Identification of Rare Antigen-Specific T Cells from Mouse Lungs with Peptide:Major Histocompatibility Complex Tetramers

Daniel S. Shin; Juliana Barreto de Albuquerque; James J. Moon

doi:10.3791/66939

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免疫与感染

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用肽：主要组织相容性复合物四聚体鉴定小鼠肺中的稀有抗原特异性 T 细胞

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免疫与感染

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JoVE 杂志免疫与感染

Identification of Rare Antigen-Specific T Cells from Mouse Lungs with Peptide:Major Histocompatibility Complex Tetramers

用肽：主要组织相容性复合物四聚体鉴定小鼠肺中的稀有抗原特异性 T 细胞

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02:10 min

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July 19, 2024

DOI:

10.3791/66939-v

DOI:

10.3791/66939-v

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02:10 min

July 19, 2024

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Daniel S. Shin^1,2,3, Juliana Barreto de Albuquerque^1,3, James J. Moon^1,3,4

¹Center for Immunology and Inflammatory Diseases, Division of Rheumatology, Allergy, and Immunology,Massachusetts General Hospital, ²Division of Immunology,Boston Children’s Hospital, ³Harvard Medical School, ⁴Division of Pulmonary and Critical Care Medicine,Massachusetts General Hospital

成績單

我们的实验室研究 CD4 T 细胞在耐受性和免疫力的不同背景下的发育。在我们的项目中，我们主要感兴趣的是抗原暴露如何驱动 T 细胞表型亚群的发育，这些亚群建立免疫记忆，可以增强对自身的耐受性或对病原体的免疫力。最近，我们专注于驻留在肺组织中的调节和记忆 T 细胞亚群的开发。

这些组织驻留的 T 细胞在组织损伤期间增强对自身抗原的耐受性或在再感染期间促进对病原体的炎症反应方面发挥着重要作用。我们的实验室专门从事抗原特异性 T 细胞的直接研究，但定制肽 MHC 四聚体试剂。这使我们能够研究这些 T 细胞，而无需使用 TCR 转基因模型或其他已知会导致实验伪影的实验操作。

虽然我们可以很容易地用四聚体识别抗原特异性 T 细胞，但这些 T 细胞通常以非常低的频率存在，尤其是当它们处于幼稚或记忆状态时。从免疫反应后它们通常所在的非淋巴组织中分离这些 T 细胞也具有挑战性。虽然有几种既定的方案用于从小鼠肺中分离 T 细胞，但我们在此处介绍的方案已针对随后通过四聚体染色检测低频抗原特异性 T 细胞进行了优化。

在该协议中，我们还包括两个组织关联的选项，以更好地容纳文库资源。我们的方案将帮助研究人员将四聚体的使用扩展到肺组织中的抗原特异性 T 细胞。这将导致对组织驻留记忆 T 细胞发育和功能的更有力的体内研究，这是该领域非常感兴趣的话题。