JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:52 Min. • March 31st, 2026
Beginnen Sie mit einem versiegelten Objektträger, der Bakterienzellen enthält, die mit einem zytoplasmatischen roten fluoreszierenden Marker und einem proteinspezifischen grünen fluoreszierenden Marker beschriftet sind.
Beobachten Sie den Objektträger unter einem Fluoreszenzmikroskop.
Finden Sie ein Feld mit gut isolierten Bakterienzellen und konzentrieren Sie sich auf das Zentrum einer repräsentativen Zelle.
Stellen Sie den ersten Fluoreszenzkanal ein und erhalten Sie ein Z-Stack-Bild bei bestimmten Parametern, um die dreidimensionale Form der repräsentativen Zelle und ihrer benachbarten Zellen zu erfassen.
Dann wechselt man zum zweiten Fluoreszenzkanal und erhält ein weiteres Z-Stack-Bild derselben Zellen mit denselben Parametern.
Es erfasst die Verteilung bakterieller Proteine innerhalb der Zellen.
Schneiden Sie einzelne Zellen aus jedem Z-Stack ab, um sie für die Einzelzellanalyse zu isolieren.
Richten Sie diese Bilder so aus, dass sie die Verteilung bakterieller Proteine relativ zur Zellform visualisieren, was eine präzise Analyse während der Wirts-Pathogen-Interaktionen ermöglicht.
Unmittelbar nach dem Abdichten des Deckels wird der Verschluss auf eine Mikroskopbühne gelegt und nach
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