High-Throughput-Kristallisation von Membranproteinen mit dem Lipidische Bicellen Methode

Dieses Video zeigt eine Methode zum Aufbau von Hochdurchsatz-Kristallisationsversuchen von gereinigten Membranproteinen unter Verwendung von Lipic B-Zellen. Zuerst werden B-Zellen durch Mischen eines Lipids und eines Detergens hergestellt, gereinigtes Membranprotein wird in die B-Zellmischung eingebaut und Kristallisationsversuche werden mit einer visuellen Inspektion eines Nanoliter-Roboters durchgeführt. Die Verwendung eines Standard-Lichtmikroskops zeigt das Vorhandensein von Kristallen.

Einmal gebildet, können die Proteinkristalle extrahiert und eingefroren werden, um Daten zu sammeln und strukturiert zu bestimmen. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass aufgrund des einzigartigen Phasenverhaltens von B-Zellen die im Labor verfügbaren Standardgeräte und Robotik für die Kristallisation verwendet werden können. Das Einrichten von B-Zellen ist eine so einfache Technik, die es Ihnen ermöglicht, Ihr Zielmembranprotein aus dem Detergens meiner Zelle zu nehmen und es in ein liptisches Medium zu legen.