Visualisierung eines Aderhautplexus des Mausgehirns mittels Rasterelektronenmikroskopie

Nehmen Sie den Plexus choroideus aus einem Mäusegehirn in einem Probenkorb.

Das Gewebe, das sich in den Hirnventrikeln befindet, enthält eine Schicht von Epithelzellen mit Mikrovilli auf ihrer apikalen Oberfläche.

Inkubieren Sie das Gewebe in einer Fixierlösung, um seine Zellarchitektur zu erhalten.

Mit einem Puffer waschen, um überschüssiges Fixiermittel zu entfernen und den pH-Wert zu stabilisieren.

Inkubieren Sie das Gewebe mit Osmiumtetroxid, das an die Lipide der Zellmembran bindet und die Membranstabilität bewahrt, und spülen Sie dann überschüssiges Reagenz ab.

Dehydrieren Sie das Gewebe mit steigenden Alkoholkonzentrationen, um eine Gewebeverzerrung während der Bildgebung zu vermeiden.

Trocknen Sie das Gewebe, befestigen Sie es auf einer kohlenstoffbeschichteten Probenhalterung und beschichten Sie es dann mit einer leitfähigen Platinschicht.

Mit Hilfe der Rasterelektronenmikroskopie wird ein Elektronenstrahl auf die Oberfläche fokussiert. Die Platinschicht leitet Elektronen ab, verhindert den Ladungsaufbau und minimiert Bildartefakte.

Ein Detektor fängt die von der Oberfläche zurückgestreuten Elektronen ein und erzeugt ein Bild des Gewebes, das Epithelzellen mit Mikrovilli aufweist.