Preparation of 3D Collagen Gels and Microchannels for the Study of 3D Interactions <em>In Vivo</em>

Brian Burkel; Brett A. Morris; Suzanne M. Ponik; Kristin M. Riching; Kevin W. Eliceiri; Patricia J. Keely

doi:10.3791/53989

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Bioengineering

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Preparation of 3D Collagen Gels and Microchannels for the Study of 3D Interactions In Vivo

3D胶原凝胶和微通道3D相互作用的研究准备在体内

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10:24 min

May 9, 2016

DOI: 10.3791/53989-v

Brian Burkel^1,2, Brett A. Morris¹, Suzanne M. Ponik¹, Kristin M. Riching¹, Kevin W. Eliceiri^2,3,4, Patricia J. Keely^1,2,5

¹Department of Cell and Regenerative Biology,University of Wisconsin-Madison, ²Laboratory for Optical and Computational Instrumentation,University of Wisconsin-Madison, ³Department of Biomedical Engineering,University of Wisconsin-Madison, ⁴Morgridge Institute for Research,University of Wisconsin-Madison, ⁵Paul P. Carbone Comprehensive Cancer center,University of Wisconsin-Madison

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胶原是细胞外基质的核心组件，并提供必要的暗示了几个细胞过程，从移植到分化和增殖。这里提供了一种用于三维胶原凝胶内嵌入电池的协议，和用于产生使用的PDMS微通道的随机或对齐胶原基质的更先进的技术。

该程序的总体目标是生成对齐和随机的 3D 胶原蛋白基质，以便在 3D 环境背景下观察细胞迁移或其他细胞过程。这种方法旨在捕获我们在真实组织中发现的胶原蛋白特征，这有助于回答关键问题，例如细胞用于识别对齐或随机细胞外基质的机制。这种技术的主要优点是您可以纵 3D 环境的组织、其中的图像单元，并且您可以使用常用设备经济高效地完成此作。

一般来说，刚接触这种方法的人会很挣扎，因为他们没有很好地混合胶原蛋白溶液和中和缓冲液，并且他们不一致地通过通道吸收胶原蛋白。演示此程序的是 Brian Burkel，他是我实验室的高级科学家。首先，在添加细胞和培养基之前，将胶原蛋白和 HEPES 缓冲液彻底混合，以确保胶原蛋白的正确中和。

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