幼虫環腺解剖:ショウジョウバエからの発達内分泌器官の分離

- リング腺を解剖するには、解剖顕微鏡、2つの鉗子、解剖ナイフとして機能する細かいゲージ針、緩衝溶液が必要です。口のフックを含む幼虫の頭部を特定してリング腺を見つけてください。

幼虫環腺は、3つの異なる内分泌器官を含む複雑な内分泌構造である。 子宮体はリング腺の中心に位置し、発達と老化を調節する若年ホルモンを産生する。胸部腺は体の同孔を取り囲み、構造の大部分を占める。

この例では、免疫検査のために幼虫脳と環腺を解剖します。

- 幼虫を準備した後、 解剖顕微鏡でPBSで満たされた3センチ皿でコース解剖を開始します。まず、口のフックを鉗子で握ります。次に、マイクロハサミを使って、前先端から約3分の1の長さで体を切断します。

10分以内に20個の幼虫を準備し、固定液に移します。30分後に準備を洗浄し、免疫染色を進めます。

解剖顕微鏡の下で、1組の鉗子でキューティクルまたは口のフックを握りしめ、ナイフのような1ミリリットルの注射器に取り付けられた27ゲージの針を使用して、食道と眼椎間板の前先端を切り取ることによって、脳リング腺アイディスク複合体を身体のキューティクルから取り除きます。

次に鉗子を使って、食道と腸を脳環状の眼球複合体から慎重に分離し、食道が腹側神経コードの上の脳を通過するので、腸を後部に引き出します。

-解剖中に鋭いエッジを持つ細かい鉗子を使用することは非常に不可欠です。私はまた、あなたがギャップなしでエッジを一緒に持って来るためにアーカンソー州の粉砕石で鉗子を研ぎ澄ますことを強くお勧めします。

-サンプルを転送するには、広いボアチップを持つマイクロピペットを使用してください。 サンプルをガラススライドの中央に付着させる。次に、鉗子を使ってサンプルを腹側に置き、脳の裏側にあるリング腺を画像化することができます。