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Hochauflösende Quantitative Immungold-Analyse von Membranrezeptoren auf der Netzhaut Ribbon Synapsen
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JoVE Journal Neuroscience
High-Resolution Quantitative Immunogold Analysis of Membrane Receptors at Retinal Ribbon Synapses

Hochauflösende Quantitative Immungold-Analyse von Membranrezeptoren auf der Netzhaut Ribbon Synapsen

Full Text
7,875 Views
09:24 min
February 18, 2016

DOI: 10.3791/53547-v

Jun Zhang1, Ronald S. Petralia2, Ya-Xian Wang2, Jeffrey S. Diamond1

1Synaptic Physiology Section, National Institute of Neurological Disorders and Stroke,National Institutes of Health, 2Advanced Imaging Core, National Institute on Deafness and Other Communication Disorders,National Institutes of Health

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Die Postembedding-Immunogold-Methode ist eine der effektivsten Methoden, um hochauflösende Analysen der subzellulären Lokalisation spezifischer Moleküle zu liefern. Hier beschreiben wir ein Protokoll zur quantitativen Analyse von Glutamatrezeptoren an retinalen Bandsynapsen.

Das übergeordnete Ziel dieses Experiments ist es, einen neuen Ansatz zu entwickeln, um Membranproteine an retinalen Bandsynapsen quantitativ zu analysieren. Diese Methode kann dazu beitragen, Schlüsselfragen im Bereich der retinalen Neurobiologie zu beantworten, wie z. B. die genaue Position von Proteinen an Synapsen innerhalb des Schaltkreises. Der Hauptvorteil der Technik besteht darin, dass sie die Anzahl, Dichte und Geschwindigkeit mehrerer Proteine an retinalen Bandsynapsen abschätzen kann.

Zur Demonstration des Verfahrens der Gefriersubstitution und des ultradünnen Schnitts haben wir die Ärzte Ron Petralia und Ya-Xian Wang vom NIDCD Advanced Imaging Core. Um diesen Vorgang zu beginnen, sezieren Sie einen Augapfel unter dem Mikroskop. Entfernen Sie dazu zunächst die Hornhaut.

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