تقييم تفاعلات الخلايا المضيفة للبكتيريا باستخدام حبيبات المحاكاة الحيوية

خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على ثقافة الخلايا الظهارية للثدييات.

في آبار الاختبار ، أضف مسببات الأمراض البكتيرية جنبا إلى جنب مع حبات البوليمر المقترنة بالبروتينات السطحية البكتيرية.

في آبار التحكم ، أضف العامل الممرض والخرز الذي يفتقر إلى البروتينات السطحية البكتيرية. حضن.

في آبار الاختبار ، تحاكي الخرزات سطح البكتيريا وتتنافس مع العامل الممرض للارتباط بحمض الفوسفاتيديك لغشاء الخلية الظهارية ، مما يقلل من الارتباط البكتيري.

في آبار التحكم ، لا تؤثر الخرزات على التعلق البكتيري.

قم بإزالة الوسائط وغسلها بمخزن مؤقت للتخلص من المكونات غير المقيدة.

احتضن بمنظف غير أيوني لتحلل الخلايا ، وإطلاق البكتيريا والخرز المرتبط بالغشاء.

ماصة المحللة لإنشاء تعليق متجانس ، وتخفيف الجانس بشكل متسلسل باستخدام المخزن المؤقت.

انقل التخفيفات إلى ألواح أجار ، واحتضنها للسماح بتكوين المستعمرة ، وعد المستعمرات.

تظهر

لوحة الاختبار مستعمرات أقل من الضوابط ، مما يشير إلى انخفاض التفاعلات بين البكتيريا والمضيف.

قم بإعداد وسائط العدوى عن طريق تخفيف الثقافات البكتيرية إلى DMEM عديم اللون بدون إضافات.

دافئ مسبقا إلى 37 درجة مئوية يحتوي على 10٪ من الحجم إلى حجم تعليق الخرزة. لإعطاء وزارة الداخلية 10 ، قم بإعداد مليلتر واحد لكل بئر و 10 إلى 20٪ حجم زائد لكل عينة. قم بإزالة الوسط القديم من الآبار واغسل خلايا HeLa ا