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Medicine

एक माउस मॉडल में जागरण तंत्रिका कोशिका के प्रदर्शन की प्रक्रिया का मूल्यांकन करना

Published: May 20, 2017 doi: 10.3791/55588
Automatic Translation
*1, *1, 2, 2, 3,4, 1,2
1Department of Surgery, University of Vermont, 2Department of Urology and Biomedical Laboratory, University of Southern Denmark, 3Wake Forest Institute for Regenerative Medicine, Wake Forest University, 4Institute for Clinical Medicine, Aarhus University
* These authors contributed equally

Summary

यह अध्ययन एक स्वतंत्र रूप से चलने वाले माउस में जागरूक cystometry प्रदर्शन करने के लिए शल्य प्रक्रियाओं और प्रयोगात्मक तकनीकों का वर्णन करता है। इसके अलावा, यह अनुकूलन और मानकीकरण के समर्थन के लिए प्रायोगिक सबूत प्रदान करता है।

Abstract

जागरूकता भरने के लिए चूहों को आज़ादी से चलने में मूत्राशय के कार्य का मूल्यांकन करने के लिए लंबे समय तक उपयोग किया जाता है, हालांकि, विशिष्ट तरीकों का प्रयोग किया जाता है, प्रयोगशालाओं के बीच अलग-अलग होता है। इस अध्ययन का लक्ष्य जागरूकता मूत्राशय के दबाव को एक जाग में रिकॉर्डिंग के लिए एक इंट्रावेलिकल ट्यूब और प्रायोगिक तकनीक को प्रत्यारोपित करने वाली माइक्रोस्कोर्जिकल प्रक्रिया का वर्णन करना था, जो माउस को स्वतंत्र रूप से आगे बढ़ाना था। इसके अलावा, प्रायोगिक आंकड़ों को दिखाया गया है कि शल्य चिकित्सा, साथ ही टयूबिंग प्रकार और आकार, मूत्र पथ के कम काम को प्रभावित करते हैं और संवेदनशीलता को रिकॉर्ड करते हैं। दबाव रिकॉर्डिंग पर ट्यूब व्यास का प्रभाव विभिन्न आंतरिक व्यास के साथ दोनों पॉलीथीन और पॉलीयूरेथेन टयूबिंग में मूल्यांकन किया गया था। इसके बाद, दोनों सामग्री से सर्वश्रेष्ठ प्रदर्शन करने वाली ट्यूब को शल्य चिकित्सा नर सी 57 बीएल / 6 चूहों के मूत्र मूत्राशय के गुंबद में प्रत्यारोपित किया गया था। बारह घंटे, स्वस्थ, बरकरार जानवरों और जानवरों 2, 3, 5, और 7 दिनों के बाद शल्य चिकित्सा में रातोंरात मिक्सिटिंग आवृत्ति दर्ज की गई थी। फसल पर, मूत्राशयसकल अवलोकन के उपयोग में सूजन के संकेत के लिए मूल्यांकन किया गया और बाद में रोग विश्लेषण के लिए संसाधित किया गया। मूत्राशय सूजन की सबसे बड़ी हद तक 2 और 3 दिन मनाई गई थी, जो कि लक्षणों को खराब करने वाले मूत्राशय के विशेष रूप से दिखाए गए डेटा से संबंधित है। दिन 5 तक, मूत्राशय के ऊतक विज्ञान और voiding आवृत्ति सामान्यीकृत थी। हमारे अध्ययनों द्वारा उपलब्ध कराए गए साहित्य और साक्ष्यों के आधार पर, हम एक जागृत माउस में इंट्राजिसल दबाव और voided मात्रा की विवो रिकॉर्डिंग के लिए निम्न चरणों का प्रस्ताव: 1) एक ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप और माइक्रोस्कोरिकल टूल का उपयोग करके सर्जरी करें, 2) पॉलीथीन -10 का उपयोग करें आंदोलन की कलाकृतियों को कम करने के लिए टयूबिंग, और 3) पोस्ट-ऑपरेटिव दिन 5 पर cystometry करें, जब मूत्राशय सूजन का समाधान करता है।

Introduction

भरना cystometry (एफसी) एक नैदानिक ​​विधि है जिसमें मूत्राशय भरने के दौरान दबाव रिकॉर्ड करने के लिए मूत्राशय में कैथेटर लगाया जाता है। पहली बार 1 9 27 में कम मूत्र पथ के कार्य का मूल्यांकन करने के लिए नैदानिक ​​निदान पद्धति के रूप में पेश किया गया था, यह व्यापक रूप से इस्तेमाल किया गया है। 1 अनुसंधान अनुप्रयोगों में, एफसी को स्वस्थ और रोगग्रस्त जानवरों के मॉडल में ब्लैडर समारोह का परीक्षण करने और औषधीय एजेंटों के प्रभावों का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। कृत्रिम जानवरों के मॉडल सामान्यतः कम मूत्र पथ के कार्य की जांच के लिए उपयोग किया जाता है। 2 स्तनधारियों के इस समूह में, एफसी सबसे पहले चूहों में उपयोग के लिए विकसित किया गया था। 3 यहां, मूत्र मूत्राशय में एक ट्यूब को प्रत्यारोपण करने और एफसी को प्रदर्शन करने के लिए कई शोधकर्ताओं द्वारा प्रजनन क्षमता के स्वीकार्य स्तर के साथ वर्णन किया जाता है। 4 ट्रांसजेनिक की उपलब्धता और उपभेदों के बाहर दस्तक चूहों के कई शोध क्षेत्रों के लिए एक मूल्यवान प्रजातियां बनाते हैं,मूत्र पथ के निचले भाग के क्षेत्र सहित माउस cystometry प्रदर्शन करने के लिए इस्तेमाल की जाने वाली पद्धति प्रयोगशालाओं के बीच उत्कृष्ट रूप से भिन्न होती है, जिससे परिणामों की तुलना करना मुश्किल हो जाता है। 5

पूर्व विवो मॉडलों के मुकाबले, एफसी कम मूत्र पथ की शारीरिक रचना को सुरक्षित रखता है, मूत्राशय और इसके आउटलेट के बीच भंडारण के दौरान समन्वित समारोह की अनुमति देता है और मुताबिक चक्र के वाउइंग चरणों का आकलन किया जाता है। पिछले शोध से पता चलता है कि कई, आमतौर पर इस्तेमाल किया anesthetics micturition संकुचन दमन। जो एजेंट मूत्राशय मूत्राशय की चिकनी मांसपेशियों के संकुचन (यूरैथेन, α-क्लोरोलोस, केटामाइन और ज़ाइलैनीज़) को संरक्षित करते हैं, जानवरों को घृणित करने की इजाजत देते हैं, फिर भी कार्यात्मक मूत्राशय की क्षमता को कम करते हैं और न्यूरोट्रांसमिशन को दबाने। 6 , 7 , 8 , 9 हालांकि तकनीकी रूप से और अधिक चुनौतीपूर्ण, एफसी ने ओ में प्रदर्शन कियाएके एम्बुलेटिंग जानवरों ने मिक्सिटरी रिफ्लेक्स की कार्यात्मक अखंडता को बरकरार रखा है।

निचले मूत्र पथ के कार्य में कई कारकों से प्रभावित होता है, जिसमें पोस्ट-ऑपरेटिव मूत्राशय की दीवार सूजन, दर्द और असुविधा के कारण तनाव और पर्यावरणीय प्रभाव शामिल हैं। एक सर्जिकल तकनीक का प्रयोग करना जिससे कि ट्यूब इम्प्लांटेशन और रिकॉर्डिंग विधियों के दौरान ऊतक क्षति को कम किया जा सके, जो कि ट्यूब आन्दोलन को कम करते हैं, साथ ही साथ जानवरों को स्वतंत्र रूप से अस्पष्ट करने की इजाजत दे, सटीक और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य रिकॉर्डिंग प्राप्त करने के लिए आवश्यक हैं।

अगर पर्याप्त रूप से, vivo में प्रदर्शन स्वतंत्र रूप से चलने वाले जानवरों में एफसी ऐसे डेटा प्रदान कर सकता है जो शारीरिक मूत्राशय के फ़ंक्शन को प्रतिबिंबित करता है। स्वतंत्र रूप से चलने वाले जानवरों में 10 एफसी निम्नलिखित मापदंडों पर डेटा प्रदान कर सकती है; बेसल या आधारभूत दबाव: दो मिक्कीरियन्स के बीच न्यूनतम दबाव। इंटरमीकट्युशन दबाव: दो मिक्कीरियन्स के बीच का दबाव। थ्रेशोल्ड दबाव: इंटेरेक्सासिक दबाव आईआईएमअत्याचार से पहले अधिकतम दबाव: मिक्सर चक्र के दौरान अधिकतम मूत्राशय का दबाव। स्वैच्छिक गतिविधि (या मध्यवर्ती आंतरायिक दबाव का मतलब): इंटरमीकट्युरिटिशन दबाव शून्य से बेसल दबाव। गैर-वाइडिंग संकुचन: भरने चरण के दौरान इंट्राजिकल दबाव में वृद्धि, तरल पदार्थ की रिहाई के साथ जुड़े नहीं। मूत्राशय का अनुपालन: मूत्राशय क्षमता थ्रेसहोल्ड दबाव शून्य से बेसल दबाव से विभाजित। आकस्मिक आवृत्ति: प्रति यूनिट प्रति यूनिट की संख्या अंतराल अंतराल: दो अधिकतम voiding दबावों के बीच की अवधि। मूत्राशय की क्षमता: मिक्सिटिशन की संख्या से विभाजित मात्रा। इन मापदंडों और मानकीकृत शब्दावली का विस्तृत विवरण पहले प्रकाशित किया गया है। 1 1

एफसी निरंतर या एकल चक्र इंट्राहेसिअल इन्फ्यूजन विधि का उपयोग कर किया जा सकता है सतत cystometry एकाधिक मिक्स्चरिशन चक्रों की रिकॉर्डिंग और प्रतिनिधि डेटा का चयन करने की अनुमति देता हैप्रजनन क्षमता पर अज्ञात अवशिष्ट मात्रा के कारण मूत्राशय की क्षमता को मापने में इसकी सटीकता सीमित है। इसके अलावा, चूहों को स्वतंत्र रूप से घुसपैठ करते हुए, छोटी विखंडित मात्रा एकत्रित करना (जो तनाव और सेक्स के आधार पर 30 से 184 μL के बीच भिन्न होता है) एकत्र करना चुनौतीपूर्ण है। निषिद्ध मात्रा को रिकॉर्ड करने के लिए इस पद्धति का उपयोग करना एक संवेदनाहारी तैयारी की तुलना में कम सटीक है, लेकिन यह बेहतर है कि यह मूत्राशय के कार्य पर एनेस्थेटिक्स के दमनकारी प्रभाव से बचा जाता है। मूत्राशय की क्षमता का आकलन करने के लिए एकल चक्र cystometry का उपयोग किया जाना चाहिए। इस पद्धति में, मूत्राशय को जलसेक से पहले आकांक्षा से खाली किया जाता है और क्षमता को अधिकतम दर से गुणा करके जलसेक दर के एक समारोह के रूप में गणना की जाती है।

हालांकि छोटे कृन्तकों में cystometry प्रदर्शन की तकनीक प्रकाशित की गई है, यह एक चूहे में किया गया सर्जरी का वर्णन करता है और सिफारिश की है कि माउस cystometry urethane संज्ञाहरण के तहत किया जाना चाहिए। 10 इस संचार का लक्ष्य टी हैओ मूत्र मूत्राशय के गुंबद में एक इंट्रावेलिकल ट्यूब को प्रत्यारोपित करने वाली माइक्रोस्कोर्जिकल तकनीकों का वर्णन करता है और प्रायोगिक सेट-अप का उपयोग मूत्र पथ के निचले हिस्से को रिकॉर्ड करने के लिए किया जाता है, जो लगातार मस्तिष्क भरने के दौरान और आसानी से माउस ले जाने में जागरूकता के दौरान मिक्सर होता है। इसके अलावा, टिवूंग लम्बाई, व्यास और सामग्री के साथ-साथ विवो एफसी में प्रदर्शन करने की पद्धति, रिकॉर्डिंग को प्रभावित करने के लिए प्रयोग करने के लिए प्रयोग किया गया। यह प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल पहले से प्रकाशित तकनीकों का सारांश देता है और प्रायोगिक परिणामों के आधार पर कई संशोधनों का प्रस्ताव करता है।

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Protocol

पशुसंचार संस्थान ने यूनिवर्सिटी ऑफ वर्मोंट पशु देखभाल सुविधा में संस्थागत दिशानिर्देशों के अनुसार रखा था। प्रयोगशाला पशुओं की देखभाल और उपयोग के लिए राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान के अनुसार सभी पशु प्रयोग किए गए थे।

1. इंट्राजिकल ट्यूब इंप्लाैंटेशन

  1. सर्जिकल प्रक्रिया के लिए टयूबिंग और उपकरणों की तैयारी
    1. आरोपण के लिए कैथेटर बनाने के लिए पीई 10 टयूबिंग का 7 सेमी का टुकड़ा कट करें।
    2. धीरे-धीरे एक खुली लौ की ओर बढ़ने से पीई 10 ट्यूब के एक छोर पर एक चमक बना।
      नोट: जैसे ही भड़कना विकसित होता है, जल्द से जल्द ट्यूब वापस ले लें।
    3. पीई 10 ट्यूब के बाहर flared अंत से 4.5, 5, और 5.5 सेमी पर एक गोंद बंदूक पर कम गर्मी सेटिंग का उपयोग करते हुए, सभी उद्देश्य वाले गर्म गोंद के तीन बूंदों को लागू करें। ये जानवर की पीठ पर ट्यूब को सुरक्षित करने में मदद करेंगे। ( चित्रा 1 )
    4. 70% में भिगोने से टयूबिंग को निर्वहन करेंइथेनॉल और उसके बाद उपयोग करने से पहले बाँझ 0.9% NaCl के साथ फ्लश करें। सिस्टम में हवा के बुलबुले को शुरू करने से बचने के लिए भरे ट्यूब को छोड़ दें।
    5. पीए 10 कैथेटर के अंत को सील करने के लिए 30 गेज सुई को हब से अलग करके समीपस्थ अंत की ओर से साइड को जोड़कर मैन्युअल रूप से जोड़कर एक 30-गेज प्लग बनाएं। अंत में गर्म गोंद की एक बूंद को लागू करें। सुनिश्चित करें कि मुहर निर्बलता है। ( चित्रा 2 )
    6. निम्नलिखित माइक्रोस्कोरिकल उपकरणों का प्रयोग करें: ड्यूमॉन्ट # 7 घुमावदार माइक्रोफोरॉप्स के दो जोड़े, ड्यूमॉन्ट # 5 घुमावदार माइक्रोफोरॉप्स, एक 21 जी सुई, अल्ट्राफ़ाईन सीधी हेडसेट, सूक्ष्म कैंची, छोटे विदारक कैंची और एक सूक्ष्म सुई धारक के दो जोड़े।
    7. प्रक्रिया शुरू करने से पहले सभी उपकरणों को निर्वहन करें।
  2. जानवर की तैयारी
    1. जानवरों की अनैतिकता के बाद, पेट के निचले आधे हिस्से को दाढ़ी पहले, फिर पशु प्रवण को बारी और दाढ़ी और ऊपरी पीठ पर क्षेत्र को साफ करें और बीटाडिन। सूखापन को रोकने के लिए आँखों पर पशु चिकित्सक मरहम लगाइए। इसके बाद, सीधा, कुंद कैंची और ड्यूमॉन्ट # 7 घुमावदार माइक्रोफोरॉप्स की एक जोड़ी का उपयोग करें ताकि स्कैपुलै के बीच एक 1.5 सेंटीमीटर लंबी त्वचा चीरा बन सके और बाँझ पर्दे के साथ कवर किए गए हीटिंग पैड (37 डिग्री सेल्सियस) के ऊपर जानवरों की लापरवाही कर सकें।
    2. अंत में, शराब और बीटाडिन के साथ पेट को साफ करें
  3. शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया
    नोट: 3.15X से 20X तक की बढ़ाई के साथ ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप के तहत सभी सर्जिकल प्रक्रियाएं करें। बाँझ पर्दे पर पशु रखने के बाद, बाँझ दस्ताने पर डाल दिया। संपूर्ण सर्जरी में बाँझ प्रक्रियाओं का उपयोग जारी रखें
    1. एक प्रेरण बॉक्स में पशु रखें और ऑक्सीजन वाहक (1 एल / मिनट) के साथ 2% इन्फ्लुराउरेन का उपयोग करने के लिए एनेस्थेटिज्म करें। एक नाक शंकु में पशु के सिर को रखकर और एक ऑक्सीजन वाहक (1 एल / मिनट) के साथ 2% इन्फॉल्लूरेन का उपयोग करके पूरे प्रक्रिया में संज्ञाहरण बनाए रखें। एक neg प्राप्त करने के बाद सर्जरी शुरू करेंपैर की अंगुली-पिंच परीक्षा से निष्क्रिय प्रतिक्रिया
    2. सीधे, कुंद कैंची की एक जोड़ी का प्रयोग करें और ड्यूमॉन्ट # 7 घुमावदार माइक्रोफोरॉप्स की जोड़ी, त्वचा के माध्यम से एक 1.5 सेमी कम, मिडलाइन पेट की चीरा का उपयोग करें। इसके बाद, मूत्राशय के ऊपरी आधे मूत्राशय का पर्दाफाश करने के लिए लाइनिया अल्बा और पेशी के साथ प्रावरणी के माध्यम से एक मिलान चीरा बनाएं। ड्यूमॉन्ट # 7 घुमावदार माइक्रोफोरॉप्स की एक जोड़ी का उपयोग करके प्रत्येक ऊतक परत पर ऊपर की ओर कर्षण लगाने के द्वारा मूत्राशय को घायल करने से बचें। ऊतक शारीरिक खारा की बूंदें जोड़कर पेट के विसर्जन को सूजन से रखें।
    3. गर्दन के पैरों पर चीरा का उपयोग करने के लिए जानवर को अपनी तरफ घुमाएं एक संकीर्ण हातोसैट पुट के नीचे दबाएं, हालांकि चीरा। चमड़े के नीचे के चैनल को पीछे से शुरू करना चाहिए, और किनारे पर आगे बढ़ना चाहिए।
    4. एक बार युक्ति की नोक रिब पिंजरे के नीचे पहुंच जाती है, तो टिप को मिडलाइन और पेट के अंदर की तरफ घुमाएं (उदर की दीवार की मांसपेशियों को छेड़ने पर थोड़ी सी पॉप होगी)। जब तक टिप पेशी परत के नीचे पेट की चीरे पर उजागर नहीं हो जाती है तब तक हेस्टैटेट को आगे बढ़ाना जारी रखें। ( चित्रा 3 )
    5. हेल्मेटेट के साथ टयूबिंग के "नॉन फ्लैरेड" अंत को समझें और धीरे-धीरे उपकरण को वापस ले लें, गर्दन के पीछे चीरा के माध्यम से ट्यूब के अंत को खींचें। टयूबिंग के धब्बेदार अंत को समायोजित करें ताकि यह सीधे मूत्राशय के गुंबद के ऊपर स्थित हो।
    6. 6-0 मोनोफ़िलामेंट सिवनी (गैर-अवशोषित) की एक ढीली टाई करें और इसे मूत्राशय के गुंबद के ऊपर रखें। यह टाई मूत्राशय में ट्यूब को सुरक्षित करने के लिए बाद में इस्तेमाल किया जाएगा।
    7. पेट में और मूत्राशय के पीछे की एक छोटी सी रोल को रखें जिससे कि उसे स्थिर और स्थिर कर सकें।
    8. मूत्राशय में पीई 10 कैथेटर के flared अंत डालने के लिए तैयार।
      1. गैर-प्रबल हाथ में, मूत्राशय के गुंबद को ड्यूमॉन्ट # 7 घुमावदार माइक्रोफॉर्पेस के साथ पकड़ो और इस पकड़ को बनाए रखें जब तक कैथेटर मूत्राशय में नहीं रखा जाता।
      2. एक 21-गेज सुई टी का प्रयोग करेंओ गुंबद के शीर्ष में एक cystotomy बना धीरे से # 5 घुमावदार माइक्रोफोरॉप्स की एक बंद जोड़ी के साथ cystotomy की जांच सुनिश्चित करें कि कैथेटर आसानी से छेद से गुजर सकता है।
      3. जबकि गैर-प्रबल हाथ में मूत्राशय के गुंबद को पकड़े हुए, मूत्राशय में पीई 10 कैथेटर के flared अंत को रखें (मूत्राशय के गर्दन को हल्के से नीचे धक्का दें ताकि इसे हासिल करने के दौरान बाहर निकल न जाए)।
      4. मूत्राशय के गुंबद के चारों ओर 6-0 मोनोफिलामेंट सिव टाई और टयूबिंग के पूर्वकाल में टाई के साथ टयूबिंग करें। मूत्राशय की क्षमता को कृत्रिम रूप से कम करने से बचने के लिए संभव के रूप में सीवन को मूत्राशय पर उच्च रूप से बांधना सुनिश्चित करें। ( चित्रा 4 )
      5. वैकल्पिक रूप से, एक पर्स स्ट्रिंग सीवन का उपयोग करके कैथेटर सुरक्षित रखें। 6-0 मोनोफिलामेंट का उपयोग करके मूत्राशय के गुंबद पर एक ढीले पर्स स्ट्रींग सिवनी बनाएं। चरण 1.3.8.1 - 1.3.8.3 का पालन करें cystotomy प्रदर्शन और कैथेटर डालें। पर्स स्ट्रिंग सिवनी बांधकर ट्यूब को सुरक्षित करें ( चित्रा 5 )
    9. ट्यूब के बाहर का अंत करने के लिए एक 30 गेज सुई के साथ 0.5 एमएल इंसुलिन सिरिंज को जोड़कर मूत्राशय में ट्यूब के पेटेंट और सील का परीक्षण करें। धीरे-धीरे मूत्राशय को 0.1 - 0.2 एमएल 0.9% NaCl के साथ भरें, जब तक मूत्रमार्ग के छिद्र में कोई बूंद न दिखाई दे, तब आकांक्षा द्वारा मूत्राशय को खाली करें। यह महत्वपूर्ण है कि मूत्राशय को भरा और खाली किया जा सकता है।
    10. गुंबद पर कोई लीक न होने पर, मूत्राशय को घुमावदार माइक्रोफोरॉप्स की एक जोड़ी के साथ बांधें और धीरे-धीरे टयूबिंग को खींच दें, जब तक कि ब्लैडर गम के अंदर से चमक नहीं होती।
    11. बंद होने से पहले, ऊतक के छोटे रोल को हटा दें, और सुनिश्चित करें कि मूत्राशय अपनी सामान्य स्थिति में है।
    12. दो परतों (मांसपेशियों और त्वचा) में पेट की दीवार 6-0 चलने वाली सीवन के साथ बंद करें पूर्वकाल पेट फैस्सी (रीकस शीथ की पूर्वकाल की दीवार) के केवल किनारों को सुखाकर यह रीक्टास उदर की मांसपेशियों को अनुमानित करने के लिए बेहतर है।
    13. पीठ पर टयूबिंग को सुरक्षित करने के लिए, धीरे से आरओअपने पेट पर जानवरों को टेटे अंतःक्रियात्मक चीरा में धातु एंकर के चमड़े के नीचे के हिस्से को सम्मिलित करें। ( चित्रा 12 ) ट्यूब और एंकर को एक ऊर्ध्वाधर गद्दा सीवन के साथ घेरकर 6-0 सीवन का उपयोग करें।
    14. सुनिश्चित करें कि गोंद बुलबुले ट्यूब के ऊपर और नीचे नीचे खींचने से रोकने के लिए त्वचा के ऊपर और नीचे रहता है। त्वचा को लगभग 2 सेमी ऊपर त्वचा में काटें।
    15. ट्यूब के अंत में धीरे-धीरे 30-गेज प्लग (चरण 1.1.5) डालें ताकि मूत्र को बाहर निकलने से बचा सके।
  4. जलयोजन के लिए 0.5 मिलीग्राम 0.9% NaCl उपकंटे में इंजेक्षन करें। सर्जरी के तुरंत बाद पोस्ट ऑपरेटिव एनालजेसिया दें और 48 घंटे के लिए बनाए रखें।
    1. जानवर को अपने पिंजरे में वापस एक अवरक्त दीपक के नीचे स्थित रखें। जब तक जानवर पिंजरे के चारों ओर घूमते नहीं आते हैं, तब तक निरंतर निगरानी बनाए रखें।
  5. जानवर को दैनिक निगरानी करें और इसे रिकॉर्डिंग से पहले 5 दिनों के लिए पुनर्प्राप्त करें।

2. ज़ाइवे सायस्टओमेट्री रिकॉर्डिंग

  1. रिकॉर्डिंग प्रोग्राम, दबाव ट्रांसड्यूसर, और जलसेक पंप तैयार करना।
    1. जानवरों को संवेदनाहारी करने से पहले, इन्फ्यूजन पंप, प्रेशर ट्रांसड्यूसर, और 22 जी स्विफ्ट पीई 50 टयूबिंग का उपयोग करें। ( चित्रा 6 )
    2. सिस्टम के दबाव की जांच करने और रिकॉर्डिंग के लिए तैयार करने के लिए कंप्यूटर पर रिकॉर्डिंग प्रोग्राम खोलें (उदाहरण के लिए सामग्री की तालिका देखें)। कैलिब्रेशन और रिकॉर्डिंग के दौरान एक ही सेटिंग का उपयोग करना सुनिश्चित करें
      1. 20 एमएल सिरिंज को 10-15 एमएल का कमरा तापमान 0.9% NaCl भरें और आसव पंप में लोड करें। पंप को 0.6 एमएल / एच की दर से कम करने के लिए प्रोग्राम करें।
      2. जानवर के मूत्राशय या रिकॉर्डिंग पिंजरे के नीचे के समान ऊंचाई पर दबाव ट्रांसड्यूसर को सुरक्षित करें।
      3. दबाव ट्रांसड्यूसर के अंत में 22-गेज कुंडा संलग्न करें (पीई 50 - टयूबिंग - प्रवाहित करने के लिए दबाव ट्रांसड्यूसर)
        नोट: इस कुंडा का उपयोग ट्यूब को घुमा या कुंकींग से रोकने के लिए किया जाता हैपशु चाल है
      4. सिस्टम के माध्यम से 0.9% NaCl फ्लश करने के लिए सिरिंज पंप को अग्रिम करें। कैलिब्रेट करने से पहले सभी हवाई बुलबुले को निकालना सुनिश्चित करें
      5. रिकॉर्डिंग प्रोग्राम चलाने के साथ, दबाव (सीएम / एच 2 हे) को मापने के लिए एक शासक का उपयोग करें धीरे से पीई50 तार की समाप्ति को 0 से 30 सेमी तक ले जाएं। यदि आवश्यक हो तो शून्य समायोजित करें
        नोट: 0 सेमी का निशान रिकॉर्डिंग पिंजरे और दबाव ट्रांसड्यूसर के फर्श के समान होना चाहिए।
    3. रिकॉर्डिंग पिंजरे के केंद्र के ऊपर 22-गेज कुंडा निलंबित करें। सुनिश्चित करें कि पिंजरे के नीचे मूत्र को पिंजरे के नीचे स्थित बैलेंस के एकत्रित डिवाइस पर गिरने की अनुमति है। टिथर की ऊँचाई को समायोजित करें ताकि माउस टयूबिंग को बिना दबाव या खींचने के बिना पिंजरे के चारों ओर आसानी से स्थानांतरित कर सकें। ( चित्रा 7 )
    4. समाप्त होने पर, यह सुनिश्चित करने के लिए जांचें कि सिस्टम और बाहरी PE50 टयूबिंग 0.9% NaCl से भरे हुए हैं और सभी एयर बुलबुले हटा दिए गए हैं।
  2. प्रस्तुत करने कारिकॉर्डिंग के लिए पशु का आश्रय
    1. 2% इन्फ्लुरायर्न के साथ जानवर को एनेस्थेटेज़ करें और इसे अपने पेट पर रखें। 30-गेज प्लग को निकालें और PE50 टिथर के अंत में पीई 10 टयूबिंग (मूत्राशय कैथेटर) को स्लाइड करें। गर्म गोंद का उपयोग करने के लिए एक निर्विवाद मुहर बनाने के लिए
    2. संज्ञाहरण को बंद करें और एक समानांतर-तार मंजिल के साथ रिकॉर्डिंग पिंजरे में जानवर को रखें, जिससे मूत्र एक विश्लेषणात्मक संतुलन के शीर्ष पर स्थित एकत्रित डिवाइस पर सीधे गिर जाएंगे। ( चित्रा 7 )
    3. पशु पिंजरे में एक बार रिकॉर्डिंग शुरू करें, लेकिन infusing शुरू नहीं करते हैं जानवर की निगरानी करें जब तक कि इसे पूरी तरह से संज्ञाहरण से ठीक नहीं हो। मूत्राशय का दबाव स्थिर होने के बाद, 0.6 एमएल / एच की दर से 0.9% NaCl को शुरू करना शुरू कर दें।
      नोट: कोई भी परिवर्तन किए जाने पर रिकॉर्डिंग प्रोग्राम में एक नोट बनाएं जब जलसे शुरू होता है, बंद हो जाता है, या अनियमितता होती है तो इसका रिकॉर्ड करना महत्वपूर्ण है।
    4. लीक के लिए सिस्टम की जाँच करें और सुनिश्चित करें कि जानवर को आसान एसीसी हैभोजन और पानी के लिए संक्षेप
    5. एक शांत कमरे में रिकॉर्डिंग जारी रखें, जब तक कि तीन प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य मिक्कूचरेशन चक्र प्राप्त न हों।
      नोट: पशु रिकॉर्डिंग के दौरान पूरी तरह से अबाधित नहीं होना चाहिए। अधिमानतः व्यवहार का पालन करने के लिए दूरस्थ वीडियो निगरानी का उपयोग करें।

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Representative Results

ट्यूबिंग सामग्री और व्यास के बीच दबाव बढ़ने की स्थिरता में और ट्यूब अवरोधन के दौरान प्रणाली में गिरावट के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था। मूत्राशय की दीवार सूजन पोलियेथिलिन (पीई) और पॉलीयुरेथेन (पीयू) दोनों सामग्री के लिए इंट्रावेलिकल ट्यूब आरोपण महत्वपूर्ण थी। 2 दिन, गंभीर शुक्राणु सूजन विकसित यह मूत्राशय के आधे क्रॉस-सेक्शन पर कब्जा कर लिया था, जिससे लुमेन का रुकावट हो सकता था। दिन 5 पर, एडिमा पूरी तरह से हल हो गई, सूजनशील क्षेत्रों को छोड़कर सूजन कोशिकाओं के साथ घुसपैठ की गई, जो आंशिक तौर पर पेशी पर आक्रमण करते थे। 7 दिन, भड़काऊ घुसपैठ काफी कम हो गया और मूत्राशय की दीवार की ऊतक विज्ञान सामान्य ( चित्रा 8 ) पर वापस आ गई। दिन 2 और दिन 3 पर दिये गये ऊतक सूजन की सबसे बड़ी हद तक व्यवहार संबंधी voiding डेटा के साथ सहसंबद्ध है जो काफी खराब मूत्राशय समारोह ( चित्रा 9 ) दिखा रहा है। पोप द्वारा सामान्यीकृत आवृत्ति आवृत्ति सेंट-ऑपरेटिव डे 5

जागृत रूप से माउस (कम से कम गतिशीलता कलाकृतियों के साथ) में घुसपैठ का दबाव 10-15 सेमी एच 2 ओ के आधारभूत दबाव से होता है, जो अपरिवर्तित रह सकता है या धीरे-धीरे भरने चक्र के दौरान 10 से अधिक सेमी एच 2 हे से बढ़ सकता है , अचानक, पल्टाइटिल दबाव बढ़ने के बाद और फिर voiding ( आंकड़े 10 और 11 ) के दौरान ड्रॉप।

आकृति 1
चित्रा 1: मूत्र मूत्राशय में आरोपण के लिए पीई 10 ट्यूबिंग। ( ए ) पीई 10 टयूबिंग का एक 7 सेमी टुकड़ा गर्म गोंद की बूंदों 4.5, 5 पर, और flared अंत से 5.5 सेमी। ( बी और सी ) ट्यूब के flared अंत (मूत्राशय में ट्यूब सुरक्षित करने के लिए इस्तेमाल किया) दिखा एक विस्तृत तस्वीरEs / ftp_upload / 55588 / 55588fig1large.jpg "target =" _ blank "> कृपया इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
चित्रा 2: पीई 10 मूत्राशय ट्यूबिंग के बाहरी भाग के लिए प्लग। प्लग 30 जी सुई और गर्म गोंद से बनाया गया है। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

चित्र तीन
चित्रा 3: मूत्राशय ट्यूबिंग के पाठ्यक्रम। पेट के माध्यम से टयूबिंग का स्थान और गर्दन के रस्सी के नीचे के चमड़े के नीचे के मार्ग को दर्शाते हुए योजनाबद्ध रेखा चित्रण कृपया एक बड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करेंइस आंकड़े का संस्करण

चित्रा 4
चित्रा 4: मूत्राशय / ट्यूबिंग तुलना और स्टेप्स को लूज़ मोनोफिलामेंट सियर के प्रयोग से ट्यूब में डालें और सुरक्षित करें। चित्रण चित्रण: ( ए ) पीई 50 और पीई 10 की तुलना में माउस मूत्र मूत्राशय के लिए चित्र। ( बी ) मूत्राशय के आसपास रखा 6-0 मोनोफिलामेंट सिवनी की एक छोटी लूप # 5 माइक्रोफोरॉप्स की एक जोड़ी मूत्राशय के गुंबद को जोड़ती है जबकि एक 21 जी सुई का प्रयोग cystotomy करने के लिए किया जाता है। ( सी ) मूत्राशय के गुंबद को जारी किए बिना, विपरीत हाथ में # 5 माइक्रोफोरॉप्स की एक जोड़ी पीई 10 कैथेटर डालने से पहले छेद की जांच करती है। ( डी ) पीई 10 कैथेटर 6-0 मोनोफ़िलामेंट सिवनी के साथ मूत्राशय के गुंबद में सुरक्षित है। आप यहाँ क्लिक करेंइस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए

चित्रा 5
चित्रा 5: ब्लेड स्ट्रिंग सीवर को मूत्राशय में ट्यूब की सुरक्षा के लिए एक वैकल्पिक विधि के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है। ( ए ) मूत्राशय के गुंबद में बटुआ स्ट्रिंग सीवन। ( बी ) पीई 10 टयूबिंग पर्स स्ट्रिंग के केंद्र के माध्यम से डाली गई। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

चित्रा 6
चित्र 6: प्रायोगिक सेट-अप दबाव ट्रांसड्यूसर और इंट्रासेसिल कैथेटर के लिए श्रृंखला में जुड़े जलसेक पंप में 0.9% NaCl युक्त सिरिंज। निचले सही में कंप्यूटर स्क्रीन तीन प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य mict दिखाता हैमूत्राशय चक्र इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

चित्रा 7
चित्रा 7: प्रायोगिक रिकॉर्डिंग सेट-अप ( ए ) 22 जी स्विंग एक रिकॉर्डिंग पिंजरे और शेष राशि पर निलंबित। ( बी ) एक 22 जी स्विवल और एक पीई 250 टिथर के साथ जलसेक टयूबिंग के बाहरी भाग की पूरी लंबाई दिखाए जाने वाला फोटो। ( सी ) पीई50 टयूबिंग को कवर करने वाले वसंत शीथ के साथ 22 जी स्विवेल इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

आंकड़ा 8
8 चित्रा: पुनः के हिस्टोलॉजिकल मूल्यांकनमूत्र मूत्राशय की दीवार के एक प्रत्यारोपित पीई 10 ट्यूब के स्पॉन्स शल्य चिकित्सा के बाद, 2, 3, 5 और 7 दिनों के पहले, हेमटॉक्साइलिन और ईसिन (एच एंड ई) के साथ मूत्र मूत्राशय के क्रॉस-सेक्शन के साथ दाग दिया गया। पोस्ट-ऑपरेटिव डे पर मूत्राशय की दीवार सूजन का समाधान किया गया। कृपया इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए यहां क्लिक करें।

9 चित्र
9 चित्रा: वॉयडिंग स्पॉट परख का उपयोग करके कार्यात्मक मूत्राशय मूल्यांकन। यूवी प्रकाश के साथ दिन के 0 पर (ट्यूब इम्प्लांट से पहले), 2, 3, 4, 5 और 7 पोस्ट-इंट्रावेलिकल ट्यूब इम्प्लांट का दस्तावेजीकरण यूवी प्रकाश के साथ देखा गया फिल्टर पेपर पर मूत्र स्पॉट। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें


10 चित्रा: Cystometrogram एक जाग में घुसपैठ के मूत्राशय के दबाव के प्रतिनिधि का पता लगाने, स्वतंत्र रूप से माउस ले जाने ट्रेस 3 प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य मिक्कूचरेशन चक्र इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

चित्रा 11
चित्रा 11: मिक्सिटिशन चरण दबाव में प्रारंभिक वृद्धि, शिखर दबाव, और बेसलाइन के लिए एक तेज़ दबाव ड्रॉप के दौरान उच्च आवृत्ति दोलन के साथ मिक्सरिशन चरण का चित्रण करना। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें


चित्रा 12: टिंगर एंकरिंग ( ए ) एंकर जानवर में पीई 10 कैथेटर को सुरक्षित करने के लिए इस्तेमाल किया जाता है और ट्यूब को मूत्राशय पर पिलिंग से रोकता है। डिस्क वसंत शीथ से जुड़ी है ( बी ) बाहरी PE50 टयूबिंग से जुड़ी आंतरिक पीई 10 कैथेटर। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

चित्रा 13
चित्रा 13: स्विवल एंकर लंगर के चमड़े के नीचे का भाग ( 1 ) कपड़े से बने डिस्क और ( 2 ) एक धातु पाश।

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Discussion

इष्टतम सामग्री और आंतराशि टयूबिंग का आकार

प्रभाव टयूबिंग व्यास के दबाव रिकॉर्डिंग पर निर्धारित करने के लिए, हमने विभिन्न माइक्रोफ़्लुइडिक ट्यूबों का परीक्षण किया है; पीई 50 (0.58 मिमी आईडी), पॉयुरुइरेथेन पीयू027 (0.4 मिमी आईडी), पीई 25 (0.46 एमएम आईडी), और पीई 10 (0.28 एमएम आईडी)। प्रत्येक ट्यूब के लिए, दबाव 1 एमएल / एच पर चलने वाले पंप के साथ दर्ज किया गया था, जबकि तेजी से ट्यूब को 0 से 30 सेंटीमीटर तक खिसकाने के लिए दबाव डाला गया था। वीवा प्रयोगों में प्रारंभिक रूप से पीई50 टयूबिंग का इस्तेमाल करने की कोशिश की गई, लेकिन चूंकि माउस ब्लैडर ( चित्रा 4 ए ) की तुलना में टयूबिंग के आकार के असफल रहे। हालांकि यह स्मिथ और कुचेल द्वारा खोज का समर्थन करता है, जो सुझाव देते हैं कि माउस में जागने वाली कोशिका के लिए पीई 50 टयूबिंग का उपयोग कलाकृतियों को बनाता है, जिससे डेटा की व्याख्या करना मुश्किल हो जाता है, 12 यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि अन्य लोगों ने सफलतापूर्वक पीई50 टयूबिंग का इस्तेमाल किया , जागने वाली रोकथाम, और anesthetized माउस cystometry। 9 , <पीई 10 के मुकाबले पीई 10 के मुकाबले अधिक लचीला है, जो माउस की चाल के रूप में मूत्राशय पर लागू होने वाले तनाव की मात्रा को कम कर देता है, जो कि आंदोलन कलाकृतियों को कम करता है। यह महत्वपूर्ण है कि पीई 10 का हिस्सा यथासंभव कम है (≤ 7cm)। लंबे समय से पीई 10 टयूबिंग की संभावना अधिक बढ़ जाती है कि दबाव पढ़ने में कमी आएगी। यद्यपि एक नरम, अधिक जैव-निष्क्रिय सामग्री का उपयोग करने के लिए एक सैद्धांतिक लाभ होता है, जैसे कि पीयू के लिए इन्टेरेक्शनल आरोपण को सूजन की प्रतिक्रिया कम करने के लिए, इसके परिणामस्वरूप पोस्ट-ऑपरेटिव मूत्राशय सूजन में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं आया। इसके अलावा, ट्रायल्स जो नरम पीयू टयूबिंग का इस्तेमाल करते थे, वे कुंकींग और प्लगिंग के साथ जुड़े थे।

मूत्राशय दीवार सिकुड़ना और सूजन पर सर्जरी के प्रभाव

अब तक, मूत्राशय समारोह और मूत्राशय की दीवार सूजन पर डेटा, एक इंट्रावेलिकल ट्यूब के प्रत्यारोपण के बाद, केवल चूहों के लिए उपलब्ध थे। पिछले एस के अनुसारट्यूडीज़, मिक्सिफिकेशन की मात्रा कम थी और मिक्कोचरेशन आवृत्ति पोस्ट-ऑपरेटिव दिनों 1-3 थी। 15 यह भी दिखाया गया था कि मूत्राशय के मूत्राशय में परिवर्तन मूत्राशय की गंभीर सूजन से जुड़े थे, साथ ही एडिमा 3 दिन। 16 मूत्र मूत्राशय समारोह में परिवर्तन की समझ को बेहतर बनाने के लिए, मूत्राशय की दीवार सूजन और नर, सी 57 बीएल / 6 चूहों की मरम्मत समयरेखा, जो पीई 10 टयूबिंग के प्रत्यारोपण से उत्पन्न होती है, 12-घंटे के व्यवहार आवक आवृत्ति को फ़िल्टर पेपर रिकॉर्डिंग पद्धति का उपयोग करके मूल्यांकन किया गया था । आखिरी रिकॉर्डिंग के बाद, माउस को संवेदनाहट किया गया और मूत्राशय का आकलन, कटाई, स्थिर और हिस्टोलिक रूप से मूल्यांकन किया गया। सर्जरी के बाद दिन 1 और 2 में, आवृत्ति आवृत्ति में कमी आई और वृद्धि देखी गई, उसके बाद दिन में वीओआईडी में वृद्धि हुई। दिन के चलते सामान्य व्यवहार का वजन 5. फसल पर मूत्राशय के सकल मूल्यांकन और एच एंड ई के धुंधला होने के बाद सबसे बड़ी राशिपोस्ट-ऑपरेटिव दिन 2 और 3 पर उपनगरीय सूजन के कारण, मूत्राशय ट्यूब प्रत्यारोपण के बाद 5 और 7 दिन नियंत्रण ब्लैडर के समान होते हैं।

क्लिनिकल यूरेडायनामिक अध्ययनों के समान, अधिकांश प्रयोगशालाओं ने कमरे के तापमान 0.9% NaCl का इस्तेमाल किया। 11 पिछले अध्ययनों में जलसेक की दर 10 μL / मिनट से 100 μL / मिनट तक भिन्न होती है। 17 , 18 एक अध्ययन में एक मूत्राशय में मूत्राशय के कार्य पर विभिन्न जलसेक दर के प्रभावों की तुलना नहीं की गई है, हालांकि, बड़े जानवरों के अध्ययनों में प्राप्त आंकड़ों ने सिफारिश की है कि धीमी भरने की दरें इस्तेमाल की जानी चाहिए। माउस मूत्राशय की छोटी मात्रा के कारण, पिस्टनैक्टिक पंप उपयुक्त नहीं होते हैं और एक निरंतर तंत्र आसवन पंप आवश्यक है।

सबसे सटीक और प्रयोग करने योग्य एफसी रिकॉर्डिंग सीमित कलाकृतियों के साथ दबाव में परिवर्तनों का अच्छा संचरण करते हैं। परिणामों का उपयोग करके प्राप्त किया गयापीई 10 टयूबिंग का एक छोटा खंड सीधे PE50 से जुड़ा हुआ है, चूंकि माउस मूत्र मूत्राशय में दबाव का सटीक माप प्रदान किया गया है। पशु आंदोलन की वजह से दबाव में उतार चढ़ाव, उस बिंदु पर त्वचा को ट्यूब पर लंगराने तक सीमित किया जा सकता है, जहां गर्दन के नल ( आंकड़े 12 और 13 ) में बाहर निकलता है। यह गोंद बुलबुले के इस्तेमाल से प्राप्त किया जा सकता है और एक विशेष लंगर जिसमें मेटल कपड़े से ढका हुआ प्लेट शामिल है जो थैलेदार ढंग से रखा जाता है, और बाहरी टुकड़ा, जो ट्यूब को कवर करने वाले धातु के वसंत से जुड़ा हुआ है। मूत्राशय पर खींचने से ट्यूब को रोकने के लिए अतिरिक्त विधियों में पीई 10 टयूबिंग के आंतरिक हिस्से के लिए एक घुमावदार उपचुंबक ट्रैक बनाना शामिल है, जो ट्यूब में सुस्त प्रदान करता है, और एक घुमाव और टिथर का उपयोग करता है, जो घुमा और पिंजरे को रोकने में होता है। इन अध्ययनों द्वारा उपलब्ध कराए गए साहित्य और साक्ष्यों के आधार पर, निम्नलिखित चरणों का सुझाव दिया जाता है कि वेवो में सबसे अधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और शारीरिक रूप से सटीक पद्धति प्रदान करें।एक माउस में आंतरायिक दबाव की रिकॉर्डिंग मूत्राशय के गुंबद में कैथेटर को प्रत्यारोपित करने के लिए एक ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप और माइक्रोसर्जिकल टूल का उपयोग करें। सर्जरी और रिकॉर्डिंग के बीच एक 5 दिन की वसूली की अवधि की अनुमति दें। एक ही पिंजरे में पशु को त्वरित करना, जिसमें रिकार्डिंग किया जाएगा और भोजन और पानी की मुफ्त पहुंच प्रदान करेगी। न्यूनतम मानव संपर्क के साथ एक शांत वातावरण में प्रयोग करना, आदर्श रूप से पशुओं के व्यवहार को देखने के लिए दूरस्थ वीडियो निगरानी का उपयोग करें।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Polyethylene (PE) 10 tubing Instech BTPE-10 Fits 30G connectors/plugs
Polyethylene (PE) 50 tubing Instech BTPE-50 Fits 22G connectors/plugs
22 G single channel stainless steel swivel Instech 375/22
High Carbon Steel Utility Extension Spring (9/64" OD) Grainger 1NAH1 Protects PE50 tubing - Cut to length
22 G connector Instech SP22/12
Yutaoz Professional Hot Melt Adhesive Glue Gun Yutaoz Use low temperature setting (100 °C) - Any hot melt glue gun with an adjustable temperature range will work
Surebonder DT-2010 all purpose glue stick Surebonder Any all purpose hot glue will work
Dumont #5 curved microforceps World Precision Instruments 500232
Dumont #7 curved microforceps World Precision Instruments 14188
Mini dissecting scissors - straight World Precision Instruments 503240
Micro mosquito forceps (12.5 cm) World Precision Instruments 500451
Dissecting scissors - straight World Precision Instruments 14393
Castroviejo Needle Holder World Precision Instruments 503258
Isoflurane, USP Phoenix 2%, 1 L/min flow rate
Buprenorphine 0.05 mg/kg
0.9% Sodium Chloride Irrigation, USP Baxter
6-0 Ethilon black monofilament, non-absorbable suture Ethicon Bladder tie
6-0 Vicryl violet braided, absorbable suture Ethicon Muscle suture, running
6-0 Prolene blue monofilament, non-absorbable suture Ethicon Skin suture, vertical mattress, buried interrupted
KD Legato 210 infuse/withdraw pump KD Scientific 1.5 mL/hr
Disposable pressure transducer Digitimer NL108T2
Pressure Amplifier Digitimer NL108A
Power1401-3 data acquisition interface Digitimer
Spike2  Cambridge Electronic Design Limited PC pressure recording software
Leica MZ6 surgical operating microscope (3.2 - 20X) Leica Microsystems Magnification

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References

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चिकित्सा अंक 123 जाग कोशिका तंत्र माउस मूत्राशय ट्यूब आरोपण cystometric मूल्यांकन टयूबिंग मानकीकरण voided मात्रा
एक माउस मॉडल में जागरण तंत्रिका कोशिका के प्रदर्शन की प्रक्रिया का मूल्यांकन करना
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Mann-Gow, T. K., Larson, T. R.,… More

Mann-Gow, T. K., Larson, T. R., Wøien, C. T., Andersen, T. M., Andersson, K. E., Zvara, P. Evaluating the Procedure for Performing Awake Cystometry in a Mouse Model. J. Vis. Exp. (123), e55588, doi:10.3791/55588 (2017).

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