一个渐变产生的微流体装置，细胞生物学

我叫江。我是哈佛大学和麻省理工学院健康、科学和技术的海报研究员。我叫 Amir Manchi，是麻省理工学院哈佛大学健康科学与技术系 SANE 实验室的本科生教授。

这张幻灯片展示了如何制作设备的方案过程，因此我只需在硅蒸汽上涂上 SUA 50 旋涂，然后在硅蒸汽上进一步放置掩模，然后进行 UUV 曝光和显影。我们终于可以得到，把这些垫子放在硅胶蒸气上。之后，我们只需铸造 PDMS，然后爬行和烘烤，然后进行小冲头，然后我们就可以使用氧气等离子体在 PDMS 设备和直的 glace 之间粘合。

好了，我们现在在实验室内的微加工室，我们将首先制作一些 PDMS 层。我所说的 PDMS 是指聚甲基 suboxane，它是一种有机聚合物。它是应用最广泛的硅基有机聚合物。

它实际上是两种不同事物的混合物，是硅弹性体基和硅弹性体固化剂的混合物。所以比例是碱的 10 和固化剂的 1。我们需要大约 10 克的基料，因此我们需要大约 1 克弹性体固化剂，我将尝试将这种基料和固化剂相互混合。

我会用移液器。所以现在混合物已经准备好了，我要把它倒在硅晶片的顶部。所以这个想法是这些硅晶片上面有一些图案。

它们实际上帮助 PDMS 聚合物获得图案，我们使用这些图案来在这些聚合物上获得通道和凹槽以及/或我们需要的任何其他图案。下一步是，由于这种混合物中有很多气泡，我们将尝试将其放入真空中，以避免这些气泡进入我们的聚合物。我将 PDMS 凝胶放在真空室内的硅晶片上。

我要关闭腔室，然后打开真空。气泡消失后，大概几分钟左右，我们要把它放在烤箱里过夜，大约70摄氏度，这将使它们凝固。我希望你注意的模式是这三种不同的储备战争，以产生梯度，这样我们在一侧的注意力为零，我们在这一侧有特定的注意力，我们会均匀地向那一侧移动，我们将在另一端打出一个小拳头。 在这种情况下，这将是我们的出口。

下一步是切割其中一个图案并转移到爱国者盘中，让图案表面朝上。所以我希望你能看到我给你解释的三个入口和一个出口的模式。我们将为我们的入口使用小冲头，以便能够使用聚乙烯管，我将为我的出口使用大冲头，以便进行储备战。

因此，我们将从第一个入口开始。我要打一拳，第二拳和第三拳一样，第三拳也要打一个小拳。最后一步是在出口处打出一记重拳。

所以一旦我们完成了，我们就有了 A-P-D-M-S 层，这是顶层，我将在底部使用另一个玻璃层。这些微玻片将成为我在微叶装置的底层。现在我们在微纳加工室，我有一个玻璃层和一个 PDMS 层，我想将它们彼此连接在一起。

我们现在要用的是一种叫做等离子清洗机的机器。腔室内将发生的事情是，等离子体有助于打破薄弱的表面平衡，并用高反应性化学基团取而代之，而且表面实际上会变成亲水性的。现在要做的是，我要拿 PDMS 模具，它是顶层，里面有一些通道，我要拿出之前贴的胶带，以防止灰尘附着在我们的模具上。

我要把它放在腔室内。接下来要做的是我有一个玻璃层，它是一个显微镜载玻片，这将是我们在设备内部的底层。所以我也要把这个放在腔室内。

腔室关闭，我就会完全关闭它，先是电源，然后是泵，然后我们必须在大约五分钟后回到这台机器上。我要做的是我想关闭机器。所以我先关闭泵，然后关闭电源，然后打开腔室。

这种声音实际上是由于在腔室内的过程中施加的负压造成的。所以我要把不同的图层拿出来，把它们连接在一起。由于玻璃是底层，我将它用左手拿起并固定它，然后我将 PDMS 层放在我的玻璃层的顶部。

但是，由于实际上这些模式现在是正面的，因此我将反转 PDMS 层。将它们压在一起后，我会把它放在玻璃杯上。它们很容易附着，这种等离子体处理工艺的部分优势是粘合强度和持久性。

这就是最后的样子。所以，这些是我们的入口，这是我的出口，我们准备进行下一步。纤维在设备内部烹饪，然后培养 1 小时，然后在一小时后从培养箱中取出 SIM 样品，然后放入鱼类培养食品，然后制成溶液。

为了制作 EGF 解决方案，我们只需将两个研磨培养基作为 Azure，因为我们只将每个 EGF 放入 15 纳克和 10 微摩尔 50 D，非常努力地运行此解决方案，以可视化整个通道中的 EGF 梯度。然后我们只需取两个 mill 媒体、虚拟媒体，然后在这里放置另外两个 mill 媒体。这两个静置物只进行正常培养，正常培养物在装置中输注。

所以我去掉气泡，我再次连接，这个也是 M 手机气泡再次下降。然后我只需使用来自取出的 15 纳克 er EGF 和 10 微摩尔 fi dextra 和 2 mil 培养基，将样品放入注射器中，然后您就会知道气泡。然后只需切换解决方案，切换回来。

溶液进入气体型注射器中，推动 SH 几次以去除气泡，所有开关注射器溶液首先到达这里，然后通过三通杆切换杆和溶液，既不切换管道和溶液，也不和管道和溶液从管道中流出。然后在混合物之后，溶液出来，我们只需将管路插入 My Predict 设备，然后所有三种溶液都是相同的。你可以轻轻地连接，连接输液通道的 in net。

所以最后两个是正常的文化媒体。一种是含有 EGF 的培养基，以确认 EGF 的梯度曲线。这个是 cell in net，cell in net。

这将单元出口，因此使用三个集线器通道生成梯度，然后在单元区域内生成梯度。所以通常我想要的是，我们只做细胞就位、细胞悬浮、就位出口，然后我们可以轻轻地吸入网，然后细胞流过细胞区域，自动放置，它们沉淀在涂层上，然后确保细胞完全扩散。制作完成后，在确保细胞完全扩散后，我们就可以开始注入，然后使用无线电生成设备研究细胞迁移。