注射的。 stephensi胚胎生成抗药性疟疾的蚊子

每 15 秒，世界上就有一个孩子死于疟疾，在詹姆斯实验室这里，或者试图制造无法携带疟疾人的法国蚊子。我的名字是 TIUs。我现在在加州尔湾环球影城的 Anthony James 实验室的分子生物学和生物化学系。

今天我将向您展示如何制作转基因而不是史蒂文斯眼。我们这样做是为了使疟疾蚊子变得顽固，这样它们就无法携带疟疾寄生虫。现在我已经准备了一个装有等渗缓冲液的小瓶，蚊子将在那里产卵。

我要用这个抽吸器吸走蚊子，然后放入一个小瓶中。然后，这个小瓶进入 30 摄氏度的培养箱中，我们将在杯子中放置约 1 小时。现在我们要拉动显微注射针。

这些是石英制成的针，我们必须使用非常细的尖端。因此，我们需要这些拔针器。我们使用 Suter instruments 的拔针器，也使用 SU instruments 中的 subtle 的针。

所以现在把蚊子取出来，我将这些卵放入培养皿中，在那里我有一张浸泡在等渗缓冲液中的滤纸，只是为了在注射期间保持胚胎湿润。滤纸上的水量很关键。你不希望鸡蛋漂浮，也不想让它变干。

现在，我将胚胎从鸡蛋纸上移到另一张浸泡在等渗缓冲液中的三毫米 watman 纸上。现在这样做以去除可丽耐，然后再将它们对齐以进行显微注射。所以现在我要去掉可丽耐，这是鸡蛋上的银色表面。

我通过用刷子刷掉它们来做到这一点。所以在上面，我们有一个胚胎，可丽耐仍然坐在那里，它们有这个银色的闪亮部分。下面的在哪里？

我已经成功地取出了可丽耐，这个顶部的可能会滑到胶带上，而下面的会粘住。当你做一个不平衡的一侧时，这就是重要的。现在我正在对齐胚胎。

胚胎的前端是 factor 或 large，我把那个放在右边。左边是海报端，它更纤细，我将在其中注射胚胎。我正在努力将它们放在一起，以便它们互相帮助以保持位置。

通常我一起排成一行做大约 10 个。现在我有一条线，胚胎，我将把它们转移到盖玻片上。在封面上。

我用假发胶带让它们粘住。完成后，我将用另一张滤纸擦干胚胎所在的滤纸，将胚胎放在盖玻片上，让它干燥 30 秒，然后再涂油。现在我们已经对齐了胚胎并将它们放在油下。

在显微镜载物台上，我们将使用微生物图案的这种特殊尖端注射与食用染料混合的 DNA，并将此注射到端口的针头中。现在我们已经填充了针头并将其放回微型注射器上。现在我们准备好进行微注射了。

现在我正在移动针头来磨锐它和我，这样我就可以看到它很专注。完成后，我移动一根重量针，然后移入胚胎并聚焦它们。完成后，我再次移动针头，直到它就位并继续我的胚胎。

现在，当针头穿过油时，它会变得模糊，您需要再次调整它。所以那正是鲨鱼。没错，鲨鱼蜱。

现在我已准备好进行注射。你可以看到我用针头接触胚胎，这样做我打破了尖端，你可以看到一个小液滴出来，将被注射到胚胎中。所以在这里注入并再次取出它。

我每次检查每个胚胎之间是否有一小滴从针尖流出。正如你所看到的，我需要为每个胚胎重新调整，以达到完美的位置。现在这个正在泄漏。

如您所见，当我在油中进行第二次注射时，气泡变得非常大，我需要重新调整微型喷油器的压力。所以现在我们已经完成了显微注射，我们将胚胎从显微镜移动到培养皿中，我们已经填充了等渗缓冲液。我将擦去盖玻片上的油，将其切成一小块，然后放入培养皿中。

现在我们要把它们留在这里，直到一天结束和室温。然后我们把他们向下移动到内部。今天我向你展示了如何注射一个糟糕的史蒂文一面来制作短暂的蚊子。

现在我们只需要等待幼虫孵化，所有幼虫孵化。我们会抚养成虫，然后它们会交配。在那之后，我们将有三周的时间来启动筛选，无论它们是否是 Refactor。