Quantifizierung von Entzündungsmediatoren in infizierten menschlichen Gewebezellen

Während einer Infektion setzen aktivierte Lymphozyten Entzündungsmediatoren – Zytokine – frei, um eine Immunantwort auszulösen.

Um Entzündungsmediatoren in einem infizierten Gewebe zu quantifizieren, beginnen Sie mit einer Zellsuspension, die Immunzellen aus menschlichem Lungengewebe enthält.

Inkubieren Sie die Zellen mit Haemophilus influenzae – einem pathogenen Bakterium der Atemwege. Die Oberflächenantigene der Bakterien interagieren mit Mustererkennungsrezeptoren auf phagozytischen Immunzellen. Dies initiiert die Internalisierung des Bakteriums, die Verarbeitung zu kleineren Peptiden und die Präsentation des Peptids durch das Hauptmolekül des Histokompatibilitätskomplexes.

Das Antigen-MHC-II-Molekül auf phagozytären Zellen bindet über die T-Zell-Rezeptoren an T-Lymphozyten, zusammen mit co-stimulatorischen Rezeptorinteraktionen, was zu einer Aktivierung der T-Lymphozyten und der Produktion von entzündungsfördernden Zytokinen führt.

Behandeln Sie die Zellen mit Golgi-Blockern, die die Freisetzung von Zytokinen beeinträchtigen und deren Ansammlung in den Zellen verursachen. Waschen Sie die Zellen mit einem Blockierungspuffer, um unspezifische Bindungsstellen zu blockieren.

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