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DOI: 10.3791/4171-v
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Dopamin wird deutlich im Mittelhirn Kerne, die den Zellkörper und Dendriten der Dopamin-Neuronen enthalten geregelt. Hier beschreiben wir eine Dissektion und Probe-Handling-Ansatz, um Ergebnisse zu maximieren, und damit Schlussfolgerungen und Erkenntnisse, auf die Dopamin-Regulierung im Mittelhirn Kerne der Substantia nigra (SN) und ventralen Tegmentum (VTA) bei Nagern.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die Information der molekularen Messwerte, die mit der Regulation von Dopamin verbunden sind, aus einer einzigen Gewebedissektion aus den somato dendritischen Regionen des Mittelhirnregens zu maximieren. Dies wird erreicht, indem zunächst eine präzise Dissektion vorgenommen wird, um die substanzielle Nigra vom ventralen Segmentbereich zu trennen. Der zweite Schritt besteht darin, die Gewebe für die Dopaminanalyse mittels HPLC zu verarbeiten und das gefällte endogene Protein für die Analyse weiterzuverarbeiten.
Als nächstes ermöglicht die Verarbeitung des gefällten Proteins für den Gesamtproteingehalt die Bestimmung, welche Dopamin-regulierenden Proteine oder Proteinphosphorylierung in Verbindung mit dem Auslesen des Dopamingewebegehalts in der Probe gemessen werden können. Letztlich geht es um die Analysen von Dopamin und seinen regulierenden Proteinen im diskreten Mittelhirn. Somato-dendritische Regionen lassen Rückschlüsse auf die molekularen Mechanismen der Dopaminregulation zu.
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