Two- and Three-Dimensional Live Cell Imaging of DNA Damage Response Proteins

Jason M. Beckta; Scott C. Henderson; Kristoffer Valerie

doi:10.3791/4251

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Biology

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Two- and Three-Dimensional Live Cell Imaging of DNA Damage Response Proteins

二维和三维活细胞成像的DNA损伤反应蛋白

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10:24 min

September 28, 2012

DOI: 10.3791/4251-v

Jason M. Beckta^1,2, Scott C. Henderson³, Kristoffer Valerie^1,2,4

¹Department of Radiation Oncology,Virginia Commonwealth University, ²Department of Biochemistry & Molecular Biology,Virginia Commonwealth University, ³Department of Anatomy & Neurobiology,Virginia Commonwealth University, ⁴Massey Cancer Center,Virginia Commonwealth University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

该协议描述了一个可视化的DNA双链断裂以及其定位在有丝分裂过程中DNA损伤激活的信号蛋白的方法。

该演示使用二维和 3D 活细胞成像来了解参与 DNA 损伤反应的蛋白质的时空关系。首先，使用含有适当荧光标记物的表达构建体转染或转导您选择的细胞系。在这里，M Cherry 和 GFP 接下来获取一系列对照视频，显示正常条件下荧光标记的细胞。

然后应用适当的处理并捕获处理对荧光细胞过程的影响数据，并分析蛋白质时空关系的视频数据。最终，活细胞荧光显微镜可以详细描述细胞动力学，例如响应 DNA 损伤剂形成 53 BP 一个病灶或 53 BP 在有丝分裂期间的行为。当我们想研究不同的治疗方法如何影响某些细胞系的有丝分裂时，我们第一次对 2D 和 3D 生活方式成像产生了兴趣。

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