Ein Laminar-Flow-basierter Assay zur Untersuchung der Wechselwirkungen zwischen Leukozyten und Endothelzellen

Beginnen Sie damit, einen Objektträger mit einer adhärenten, zytokinstimulierten endothelialen Monoschicht in eine Durchflusskammer zu platzieren.

Diese Endothelzellen exprimieren Oberflächenadhäsionsmoleküle wie Selektine und endothelgebundene Migrationssignale wie Chemokine.

Führen Sie fluoreszenzmarkierte Leukozyten in die Durchflusskammer ein.

Wenn Leukozyten über die endotheliale Monoschicht fließen, binden sie sich an aktivierte Endothelzellen.

Selektine auf Endothelzellen binden an ihre entsprechenden Liganden auf den Leukozyten.

Die Selectin-Liganden-Wechselwirkungen sind schwach und vorübergehend, so dass Leukozyten unter der Kraft eines strömenden Mediums entlang der endothelialen Monoschicht rollen können.

Das Rollen ermöglicht es Leukozyten, mit Chemokinen zu interagieren, Integrine zu aktivieren und einen festen Leukozytenarrest zu fördern.

Anschließend breiten sich die Leukozyten über die endotheliale Monoschicht aus, was auf ihr Potenzial für die Transmigration hinweist, ein entscheidender Schritt in der Immunantwort.

Dieser Assay hilft dabei, den Mechanismus der Adhäsion, Deadhäsion und Transmigration von Leukozyten zu untersuchen, während sie über Endothelzellen pe