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DOI: 10.3791/65530-v
Ines Cherkaoui1, Qian Du2, Dieter Egli2, Shivani Misra1,3, Guy A. Rutter1,4,5
1Department of Metabolism, Digestion and Reproduction, Faculty of Medicine,Cell Biology and Functional Genomics, 2Departments of Pediatrics, Naomi Berrie Diabetes Center, Obstetrics and Gynecology, Columbia Stem Cell Initiative, Columbia University Irving Medical Center,Columbia University, 3Department of Diabetes,Imperial College Healthcare NHS Trust, 4Faculté de Médicine,Université de Montréal, 5Lee Kong Chian Imperial Medical School,Nanyang Technological University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a protocol for the directed differentiation of human pluripotent stem cells into insulin-producing beta-cell like cells. It emphasizes the importance of optimal culture conditions and clearly defined stages in achieving functional beta cells that can secrete insulin in response to glucose.
Dieser Artikel stellt ein Protokoll für die gerichtete Differenzierung und funktionelle Analyse von β-zellähnlichen Zellen vor. Wir beschreiben optimale Kulturbedingungen und Passagen für humane pluripotente Stammzellen, bevor insulinproduzierende Pankreaszellen erzeugt werden. Die sechsstufige Differenzierung schreitet von der endgültigen Endodermbildung bis hin zu funktionellen β-Zell-ähnlichen Zellen fort, die Insulin als Reaktion auf Glukose absondern.
Eine hohe und konsistente Effizienz im Differenzierungsprozess für die Umwandlung pluripotenter Stammzellen in menschliche Betazellen zu erreichen, ist eine bemerkenswerte Herausforderung. Diese Herausforderung wird durch die Präzision und die Konsistenz beeinflusst, mit der der Experimentator das Protokoll befolgt. Darüber hinaus ist die Menge der in jedem Experiment erhaltenen Betazellen sehr unterschiedlich, was zu einer verringerten Funktion der Betazellen über mehrere Experimente hinweg führen kann.
Im Zusammenhang mit der Forschung an Betazellen mit hohem Leptingehalt bei Diabetes ist die Verfügbarkeit von Leichenösenspendern recht begrenzt. Folglich bietet die Verwendung von stammzelldifferenzierten Betazellen ein unbegrenztes und reichliches Angebot an insulinsekretierenden Zellen. Die Differenzierung von Betazellen ist ein entscheidender Fortschritt in unserem Bereich und bietet zahlreiche Vorteile.
Es ermöglicht uns, die Entwicklung und Funktion von Betazellen zu erforschen, was zu einem tieferen Verständnis der Ursachen von Diabetes und Betazellfunktionsstörungen führt. Wir wollen diese Technik für unsere Forschung nutzen, die sich auf die Genetik von Diabetes konzentriert. Unser primäres Ziel ist es, uns auf die Mutation bestimmter Gene zu konzentrieren, die Betazellen und die Funktion der Ösen beeinflussen können.
Dieses Protokoll wird also den Zugang zu menschlichen Ösen erleichtern, die aus präpotenten Stammzellen mit Mutationen von Interesse stammen.
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