Summary
Vascularized komposit allograft tilbyder livs ændrelige fordele for transplantations modtagere, men de biologiske årsager til transplantat afvisning og vaskulopati er stadig dårligt forstået. Den gnaver kirurgiske model præsenteret her tilbyder en reproducerbar, klinisk relevant model for transplantation, så forskerne til at vurdere afvisning begivenheder og potentielle terapeutiske strategier for at forhindre deres forekomst.
Abstract
Vascularized sammensatte allotransplantation (VCA) er et relativt nyt felt i den rekonstruktive kirurgi. Kliniske resultater i humant VCA omfatter hånd og ansigt transplantationer og, for nylig, abdominalvæg, livmoder, og urogenitale transplantationer. Funktionelle resultater har overskredet de oprindelige forventninger, og de fleste modtagere nyder godt af en forbedret livskvalitet. Men, som klinisk erfaring akkumuleres, kronisk afvisning og komplikationer fra immunsuppression skal afhjælpes. I mange tilfælde, hvor poter har svigtet, den kausative patologi har været iskæmisk vasculopati. De biologiske mekanismer af akut og kronisk afvisning forbundet med VCA, især iskæmisk vasculopati, er vigtige forskningsområder. På grund af det meget lille antal VCA-patienter er evalueringen af de foreslåede mekanismer imidlertid bedre behandlet i en eksperimentel model. Flere grupper har brugt dyremodeller til at løse nogle af de relevante uløste spørgsmål i VCA afvisning og vasculopathy. Flere model designs, der involverer en række forskellige arter, er beskrevet i litteraturen. Her præsenterer vi en reproducerbar model af VCA heterotop bagekstremitet osteomyokutane flap i rotter, der kan anvendes til translationel VCA forskning. Denne model giver mulighed for seriel evaluering af transplantatet, herunder biopsier og forskellige billedbehandlings metoder, samtidig med at en lav grad af sygelighed.
Introduction
Rekonstruktiv kirurgi for den katastrofale vævs tabet fra amputation, blast skader, maligniteter, og medfødte defekter er begrænset af tilgængeligheden af væv fra patienten og den ekstra sygelighed forårsaget på donor stedet. I nogle tilfælde, såsom brænde ofre eller quadrilaterale amputerede, levedygtigt væv til genopbygning er ikke tilgængelig fra patienten. I 1964 blev den første moderne hånd transplantation udført i Ecuador. Mens dette var en teknisk succes, var immunsuppression til rådighed på det tidspunkt var utilstrækkelig til at forhindre afvisning, og transplantatet var tabt i mindre end 3 uger1. I 1998 og 1999 blev den første hånd transplantationer i den moderne æra af immunsuppression udført i Lyon, France2 og Louisville, KENTUCKY, USA3. For første gang, rekonstruktive kirurger kunne erstatte gerne med lignende. Face transplantation blev først udført i 20054, og en række andre VCA-transplantater er nu rutinemæssigt udføres, såsom abdominalvæg5, uterine, og urogenitale transplantationer6.
I modsætning til massiv organtransplantation involverer de fleste VCA-teknikker tilstedeværelsen af den meget antigen donor hud. Klinisk erfaring har fastslået, at den akutte afvisning af huden er relativt let at kontrollere, men kan bidrage til kronisk afvisning af de underliggende væv og fartøjer, som ikke reagerer godt på behandling7. Den vaskulære dysfunktion forbundet med en alloimmun respons er en mere ildevarslende forhindring for området af VCA7. Makrovasculopatier fører til perfusion underskud, forsinket helbredelse, og proinflammatoriske tilstande. Både konflydende aggressiv stor-kar vaskulopati og fokal intime hyperplasi forekommer i hænderne transplanterede modtagere7. Desuden, microvasculopathies sandsynligvis bidrage til VCA komplikationer samt og kan endda føre til afvisning begivenheder. Mens både immun og ikke-immune faktorer sandsynligvis spille en rolle i vaskulopati af hånd transplanterede modtagere, de specifikke mekanismer fremme distale kar dysfunktion i VCA er ikke kendt, især i forbindelse med lav-grade, kronisk afvisning. Disse ubesvarede spørgsmål nødvendiggør udvikling af en VCA-model for dyr, som vil gøre det muligt at foretage en seriel vurdering af transplantatet under det kliniske forløb af VCA-afstødning/-vedligeholdelse og vasculopati. En sådan model vil give indsigt i afvisning og vasculopati i ansigtet af immunsuppression, infektiøs udfordring, og/eller anden postoperative traumatisk skade8,9.
Præsenteret her er en allogen rotte VCA heterotop bagekstremitet osteomyokutane flap model. Baseret på tidligere offentliggjorte VCA-modeller, er denne procedureteknisk let at udføre, reproducerbar i et stort antal, og udviser minimal morbiditet og ubehag til recipient dyret. Denne model var designet til at tillade kliniske og histopatologiske vurderinger af VCA accept vs afvisning, og giver mulighed for at vurdere underliggende immun og ikke-immun mekanismer involveret i afvisning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyre operationer blev udført i overensstemmelse med protokoller godkendt af University of Louisville institutions Institut for dyrepasning og-brug (IACUC-godkendt protokol 18198) og de nationale Institut for sundhed (NIH) guide til pleje og brug af Forsøgsdyr10. Fire måneder gammel mand brun-Norge (RT1. Enn) og 4-måneders-gammel mand Lewis (RT1. Al) rotter blev anvendt som henholdsvis VCA donor og recipient.
1. donor-allograft-høst
- Bedøvet donordyret ved hjælp af fordampet isofluran, der påføres gennem et kammer.
- Barbering transplantat donor området (bagekstremitet), samt lyde og abdomen områder. Efter at, behandle med rigtige spørgsmål creme for at reducere mængden af fuzz venstre af klippemaskiner.
- Dybt anæstetize donor dyr ved hjælp af intraperitoneal (IP) ketamin (60 mg/kg)/xylazin (15 mg/kg)/Acepromazin (2 mg/kg). Giv en initialdosis på 0,2 mL/100 g legemsvægt og yderligere doser på 0,2 mL hver h. For nemheds skyld er det valgfrit at udføre dette trin før trin 2.
- Kontinuerligt overvåge dyr, mens under anæstesi for respiration, kropstemperatur, og dybde af anæstesi, ved hjælp af tå knibe tilbagetrækning refleks test.
- Giv 30 U af Heparin-opløsningen subkutant (SC) i Scruff-området før operationen for at forhindre koagulation.
- Bær en maske, et hoved dæksel, en engangs-isolations kjole og engangshandsker.
- Anbring donordyret på en varmepude. Producere en steril kirurgisk felt ved at prepping, skrubbe, og Drapering det kirurgiske område, herunder både ventrale og rygtet aspekter af benet. Don sterile handsker.
- Lav en 3 cm hud indsnit i lyden konkavitet ved hjælp af skalpel klinge #15 og afspejler den lyske fedt pad sideværts ved hjælp af iris saks.
- Udsæt de almindelige femorale kar, og Anbring en trådkrog med et elastikbånd for at trække mavemusklerne tilbage.
- Ved hjælp af et dissekere mikroskop (40x), dissekere pedikelskruefikseringssystem proximalt fra fremkomsten af de fælles femoral fartøjer under lyske ligament og distalt til sammenløbet af popliteale fartøjer ind i transplantatet.
- Ved hjælp af mikroclips og bipolar juveler ' pincet, fast og opdele de store arterielle og venøse grene, såsom lateral circumflex femoral fartøjer, overfladiske hale epigastriske fartøjer, saphena arterie, og proksimal hale femoral blodkar, til at mobilisere de vigtigste femorale fartøjer. Cauterize eventuelle små grene ved hjælp af fine bipolar pincet.
- Lav en hud indsnit fra midten af den tidligere hud skåret langs den ventrale side af bagbenet, til ankelområdet, ved hjælp af iris saks.
- Skær gracilis musklen, samt de andre adductor muskler under det, i en vertikal måde at eksponere og fast den mediale proksimale genicular fartøjer, dybe forgrenende små fartøjer, og iskias nerve.
Bemærk: På dette tidspunkt, på et separat kirurgisk bord, bør den anden kirurg intubate og bedøve (2,5%-3% isofluran) recipient dyret; Dette gør det muligt for kirurgerne at forberede recipient operationsstedet i tide til transplantat placering og minimere transplantatens iskæmiske tid. - På donordyret, gøre omkreds hud indsnit på niveau med knæet og anklen. Disartiter knæet og anklen, fjerne fremmede muskler og væv, og gøre en lodret hud indsnit på Rygsiden af bagbenet at frigøre transplantatet. På dette tidspunkt er transplantatet (bestående af fibula og skinneben, dækket med relaterede muskler og hud ø næret af dets perforatorer) kun forbundet med pedicle.
- Anbring små klemmer så prokelt som muligt på femoral arterie og vene, og skær pediclen så prokelt som muligt, nær det lyske ligament.
- For at skylle blod transplantatet skal du injicere hepariniseret saltvand (30 e/mL) i femoral arterien ved hjælp af en 27 G rødstump kanyle.
Bemærk: Dilating arterien før heparin flush giver nem adgang til indsættelse af kanylen. Under skylning, nøje overvåge udstrømningen fra femoral vene. Når klar væske forlader femoral vene, skal du stoppe skyllevæsken. - Wrap det isolerede transplantat i varmt saltvand gennemblødt gaze og transport det straks til recipient dyrets bord. På dette tidspunkt bør den modtagende kirurgiske sted allerede være forberedt til vaskulær anastomose.
- Efter transplantat høsten, straks aflive donor rotte via pneumothorax.
2. recipient transplantation kirurgi
- Efter sedation induktion ved hjælp af fordampet isofluran påføres gennem et kammer, dybt bedøve det modtagende dyr via en ventilator-kontrolleret endotrakeal tube og 2,5%-3% isofluran.
Bemærk: På dette stadium, donor rotte er stadig bedøvet. - Kontinuerligt overvåge puls, respiratorisk hastighed, kropstemperatur, og dybde af anæstesi af recipient dyret, ved hjælp af tå knivspids tilbagetrækning refleks test.
- For at forebygge dehydrering og hypoglykæmi indsprøjtes 2 mL af den lakterede Ringers opløsning og 2,5% dextrose subkutant i begyndelsen og yderligere 2 mL ved afslutningen af operationen.
- Barbere lysken området, og derefter behandle med rigtige spørgsmål creme for at reducere mængden af fuzz venstre af klippemaskiner.
- Bær en maske, et hoved dæksel, en engangs-isolation kjole, og sterile handsker.
- Anbring dyret på en varmepude. Påfør oftalmisk salve for at forhindre hornhinde afskrabninger under anæstesi. Fremstille et sterilt kirurgisk felt ved at prepping, skrubbe og Drapering af operationsområdet.
- Lav en 3 cm hud indsnit i lyden konkavitet ved hjælp af skalpel klinge #15 og afspejler den lyske fedt pad sideværts ved hjælp af iris saks.
- Udsæt de almindelige femorale kar, og Anbring en trådkrog med et elastikbånd for at trække mavemusklerne tilbage.
- Ligate og opdele Murphy grene.
- Ved hjælp af 10-0 nylon afbrudte suturer, anastomose donor skibe til recipient fartøjer via venøs end-to-side teknik og arteriel end-to-end teknik. Gradvist frigive klemmerne fra arterien og derefter vene. Overvåg Anastomotiske steder for blødning, og Tilføj yderligere suturer, hvis det er nødvendigt.
- Visuelt vurdere vaskulær anastomose for at sikre effektiv graft reperfusion.
- Indfør transplantatet i den inguinale lomme, og vend det på hovedet med ankelleddet overlegen og knæleddet underlegen.
- Ved hjælp af tucking sutures, fastgør transplantatet til tilstødende muskler. Luk huden via en afbrudt horisontal madras, der kan absorbere 4-0 suturer.
- Fjern recipient dyret fra anæstesi og vænne det fra ventilatoren. Anbring dyret på en varmepude til termisk støtte.
Bemærk: Den samlede drift tid er mellem 3 til 4 h, afhængigt af kirurgens erfaring og bekendtskab med den kirurgiske procedure. - Administration af meloxicam (1 mg/kg) subkutant til smerte undertrykkelse og overvågning, indtil dyret er fuldt genvundet og mobilt.
3. overvågning af VCA-modtagere
- Hus recipient rotter enkeltvis og overvåge dem dagligt for kliniske tegn på smerte, dehydrering, vægttab, og nedsat aktivitet i tillæg til kirurgisk svigt (for de første 48 – 72 h) eller afvisning. Administration af meloxicam subkutant (1 mg/kg) dagligt i de første 3 dage for smerte undertrykkelse.
- Baseret på forskningens endepunkt, skal du vælge et immunsuppressivt lægemiddel, der skal administreres.
4. histologi
- Under inhaleret isofluran anæstesi (2,5% – 3%), få den serielle hud og underliggende muskelbiopsier fra donor transplantatet på ønskede tidspunkter. Huden skal skrubbede og draperet før opnåelse af en biopsi, og et sterilt felt og teknik bør udføres.
- Luk såret med en til to masker ved hjælp af absorberbare 4-0 suturer. Returner dyret til buret og lad det komme sig efter anæstesi.
- Fastgør det biopsierede væv i separate rør i 10% formalin.
- På terminalens tidspunkt og under inhaleret isofluran anæstesi (2,5% – 3%), tage en større hudbiopsi, der spænder over donor/modtager grænsen. Find forsigtigt fartøjets snor-par på anastomoses sted; det korrekte sted vil fremgå på grund af suturerne. Tag de ønskede beholder prøver fra arterien og/eller vene. Fastgør alle prøver separat i 10% formalin. Efter indsamling af vævsprøver, og mens dyret stadig er under isofluran anæstesi, straks aflive dyret via pneumothorax.
- Ved hjælp af en vævs processor (eller anden foretrukken indlejrings teknik), skal paraffin indlejre hver biopsi i sin egen blok. For hudprøver, orientere vævet, så alle epidermal og dermal lag kan ses i en enkelt skive. For fartøjs prøver skal fartøjerne orientere, så der kan opnås tværsnit.
- Ved hjælp af en mikrotom skæres 6 μm tykke sektioner og anvendes til lysbilleder til hæmatooxylin og eosin (H & E) farvning.
- Plet for H & E ved hjælp af en standardprotokol.
- Få repræsentative billeder af alle ønskede vævsprøver ved hjælp af lysfelt mikroskopi teknikker.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Rotte VCA heterotop bagekstremitet osteomyokutane flap model giver mulighed for langvarig allograft overlevelse under immunsuppression. Modellen er pålidelig, reproducerbar og enkel at udføre. Flappen er godt skjult i lysinområdet og udgør minimal morbiditet og ubehag for dyret. Hudpræsentationen er en klinisk manifestation af allograft overlevelse og afvisning (figur 1). Klap designet giver mulighed for grov klinisk overvågning og skaber en mulighed for forskellige billedbehandlings teknikker, såsom Laser Doppler (figur 2). Serielle biopsier af hud, muskler og arterier gør det muligt at opnå histopatologisk opfølgning og analyse ved forskellige afstødnings stadier (figur 3).
Figur 1 : Repræsentative billeder fra transplanterede dyr. (A) syngeneic VCA langvarig overlevelse, uden immunsuppression behandling, på postoperative dag 45 (Pod 45); Bemærk forskellen i retning af pels vækst på grund af transplantatet inverteret orientering. (B) ALLOGEN VCA, der dagligt behandles med et immunsuppressivt lægemiddel på Pod 5. (C) ALLOGEN VCA langvarig overlevelse, der dagligt behandles med et immunsuppressivt lægemiddel på Pod 40; Bemærk normal pels vækst, der indikerer korrekt perfusion af transplantatet, uden tegn på afvisning. (D) allogen VCA i afstødning på POD 33. Immun undertrykkelses behandling blev stoppet fuldstændigt på POD 14; Bemærk de kliniske tegn på afstødning (hudatrofi, desquamation, tab af pels). Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2 : Laser Doppler billedsystem til at overvåge overfladisk hud revaskularisering af allograft. Det viste allograft blev overvåget på postoperative dage 4, 14 og 64. Panelerne til venstre viser blod perfusion målt ved Doppler Imaging, mens panelerne til højre viser det område, der afbildes af Doppler. Bemærk skiftet fra minimal blod perfusion umiddelbart efter VCA til fuld revascularisering af klap på dag 64. Dette allograft blev holdt under korrekt immunsuppression uden tegn på afvisning. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3 : H & E histopatologi af allograft i murinsynogene vs. allogen transplantationer. (A) hudbiopsi af et syngeneatisk allograft på Pod 45 (10x forstørrelse); Bemærk den normale morfologi af hudkomponenterne (epidermis, adnexa, og ingen tegn på mononukleære celleinfiltration). (B) hudbiopsi af et allogen allograft i afstødning på Pod 75, behandlet dagligt med en lavere dosis af en immunsuppressiv (10x forstørrelse); Bemærk epidermal atrofi, adnexa atrofi, mononukleære celleinfiltration, perivaskulær infiltration og kapillar trombose. (C) Muskel biopsi af et syngen-ALLOGRAFT på Pod 45 (10 x forstørrelse); Bemærk den normale morfologi af den strierede muskel. (D) Muskel biopsi af et allogen allograft i afstødning på Pod 98, behandlet dagligt med en lavere dosis af en immunosuppressiv (10x forstørrelse); Bemærk muskelatrofi og mononukleære celleinfiltration. (E) femoral arterie biopsi af et syngeneatisk ALLOGRAFT på Pod 45 (20x forstørrelse); Bemærk den normale morfologi af arterien. (F) femoral arterie biopsi af et allogen allograft i afstødning på Pod 98, der behandles dagligt med en lavere dosis af en immunsuppressiv (20x forstørrelse); Bemærk den intime hyperplasi, smalle lumen, og perivaskulære infiltration. Skala stang = 200 μm (a–D); 100 μm (E og F). Klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Ved udviklingen af denne model for VCA blev der taget hensyn til flere centrale spørgsmål. For det første var det vigtigt at inkludere intakt knogle (skinneben og fibula), knoglemarv og hud i transplantatet. Mens kliniske hånd transplantationer fra voksne donorer ikke overføre betydelige mængder af aktivt hæmatopoietisk marv, undersøgelser af den rolle, knoglemarv niche er bedre spejlet ved hjælp af en intakt, vaskulariseret knogle snarere end en skåret lang knogle, hvilket resulterer i fibrose af den eksponerede marv. Desuden reducerer den lukkede knogle osteomyokutane klap design risikoen for infektion og blødning. Både knoglemarv og hud er meget immunogent væv, som kan anvendes til at udløse en immunrespons, hvis det ønskes. For det andet var det ikke nødvendigt for transplantatet at være funktionelt, hvilket eliminerer behovet for en ortotopic model, der kræver kompleks osteosyntese og re-enervation af transplantatet. Dette forhindrer også nogle af de velkendte besværlige konsekvenser af ortotopic modeller, såsom en langvarig kirurgisk procedure og animalsk ubehag11,12. Det er dog vigtigt at bemærke, at heterotop design ikke tillader funktionelle udfald målinger af knogle og brusk, samt muskelfunktion, som alle er af betydelig interesse i VCA forskning. For det tredje skulle transplantatet være tilgængeligt for billedbehandlingssystemer, klinisk opfølgning og seriel biopsier. Endelig, med henblik på gennemstrømning, de pode kirurgi skulle være let udføres uden komplikationer. Med disse overvejelser i tankerne, blev en modificeret rotte osteomyokutane model af VCA udviklet, hvor den distale bagekstremitet, mellem knæet og anklen af donor (brun-Norge), herunder den overliggende hud og tilhørende vaskulatur, blev transplanteret i og lyske region på modtageren (Lewis). I dette tilfælde forekom den vaskulære tilførsel til transplantatet via femoral arterie og vene anastomoser.
Fordi huden er en vigtig nøglefaktor til at overvåge VCA afvisning, var der særlig omhu i forberedelsen af transplantatet for at bevare de små arterie perforatorer understøtter huden perfusion. Ved etableringen af denne model udførte vi indledende eksperimenter ved hjælp af indocyanine Green (ICG) angiografi (resultater ikke vist) for at bekræfte modellens hud perfusion design.
Da transplantatet vender på hovedet, således at den distale del af transplantatet er overlegen, og den proksimale del af transplantatet er ringere, kræves en lang pedikelskruefikseringssystem for at undgå kinking. Det bør derfor understreges, at donor-femoral-beholderne bør opdeles så meget som muligt, og at den modtagende femoral arterie skal opdeles så distalt som muligt.
Samtidig deltagelse af to kirurger anbefales under den endelige tilberedning/isolation af donor transplantatet; en kirurg bør afslutte transplantationen isolation, mens den anden kirurg anæstetiserer og intubates recipient dyret og begynder at forberede skibene til anastomoses. Hvis der er plads og udstyr til rådighed, kan en tredje kirurg forberede et andet recipient dyr, og begge donor ben kan anvendes til VCA-grafts. Kirurger skal koordinere med hinanden for at sikre minimal graft iskæmisk tid før anastomoser. Det er vores erfaring, at de fleste postoperative mortaliteter tilskrives anæstesi teknik. Hvis det er muligt, anbefaler vi, at et andet medlem af teamet skal være ansvarlig for anæstesi overvågning under operationen. Det siger sig selv, at for at udføre denne model med succes, en uddannet kirurg med grundlæggende mikrovaskulære teknikker er påkrævet. Afhængigt af kirurgens erfaring, kan modellen opnås med succes efter to til seks kirurgi forsøg.
Syngeneic rotter kan anvendes som en kontrolgruppe til at tage højde for helbredende dynamik relateret til afvisning. Den kontralaterale del af modtageren rotte kan også bruges som en kontrol, især når de udfører billeddannelse og biopsier.
Pels genvækst over den transplanterede hud er en af de bedste indikationer af vellykket allograft perfusion. På den anden side, pels tab, hudrødme, og deepitelisering kan indikere en afvisning begivenhed og nedsat blodtilførsel til nogle dele af klap. I en meget avanceret afvisning fase, kan huden vise nekrose og eksfoliering. Et fald i den allograft muskel masse er vist i et fremskredent stadium på grund af denervering atrofi. Dyrene mister normalt legemsvægt (op til 10%) i de første 7 – 10 dage, men derefter inddrive og trives. Vi anbefaler at tilføje ernæringsmæssigt tilsat vand gel (fx DietGel Recovery) i de første få postoperative dage til at understøtte recipient rotte ernæring. I et meget lille antal dyr (to ud af over 50 forsøgsdyr), vi var vidne til hudinfektion og autophagy.
Afslutningsvis, den modificerede model af heterotopic, allogen bagekstremitet osteomyokutane VCA graft præsenteret her tilbyder en reproducerbar, alsidig transplantations paradigme. Seriel biopsier og billedbehandling giver oplysninger om tidsforløbet af afvisnings hændelser. De mange forskellige kliniske symptomer, der kan undersøgt med denne metode gør det til en yderst tilpasningsdygtig translationel model med potentiale for talrige indsigtsfulde opdagelser i de kommende år.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af Kontoret for den assisterende forsvarsminister for Sundhedsanliggender gennem Congressionally instrueret medicinsk forskning program under Award No. W81XWH-13-2-0057. Udtalelser, fortolkninger, konklusioner, og anbefalinger er dem af forfatterne og er ikke nødvendigvis godkendt af Department of Defense.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Acepromazine | Henry Schein | 5700850 | |
| Adventitia Scissors | ASSI | SAS15R8 | |
| Approximator Clamp (Double) | ASSI | ABB2V, ABB22V | |
| Approximator Clamp (single) | FST | 00398-02 | |
| Clamp Applying Forceps | ASSI | CAF4 | |
| Dissecting Scissors | ASSI | SDS18R8 | |
| Flushing blunt needle 27 G | SAI | ||
| Heparin Sodium | Sagent | 25021-400-30 | |
| Isoflurane | Patterson Veterinary | 14043-704-06 | |
| Jewelers Bipolar | ASSI | 103000BPS03 | |
| Jewelers forceps #3 | FST | 11231-30 | |
| Ketamine HCl 100 mg/mL | Zoetis | 043-304 | DEA License required |
| Lactated Ringer Solution | Hospira | 0409-7953-03 | |
| Lactated Ringer Solution + 5% Dextrose | Hospira | 0409-7953-09 | |
| Meloxicam | Henry Schein | 11695-6925-2 | |
| Micro forceps | ASSI | JFAL3 | |
| Micro needle holder | ASSI | B138 | |
| Prograf (Tacrolimus) 5 mg/mL | Astellas | 0469-3016-01 | |
| Suture, 10-0 Prolene | Ethicon | W2790 | or 10-0 Ethilon (2830) |
| Suture, 4-0 Coated Vicryl | Ethicon | J714D | |
| Vessel Dilator Forceps | ASSI | D5AZ | |
| Xylazine | VetOne | 13985-612-50 |
References
- Gilbert Fernandez, J. J., Febres-Cordero, R. G., Simpson, R. L. The Untold Story of the First Hand Transplant: Dedicated to the Memory of one of the Great Minds of the Ecuadorian Medical Community and the World. Journal of Reconstructive Microsurgery. , (2018).
- Dubernard, J. M., et al. Human hand allograft: report on first 6 months. Lancet. 353 (9161), 1315-1320 (1999).
- Jones, J. W., Gruber, S. A., Barker, J. H., Breidenbach, W. C. Successful hand transplantation. One-year follow-up. Louisville Hand Transplant Team. The New England Journal of Medicine. 343 (7), 468-473 (2000).
- Devauchelle, B., et al. First human face allograft: early report. Lancet. 368 (9531), 203-209 (2006).
- Broyles, J. M., et al. Functional abdominal wall reconstruction using an innervated abdominal wall vascularized composite tissue allograft: a cadaveric study and review of the literature. Journal of Reconstructive Microsurgery. 31 (1), 39-44 (2015).
- Kollar, B., et al. Innovations in reconstructive microsurgery: Reconstructive transplantation. Journal of Surgical Oncology. 118 (5), 800-806 (2018).
- Kaufman, C. L., et al. Graft vasculopathy in clinical hand transplantation. American Journal of Transplantation. 12 (4), 1004-1016 (2012).
- Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation. Birth Defects Research Part C: Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).
- Kaufman, C. L., et al.
- Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Institute for Laboratory Animal Research, Division on Earth and Life Studies, National Research Council of the National Academies. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, 8th edition. , National Academies Press. Washington, DC. (2011).
- Nazzal, J. A., Johnson, T. S., Gordon, C. R., Randolph, M. A., Lee, W. P. Heterotopic limb allotransplantation model to study skin rejection in the rat. Microsurgery. 24 (6), 448-453 (2004).
- Ulusal, A. E., Ulusal, B. G., Hung, L. M., Wei, F. C. Heterotopic hindlimb allotransplantation in rats: an alternative model for immunological research in composite-tissue allotransplantation. Microsurgery. 25 (5), 410-414 (2005).
