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使用基于高通量和定量发光的报告基因分析评估 DNA 双链断裂修复活性
JoVE 杂志
癌症研究
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JoVE 杂志 癌症研究
Assessment of DNA Double Strand Break Repair Activity Using High-throughput and Quantitative Luminescence-Based Reporter Assays

使用基于高通量和定量发光的报告基因分析评估 DNA 双链断裂修复活性

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01:41 min

June 14, 2024

DOI:

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June 14, 2024

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成績單

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Artios 正在开发针对 DNA 损伤反应的新型抗癌药物。为了实现这一点,我们开发了一系列新的检测方法来测量细胞 DNA 修复活性。这些检测对我们的项目产生了重大影响,导致临床阶段的资产在医疗需求高度未满足的患者中进行测试。

准确测量靶向细胞活性对于推进新型靶向治疗至关重要。无论是需要高通量、稳定的信噪比、快速周转,还是理想情况下需要到不同生物系统的便携性,生成具有所需特性的 DNA 修复因子分析一直是一项挑战。我们开发了一套稳健、定量和可滴定的基于发光的报告基因分析,用于测量四种主要双链断裂修复途径、同源重组、非同源末端连接、微同源介导的末端连接和单链退火的熟练程度。

这些报告基因检测经验证为读出通路依赖性修复,对药理学调节敏感,并且周转时间短。我们开发的修复底物是染色体外的,因此它们可以瞬时转染到目标模型中,并轻松放大到高通量形式中。我们相信我们的检测系统在实现 DDR 药物发现方面发挥着重要作用,而且在更广泛地促进我们对 DDR 生物学的理解方面也发挥着重要作用。

在这方面,我们希望这些方法有助于加速新药物靶点的识别和起诉,从而为医疗需求未得到满足的癌症等疾病提供药物。

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