糖尿病家兔欣德肢体缺血的临床前模型

我们描述了一种用于诱导高脂血症和糖尿病家兔周围缺血的外科手术。这种手术作为患者外周动脉疾病的临床前模型。血管造影也被描述为一种手段, 以衡量引入缺血和灌注恢复的程度。

对周围动脉疾病进行再生治疗将是非常有益的，这种动物模型也许能够更好地测试实验性治疗能否在人类患者中起作用。我们的程序旨在提出一个改进的模型。更准确地复制糖尿病或高脂血症患者的治疗阻力。

这种动物模型可用于测试周围缺血的新疗法，并提供一个临床前模型，损害了新血管化缺血。在确认在麻醉四到六个月大的糖尿病和高脂兔的后爪捏没有反应后，使用带15号刀片的手术刀，使四到五厘米长的切口只是侧向气管右侧，并使用钝解剖来暴露正确的普通胡萝卜动脉。使用小湿气缩回器打开切口，并小心地将胡萝卜动脉从血管和迷走神经中分离。

当胡萝卜动脉与神经和血管完全分离时，在暴露动脉的近端和远端放置一个4-O丝缝合线，用外科医生的结和四个方结将心肌的远端绑起来。在近端，使用血管硅胶系，以便根据需要拧紧或松开容器。接下来，沿暴露的胡萝卜动脉和神经涂抹约0.5毫升1%利多卡因，促进血管扩张和减少神经刺激。

管理500个国际单位的肝素四.放置一个四英寸的电线插入工具到动脉。将 0.014 英寸 185 厘米导丝通过插入工具插入到下部大项大音塔的腹腔顶处的大阳杆截面，并在电线上推进三根法国辫子动物导管。将辫尾导管推进到两厘米近到下一洲大音塔的腹腔顶的大阳椎分叉，将导管的尖端定位在第七个腰椎和第一个颈椎之间。

通过手动注射两到四毫升的对比剂来测试导管的位置。一旦确认正确的定位，通过导管进行100微克的硝化甘油的区域内注射，以增加血管扩张。然后通过导管施用0.8至1毫升1%利多卡因，以帮助血管扩张，用肝素盐水冲洗导管。

将自动造体喷油器的油管连接到导管，确保从管路中去除任何空气。使用自动造影注射器以每秒三毫升的速度通过导管提供九毫升的对比介质，并每秒六帧进行数字减法造影造影。选择串行图像并使用负 40% 设置更改血管图的图像，以最大限度地减少骨骼的外观，并拍摄血管灌注的完整图像与对比度。

要隔离股动脉，请使用编号为 15 的手术刀刀片在右股动脉上进行纵向皮肤切口，确保切口从内侧韧带下部延伸，并在刚到斜端的区域末端向小动脉延伸。使用钝解剖暴露股动脉，并使用威特兰缩回器打开切口。局部涂抹约0.5毫升1%利多卡因，以减少神经刺激和促进血管扩张。

继续钝解组织，以释放股动脉的整个长度及其所有分支，包括劣质的表胃、深股骨、横向围带和表面的表皮动脉。沿着肺动脉和盐状动脉以及外层动脉进行解剖，定期用盐水给该区域保湿，以防止组织损伤。小心地将股骨动脉与股骨静脉和神经分离，并在股骨动脉上放置两个 4-O 丝缝合线，在缝合线之间留出足够的空间，使动脉被切断。

然后用小门鲍姆剪刀在连结动脉的两条领带之间剪断。切除股动脉，从动脉分叉形成盐状和肺动脉，工作近，绑下任何侧枝，切除了股动脉的其余部分，以正下方的胃动脉。对于重复造影术，请使用装有三毫米不锈钢球的硅板。

用4-O丝线缝合将不锈钢球连接到四头肌的上部。将球放在到位时，将皮肤拉过球。通过导管进行100微克的硝化甘油的动脉注射，以增加血管扩张。

如果需要，通过导管再施用0.8至1毫升1%利多卡因，以帮助血管扩张，并用肝素盐水冲洗。在同一设置下使用自动造造喷油器再注射 9 毫升的对比介质。然后执行另一个造影，如演示。

在手术结束时，从右动脉上取下导管，并使用动脉周围已经到位的 4-O 丝缝合线将动脉系开。然后用 4-O 多二松酮或 3-O 多糖蛋白 910 缝合线以连续缝合图案在锥形针上关闭肌肉和下切层，并使用 4-O 多二酮或 4-O 多糖蛋白 910 缝合线在埋藏的连续下部缝合图案的反向切割针上关闭皮肤。在非糖尿病动物中，即使胆固醇较高，与糖尿病动物相比，在最后时间点，缺血肢体和血管的血压恢复率也有所提高。

从组织学上来说，与水肿和缺血损伤一致的肌肉结构的变化被观察到肌肉纤维的丧失或破坏。此外，PECAM一和α平滑肌肉行为素的免疫保持可用于识别组织部分血管的数量和大小。其他成像方法，如多普勒超声波，激光多普勒成像，红外热成像和MRI可以添加进一步监测缺血肢体再灌注。

结合这种治疗耐药性，我们的模型更准确地模拟疾病状态的缺血，推进了周围动脉疾病新疗法的评估。