Effiziente neuronale Differenzierung mit einzelzellischer Kultur menschlicher embryonaler Stammzellen

Menschliche embryonale Stammzellen können induziert werden, um sich in neuronale Vorläuferzellen und anschließend in Neuronenastrozyten und Oligodendrozyten zu differenzieren. Die Typkulturmethode für menschliche embryonale Stammzellen und ihre Differenzierung in neuronale Vorläuferzellen sind jedoch sehr ineffizient und offen in vivo Kokultursystem Hier präsentieren wir ein verbessertes und robustes Kultursystem, das mit einer hochdichten Einzelzellkultur mit menschlichen embryonalen Stammzellen leicht skalierbar ist. Die Einzelzelltypkultur menschlicher embryonaler Stammzellen bietet ein schnelles und effizientes System zur Untersuchung der molekularen Mechanismen, die die mehrstufige Differenzierung entlang verschiedener und unterschiedlicher differenzierter Linien regulieren, einschließlich neuronaler Vorläuferzellen und ihrer anschließenden Differenzierung in zusätzliche neuronale Linien.

Beginnen Sie mit der Vorbereitung menschlicher embryonaler Stammzellen qualifizierter Kellermembranmatrix-Beschichtete Platten. Die Kellermembranmatrixlösung bei vier Grad Celsius mindestens zwei bis drei Stunden oder über Nacht langsam auftauen. Beim Auftauen die Matrix in kaltem DMEM/F-12 bis 2% gut mischen und jeden Brunnen einer Sechs-Well-Platte mit einem Milliliter der verdünnten Lösung beschichten.