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Dual-modale molekulare Kartographie: Integration der Multiplex-mRNA-Detektion mit der Protein-Ima...
Dual-modale molekulare Kartographie: Integration der Multiplex-mRNA-Detektion mit der Protein-Ima...
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Cancer Research
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JoVE Journal Cancer Research
Dual-modality Molecular Cartography: Integrating Multiplex mRNA Detection with Protein Imaging Mass Cytometry

Dual-modale molekulare Kartographie: Integration der Multiplex-mRNA-Detektion mit der Protein-Imaging-Massenzytometrie

Full Text
410 Views
06:51 min
November 14, 2025

DOI: 10.3791/68616-v

Sammy Ferri-Borgogno1, Danielle L. Stolley2, Basant T. Gamal1, Christopher D. Pacheco2, Ivo Veletic3, Akshay Basi3, Duncan H. Mak2, Madeline K. McAllister2, Angeliquie J. Lin2, Javier A. Gomez3, Anna K. Casasent2, Jared K. Burks2

1Department of Gynecologic Oncology and Reproductive Medicine,The University of Texas MD Anderson Cancer Center, 2Department of Hematopoietic Biology & Malignancies,The University of Texas MD Anderson Cancer Center, 3Department of Leukemia,The University of Texas MD Anderson Cancer Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Dieses Protokoll beschreibt eine Methodik für den Multiplex-mRNA-Nachweis mit Protein-Imaging-Massenzytometrie in formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitten.

Wir konzentrieren uns auf die Spezialbiologie, um die molekularen Mechanismen von Eierstockkrebs besser zu verstehen, in der Hoffnung, neue therapeutische Ziele und Biomarker zur Vorhersage des Überlebens von Patienten zu finden. Eine der aktuellen IMC-Herausforderungen umfasst die Dissektion von Proteinen mit geringerer Häufigkeit, die Arbeit der Antikörpervalidierung und -titration sowie die komplexe und zeitaufwändige Pixelklassifikation während der Analyse. Beginnen Sie damit, überschüssige Flüssigkeit aus den vorbereiteten FFPE-Objektträgern zu entfernen.

Nimm das Feuchtigkeitskontrollblech aus dem Ofen und setze den Schlittenhalter in das Blech. Dann wirbelt man RNA-ISH-Verstärker 3 gründlich und fügt genug Reagenz hinzu, um jeden Gewebeschnitt auf den Objektträgern vollständig zu bedecken. Schließe das Blech und setze es für 30 Minuten bei 40 Grad Celsius in den Hybridisierungsofen.

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