JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:40 Min. • August 29th, 2025
Beginnen Sie mit dem Ischiasnerv, der von einer Maus isoliert wurde.
Die Neuronen innerhalb des Nervs wurden transfiziert, um fluoreszierende zytoplasmatische Proteine zu exprimieren.
Der Nerv wurde gequetscht, um eine Verletzung herbeizuführen, die mit einer Naht markiert wurde.
Die verletzten Axonsegmente an der Stelle degenerieren und rekrutierte Makrophagen beseitigen die Trümmer.
Schwann-Zellen vermehren sich, um Leitbahnen zu bilden und neurotrophe Faktoren zu sezernieren, die das Nachwachsen von Axonen fördern. Die Axone erstrecken sich entlang dieser Bahnen und regenerieren den Nerv.
Fixieren Sie den Nerv, um die Zellstrukturen zu erhalten, und entfernen Sie dann alle anhaftenden nicht-neuronalen Gewebe.
Mit einem Puffer waschen, um Reste von Fixiermitteln zu entfernen.
Positionieren Sie den Nerv auf einem Objektträger, tragen Sie ein Eindeckmedium auf und platzieren Sie ein Deckglas.
Glätten Sie den Nerv, um die Axone für die Bildgebung in derselben Brennebene zu positionieren.
Verfolgen Sie mit einem Epifluoreszenzmikroskop die Axone von der Quetschstelle bis zu ihren distalen Enden, um
die Regenerationslänge zu messen.
Trennen Sie die DRGs zusammen mit den Nervenwurzeln und dem Isc
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