए ।
- सेट अप और एक डिजिटल वीडियो कैमरा ठीक से दर्पण विचारों और एक साथ चूहों के सामने विचारों को रिकॉर्ड करने के लिए समायोजित करें ।
- प्लास्टिक चैंबर में जगह चूहों और एक भारी वस्तु के साथ चैंबर की छत को कवर खोलने से रोकने के लिए ।
- 1 घंटे के लिए चूहों के सहज व्यवहार रिकॉर्ड, वीडियो क्लिप वापस खेलते हैं, और व्यवहार scratching की संख्या गिनती ।
- एक स्कोरिंग प्रणाली का उपयोग कर त्वचा घाव का आकलन
- इंडक्शन चैंबर में चूहे को जगह ।
- 2 L/न्यूनतम प्रवाह दर करने के लिए ऑक्सीजन flowmeter बारी और संज्ञाहरण के लिए 3% करने के लिए isoflurane vaporizer को समायोजित.
- कान और एक चूहे के अंय भागों में जिल्द की सूजन की हद तक और गंभीरता की पहचान ।
- ०.२५ सेमी 2 के रूप में त्वचा के घावों की हद तक इकाई आकार को परिभाषित करने और तालिका 1 : गंभीरता सूचकांक का पालन करके त्वचा घावों की गंभीरता; हद और गंभीरता गुणा करके जिल्द की सूजन स्कोर की डिग्री (< में जिल्द की सूजन स्कोर देखें मजबूत वर्ग = "xfig" > चित्र 1b ).
- सांस लेना चैंबर
- की तैयारी
- एक ऐक्रेलिक ग्लास बॉक्स (५५ cm x ४० cm x ३५ cm) कि विपरीत पक्षों पर दो दुकानों है तैयार करते हैं ।
- सावधानी बरतें । एफए गैस के संचलन के लिए, जगह प्रवेश से अधिक आउटलेट और प्रवेश के उस से भी बड़ा आउटलेट के आकार बनाते हैं ।
- सावधानी बरतें । आंतरिक गैस एकाग्रता की माप के लिए, दुकानों के दूसरे पक्ष पर, तीन छोटे मार्ग ड्रिल, जो बंद किया जा सकता है ।
- दोनों दुकानों के लिए ट्यूबों कनेक्ट । एक आउटलेट ट्यूब संचलन हूड या गैस के उत्सर्जन के लिए इमारत के बाहर, और एक चिकित्सा ऑक्सीजन नियामक के लिए अंय आउटलेट ट्यूब कनेक्ट प्लेस ।
- जगह एक्रिलिक ग्लास बॉक्स के अंदर एक पारंपरिक चूहा पिंजरे ।
- 5 सप्ताह के लिए जन्म के बाद एक सप्ताह से पिंजरे में चूहों डाल (2 ज/दिन और 5 दिन/
- सील एक्रिलिक ग्लास बॉक्स के रूप में कसकर गैस रिसाव को रोकने के लिए संभव है ।
नोट: तंग सील के लिए, चैंबर ढक्कन रबर शामिल होना चाहिए । तंग सील के लिए चैंबर लपेट करने के लिए पकड़ फिल्म लागू करें ।
- पीढ़ी के गैसीय एफए का उपयोग करके एक चिकित्सा ऑक्सीजन नियामक
- 2 में एफए के 5 जी भंग पानी की 1 L.
- चिकित्सा ऑक्सीजन नियामक के humidifier बोतल में ०.५% एफए समाधान डाल दिया.
- नियामक को प्रवेश ट्यूब जोड़ने के बाद, नियामक पर बारी और 5 एल के लिए प्रवाह की दर निर्धारित/
- समाधान एकाग्रता और प्रवाह की दर को समायोजित करने के लिए चैंबर में गैस की एकाग्रता का निर्धारण ।
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Representative Results
विज्ञापन की तरह त्वचा की सूजन capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहे की उंर के 7 सप्ताह में मॉडल आंकड़ा 1aमें प्रस्तुत किया है । capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहे मॉडल के मजबूत scratching व्यवहार वीडियो 1में दिखाया गया है । नवजात capsaicin उपचार की जिल्द की सूजन और बढ़ चूहों में खरोंच व्यवहार 3 सप्ताह की आयु, और विज्ञापन की तरह लक्षण कई हफ्तों के लिए जारी (चित्र 1b, C) । हालांकि डिग्री कम गंभीर था, कुछ चूहों जल्दी विज्ञापन के संकल्प के बाद उंर के 16 हफ्तों में reदोन्ही जिल्द की सूजन से पीड़ित की तरह लक्षण (चित्र 1 डी) । इसके अलावा, सीरम िेगे स्तर है, जो विज्ञापन गंभीरता8के लिए एक जैविक मार्कर है, capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहा मॉडल (चित्रा 1E) में उठाया गया था । आईएल-4 और आईएल-13 के mRNA भाव भी capsaicin-स्वास्थ्यकर्मी विज्ञापन चूहा मॉडल (चित्रा 1F, जी) में वृद्धि हुई ।
प्रतिनिधि तस्वीरें पता चला है कि एफए capsaicin में जिल्द की सूजन प्रेरित-इलाज विज्ञापन चूहे मॉडल की उंर के 5 हफ्तों में (चित्रा 2a) । १.२ पीपीएम एफए के एक्सपोजर और अधिक से अधिक 2 सप्ताह के लिए capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहे मॉडल में scratching व्यवहार और जिल्द की सूजन बढ़ गई । हालांकि, ०.८ पीपीएम एफए जोखिम खरोंच व्यवहार और capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहा मॉडल में जिल्द की सूजन ख़राब नहीं किया (चित्र बीसी, सी) । इसके अलावा, १.२ पीपीएम एफए जोखिम capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहा मॉडल में सीरम िेगे स्तर ऊंचा (चित्रा 2d) ।
गैसीय एफए के जोखिम के लिए, वेंटिलेशन चैंबर स्थापित किया गया था के रूप में प्रोटोकॉल (चित्रा 3) में वर्णित है । जोखिम से पहले, कक्ष में एफए की एकाग्रता लगातार एकाग्रता के आश्वासन के लिए मापा गया था । जब एफए समाधान की एकाग्रता को बदलने, चैंबर में गैसीय एफए की एकाग्रता मापा गया था. समाधान की एकाग्रता के रूप में वृद्धि हुई, चैंबर में गैस की एकाग्रता धीरे से वृद्धि हुई और एक ही समाधान से चैंबर में गैस की एकाग्रता दोहराया माप में काफी भिन्न नहीं था (चित्र बी).
चित्र 1: नवजात Capsaicin उपचार प्रेरित reदोन्ही विज्ञापन की तरह त्वचा की सूजन और चूहों में खुजली. capsaicin में त्वचा की सूजन के प्रतिनिधि तस्वीरें-इलाज चूहा (A) । जिल्द की सूजन (ख) और खरोंच व्यवहार (सी) capsaicin-इलाज चूहों के कालानुक्रमिक सुविधाओं । 16 सप्ताह पुराने capsaicin-इलाज चूहों (डी) के reदोन्ही त्वचा घावों की प्रतिनिधि छवि । (ङ) capsaicin-उपचारित पशुओं में सीरम िेगे स्तर का महत्वपूर्ण उन्नयन । (च) capsaicin-उपचारित पशुओं में आईएल-४ mRNA अभिव्यक्ति की महत्वपूर्ण उन्नयन. (छ) capsaicin-स्वास्थ्यकर्मी पशुओं में आईएल-३ mRNA अभिव्यक्ति का महत्वपूर्ण उन्नयन. सभी परिणाम के रूप में व्यक्त किया गया ± SEM मतलब है और छात्र टी परीक्षण का उपयोग कर विश्लेषण । *p & #60; ०.०५, * * p & #60; ०.००५, * * *p & #60; ०.००१. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 2: एफए जोखिम बढ़ खुजली और Capsaicin में जिल्द की सूजन-इलाज विज्ञापन चूहा मॉडल । १.२ पीपीएम और ०.८ पीपीएम एफए (एक) का उपयोग कर उपचार के 5वें सप्ताह के प्रतिनिधि तस्वीरें । १.२ पीपीएम एफए के एक्सपोजर, लेकिन नहीं ०.८ पीपीएम एफए जोखिम, काफी गहरा खुजली (ख) और जिल्द की सूजन (सी) capsaicin में इलाज विज्ञापन मॉडल । सीरम िेगे स्तर capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहे मॉडल में वृद्धि हुई १.२ पीपीएम एफए एक्सपोजर (डी) के साथ इलाज किया । परिणाम के रूप में व्यक्त किया गया ± SEM का अर्थ है और एक तरह ANOVA Tukey परीक्षण या छात्र के टी परीक्षण के बाद का उपयोग कर विश्लेषण । *p & #60; ०.०५, * * *p & #60; ०.००१ (ताजा हवा के संपर्क में चूहों बनाम). १.२ एफए-विज्ञापन: Capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहा १.२ पीपीएम एफए को उजागर मॉडल; ०.८ एफए-विज्ञापन: Capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहा ०.८ पीपीएम एफए को उजागर मॉडल; और हवा विज्ञापन: capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहा ताजा हवा से अवगत कराया मॉडल । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 3: एफए उपचार । नियामक के योजनाबद्ध चित्रण और गैस चैंबर (A) । कक्ष में गैसीय एफए की एकाग्रता एफए समाधान की एकाग्रता के अनुपात में था (ख) । परिणाम के रूप में व्यक्त किया गया ± SEM. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
वीडियो 1: Capsaicin-इलाज चूहों के scratching व्यवहार का डटकर खुजली की माप के लिए दर्ज किए गए । इस वीडियो को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें । (डाउनलोड करने के लिए राइट-क्लिक करें.)
| क्षेत्र | स्कोर | विवरण |
| कानों को छोड़कर | 0 | सामान्य |
| 1 | Wispy फर | |
| 2 | खालित्य या भड़कना | |
| 3 | खून बह रहा है या पपड़ी | |
| कान | 0 | सामान्य |
| 1 | भड़के | |
| 2 | खून बह रहा है या पपड़ी | |
| 3 | ऊतक के नुकसान |
तालिका 1: गंभीरता सूचकांक.
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Discussion
प्रोटोकॉल के लिए यहां वर्णित विज्ञापन की प्रेरण की तरह चूहों में लक्षण विज्ञापन pathophysiology के अध्ययन के लिए अनुकूलित किया जा सकता है और दवा परीक्षण के लिए एक स्क्रीनिंग उपकरण के रूप में इस्तेमाल किया । capsaicin-इलाज चूहों को गैसीय एफए के जोखिम के लिए साधन विविध पशु मॉडलों पर विभिंन गैसों के लिए जोखिम के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए लागू किया जा सकता है ।
नवजात capsaicin-इलाज विज्ञापन मॉडल ऐसे DNCB उपचार मॉडल के रूप में अंय atopic मॉडल से अधिक सरल प्रक्रिया पर निर्भर करता है9 और epicutaneous संवेदी मॉडल4, और नेकां/ंगा माउस4से अधिक सस्ती है । विज्ञापन मॉडल में विज्ञापन की तरह लक्षण की अभिव्यक्ति के अनुरूप है । इसके अलावा, कुछ मामलों में, इस प्रोटोकॉल सहज reदोन्ही विज्ञापन प्रभावित चूहों में किसी भी अतिरिक्त उपचार के बिना त्वचा के घावों की तरह,3बटोरता है । ओवरडोज capsaicin इंजेक्शन पैदा न्यूरॉन सेल मौत और neurocutaneous सूजन10 और चूहों में गंभीर दर्द का कारण बना. उनमें से कुछ संभवत: दर्द के कारण सांस की गिरफ्तारी से पीड़ित थे । यह उन्हें सांस की गिरफ्तारी से रोकने के लिए महत्व का है । इस प्रकार, capsaicin इंजेक्शन के बाद, पिल्ले एक ऑक्सीजन चैंबर में रखा जाना चाहिए और कुछ पिल्ले छाती संपीड़न की आवश्यकता हो सकती है । नवजात capsaicin उपचार चूहों में विज्ञापन की तरह लक्षण पैदा नहीं करता है, और इस के लिए कारण अभी भी अज्ञात है । इस प्रकार, आनुवंशिक हस्तक्षेप शायद ही इस विज्ञापन मॉडल के लिए एक दस्तक बाहर तनाव का उपयोग कर लागू है, लेकिन ऐसे सिरना अनुग्राह्यतापूर्वक के रूप में अंय आनुवंशिक दृष्टिकोण इस कमी के लिए क्षतिपूर्ति । इसके अलावा, विज्ञापन की सुसंगत अभिव्यक्ति की तरह चूहे मॉडल के लक्षण अध्ययन के लिए लाभदायक है विज्ञापन रोग रोगजनन, साथ ही साथ यह एक दवा स्क्रीनिंग उपकरण के लिए आवेदन ।
एफए जोखिम के लिए संचार कक्ष की स्थापना केवल एक एक्रिलिक बॉक्स और एक चिकित्सा ऑक्सीजन नियामक सहित पारंपरिक प्रयोगशाला उपकरणों की आवश्यकता है । इसके अलावा, ऑक्सीजन नियामक के humidifier बोतल में समाधान बदलने के द्वारा, प्रयोग में विविध प्रकार की गैसों को लागू किया जा सकता है । चैंबर में गैस की एकाग्रता नियामक की प्रवाह दर और समाधान की एकाग्रता का समायोजन करके आसानी से बनाए रखा जा सकता है । यह capsaicin-इलाज विज्ञापन चूहा एक एक्रिलिक चैंबर और एक चिकित्सा ऑक्सीजन नियामक का उपयोग कर मॉडल के लिए एफए जोखिम के लिए संचार प्रणाली की स्थापना में एक तंग सील सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण है । न केवल क्योंकि चैंबर में गैस की एकाग्रता हर बार रिसाव के कारण अलग हो सकता है, लेकिन यह भी लीक गैस प्रयोग करने वालों को नुकसान पहुंचा सकता है । कुछ अस्थिर कार्बनिक यौगिकों (VOC) के वाष्पीकरण अक्सर क्रिस्टलीकरण द्वारा ट्यूब ब्लॉक । इस प्रकार, यह नियमित रूप से ट्यूबों की जगह द्वारा दीर्घकालिक उपयोग के लिए सतत ट्यूब प्रबंधन के माध्यम से कॉलेस्ट्रॉल से बचने के लिए प्रासंगिक है । इस वाष्पीकरण प्रणाली और अधिक ठीक सामयिक आवेदन तरीकों से रोगियों में रोग प्रगति को दर्शाता है11. इस विधि विज्ञापन का एक चूहा मॉडल पर एफए साँस लेना के प्रभाव के विशिष्ट सुविधाओं से पता चला पिछले अध्ययनों की तुलना में जो भोले जानवरों के लिए एफए उजागर7,12.
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Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
इस शोध को लोक कल्याणकारी & #38; सुरक्षा अनुसंधान कार्यक्रम कोरिया के नेशनल रिसर्च फाउंडेशन (एनआरएफ) के माध्यम से शिक्षा, विज्ञान और प्रौद्योगिकी मंत्रालय (एनआरएफ-2014M3C8A5030612) द्वारा वित्त पोषित, और चुंग यांग, चा यंग द्वारा समर्थित रवि, एमडी और जंग हाय जोओ येउ सा मेमोरियल फंड ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Medical Oxygen Regulator | Yuyao Jiahua Medical | manufacturer will not affect results | |
| Tube | manufacturer will not affect results | ||
| Acrylic Chamber | Taejin Acryl | manufacturer will not affect results | |
| Plastic Chamber | Taejin Acryl | manufacturer will not affect results | |
| Paraformaldehyde, powder | Sigma | 158127 | manufacturer will not affect results |
| Wrap filme | Uniwrap | manufacturer will not affect results | |
| Capsaicin | Sigma | M2028 | manufacturer will not affect results |
| Tween 80 | Sigma | P4780 | manufacturer will not affect results |
| Digital Video Camera | Sony | HDR-CX380y | manufacturer will not affect results |
| Isoflurane | JW pharmaceutical | manufacturer will not affect results |
References
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