Name: Thrombusprofiling-Assay: Eine auf Mikrofluidik basierende Plattform zur umfassenden Charakterisierung biomechanischer Thrombogenese (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-09T12:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 50 s
Description: Lernen Sie einen mikrofluidischen Thrombusprofiling-Assay zur Charakterisierung biomechanischer Thrombogenese unter arteriellen Scherbedingungen. Diese Methode ermöglicht die Bewertung prothrombotischer Tendenzen und die Testung antithrombotischer Wirkstoffe.

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<ol><li>Lindstrom, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+burden+of+cardiovascular+diseases+and+risks+collaboration%2C+1990-2021%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Global burden of cardiovascular diseases and risks collaboration, 1990-2021.</a> J Am Coll Cardiol. 80 (25), 2372-2425 (2022).</li>
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<li>Gorog, D. A., Becker, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Point-of-care+platelet+function+tests%3A+Relevance+to+arterial+thrombosis+and+opportunities+for+improvement%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Thrombolysis%22%5BJournal%5D)">Point-of-care platelet function tests: Relevance to arterial thrombosis and opportunities for improvement.</a> J Thromb Thrombolysis. 51 (1), 1-11 (2021).</li>
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<li>Nesbitt, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+shear+gradient-dependent+platelet+aggregation+mechanism+drives+thrombus+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">A shear gradient-dependent platelet aggregation mechanism drives thrombus formation.</a> Nature Medicine. 15 (6), 665-673 (2009).</li>
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<li>Li, M., Hotaling, N. A., Ku, D. N., Forest, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+thrombosis+under+multiple+shear+rates+and+antiplatelet+therapy+doses%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Microfluidic thrombosis under multiple shear rates and antiplatelet therapy doses.</a> PLoS One. 9 (1), e82493(2014).</li>
<li>Colace, T. V., Diamond, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+observation+of+von+Willebrand+factor+elongation+and+fiber+formation+on+collagen+during+acute+whole+blood+exposure+to+pathological+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Direct observation of von Willebrand factor elongation and fiber formation on collagen during acute whole blood exposure to pathological flow.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (1), 105-113 (2013).</li>
<li>Westein, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerotic+geometries+exacerbate+pathological+thrombus+formation+poststenosis+in+a+von+Willebrand+factor-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Atherosclerotic geometries exacerbate pathological thrombus formation poststenosis in a von Willebrand factor-dependent manner.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 110 (4), 1357-1362 (2013).</li>
<li>Brazilek, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+a+strain+rate+gradient+microfluidic+device+to+von+Willebrand%27s+disease+screening%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Application of a strain rate gradient microfluidic device to von Willebrand's disease screening.</a> Lab Chip. 17 (15), 2595-2608 (2017).</li>
<li>Tovar-Lopez, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microfluidics+device+to+monitor+platelet+aggregation+dynamics+in+response+to+strain+rate+micro-gradients+in+flowing+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">A microfluidics device to monitor platelet aggregation dynamics in response to strain rate micro-gradients in flowing blood.</a> Lab Chip. 10 (3), 291-302 (2010).</li>
<li>Kim, D. A., Ku, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+shear-induced+platelet+aggregated+clot+formed+in+an+in+vitro+arterial+thrombosis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Adv%22%5BJournal%5D)">Structure of shear-induced platelet aggregated clot formed in an in vitro arterial thrombosis model.</a> Blood Adv. 6 (9), 2872-2883 (2022).</li>
<li>Receveur, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shear+rate+gradients+promote+a+bi-phasic+thrombus+formation+on+weak+adhesive+proteins%2C+such+as+fibrinogen%2C+in+a+vwf-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Shear rate gradients promote a bi-phasic thrombus formation on weak adhesive proteins, such as fibrinogen, in a vwf-dependent manner.</a> Haematologica. 105 (10), 2471-2483 (2020).</li>
<li>Din, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-parametric+thrombus+profiling+microfluidics+detects+intensified+biomechanical+thrombogenesis+associated+with+hypertension+and+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Multi-parametric thrombus profiling microfluidics detects intensified biomechanical thrombogenesis associated with hypertension and aging.</a> Nat Commun. 15, 9067(2024).</li>
<li>Stein, P. D., Sabbah, H. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measured+turbulence+and+its+effect+on+thrombus+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Measured turbulence and its effect on thrombus formation.</a> Circ Res. 35 (4), 608-614 (1974).</li>
<li>Mahalingam, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Numerical+analysis+of+the+effect+of+turbulence+transition+on+the+hemodynamic+parameters+in+human+coronary+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Diagn+Ther%22%5BJournal%5D)">Numerical analysis of the effect of turbulence transition on the hemodynamic parameters in human coronary arteries.</a> Cardiovasc Diagn Ther. 6 (3), 208-220 (2016).</li>
<li>Thomson, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gigapixel+imaging+with+a+novel+multi-camera+array+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Gigapixel imaging with a novel multi-camera array microscope.</a> Elife. 11, e74988(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10-mL-Spritzen</td><td>Henke Sass Wolf</td><td>5100-X00V0</td><td>Blutprobenentnahme</td></tr><tr><td>15-mL Falkenrohre</td><td>Genesee Scientific</td><td>28-101</td><td>Lagerung von Blutproben</td></tr><tr><td>1-mL gasdichte Glasspritze</td><td>Hamilton</td><td>81331</td><td>Hardware-Montage</td></tr><tr><td>2.2.9</td><td>MERU VasImmune</td><td></td><td>Thrombusverfärbung</td></tr><tr><td>20 x1/2 Sondennadeln</td><td>McMaster-Carr</td><td>M919</td><td>Herstellung von PDMS-Geräten</td></tr><tr><td>20-mL-Spritzen</td><td>Henke Sass Wolf</td><td>5200-X00V0</td><td>Blutprobenentnahme</td></tr><tr><td>70 % Ethanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>EX0281-1</td><td>Desinfektion gasdichter Spritzen und Reinigung von Glasträgern</td></tr><tr><td>AK4-Alexa Fluor 647</td><td>BioLegend</td><td>304918</td><td>Thrombusverfärbung</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 405 NHS Ester</td><td>Invitrogen</td><td>A30000</td><td>Fibrinogen-Markierung</td></tr><tr><td>Alexa fluor 555 Antikörper-Kennzeichnungsset</td><td>Invitrogen</td><td>A88065</td><td>MBC 370.2 und 2.2.9 Kennzeichnung</td></tr><tr><td>Annexin V-Pacific Blue</td><td>Invitrogen</td><td>501121505</td><td>Thrombusverfärbung</td></tr><tr><td>Reinigungsstaubwegem</td><td>Bürodepot</td><td>911245</td><td>Herstellung von PDMS-Geräten</td></tr><tr><td>Bastelmesser-Set mit Holzkiste</td><td>Excel Blades</td><td>44282</td><td>Herstellung von PDMS-Geräten</td></tr><tr><td>Deionisiertes Wasser&nbsp;</td><td>ThermoFisher Scientific&nbsp;</td><td>751-628</td><td>Waschen gasdichter Spritzen</td></tr><tr><td>Desiccator</td><td>Bel Art</td><td>F420270000</td><td>Entgasung von PDMS</td></tr><tr><td>Einweg-Mehrzweck-Labor-Spatel</td><td>LevGo</td><td>17211</td><td>Mischung der Silikon-Elastomerbasis und des Aushärtungsmittels&nbsp;</td></tr><tr><td>Farbstoff- und Biotinentfernungs-Spin-Säule</td><td>Zeba</td><td>A44296S</td><td>Fibrinogen-Markierung</td></tr><tr><td>Fibrinogen</td><td>Innovative Forschung</td><td>IHUFBG25MG</td><td>Thrombusverfärbung</td></tr><tr><td>Fusion 200-X Spritzenpumpe</td><td>Chemyx Inc.</td><td>0720X</td><td>Hardware-Montage</td></tr><tr><td>Heparin&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3149</td><td>Blutprobe-Antikoagulation</td></tr><tr><td>Hochfrequenzgenerator</td><td>Electro-technic product Inc.</td><td>BD-20</td><td>Herstellung von PDMS-Geräten</td></tr><tr><td>Menschliches VWF-Monomer</td><td>Sino Biological Inc.</td><td>10973-H08C</td><td>Mikrofuidische Bauteilbeschichtung</td></tr><tr><td>Image J v1.53 Software</td><td>Fidschi, Nationales Gesundheitsinstitut</td><td></td><td>Datenanalyse</td></tr><tr><td>Invertiertes Mikroskop</td><td>Leica</td><td>DM IL LEITETE; Filterwürfel: Leica DFT51010; Leuchtturm: LED5</td><td>Hardware-Montage</td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimberly – Clark Profi</td><td>34120</td><td>Reinigung von Glasrutschen</td></tr><tr><td>Luer-Schlosskappen</td><td>International Medical Industries, Inc.</td><td>57100B</td><td>Blutprobenentnahme</td></tr><tr><td>MBC 370.2</td><td>Kerafast</td><td>EBW104</td><td>Thrombusverfärbung</td></tr><tr><td>Mikroskopabdeckungsgläser</td><td>Paul Marienfeld GmbH & Kompanie KG</td><td>ES0107222</td><td>Herstellung von PDMS-Geräten</td></tr><tr><td>Mini-Rasierklingen-Schaber</td><td>Stanley</td><td>28-100</td><td>Herstellung von PDMS-Geräten</td></tr><tr><td>NanoDrop 2000 UV-Vis-Spektrophotometer</td><td>Thermowissenschaftlich</td><td>ND-2000</td><td>Proteinkonzentration und F/P-Verhältnis Messen</td></tr><tr><td>Ofen</td><td>Lab-Line Instrumente</td><td>3512</td><td>Herstellung von PDMS-Geräten</td></tr><tr><td>PAC-1-Alexa Fluor 647</td><td>BioLegend</td><td>362806</td><td>Thrombusverfärbung</td></tr><tr><td>Plastikbecher</td><td>ThermoFisher Scientific&nbsp;</td><td>S04589</td><td>Mischung der Silikon-Elastomerbasis und des Aushärtungsmittels&nbsp;</td></tr><tr><td>SU-8 Photoresist-Master&nbsp; Schimmel</td><td>UC San Diego Nano3 Nanofabrikation Reinraum-Einrichtung</td><td></td><td>Herstellung von PDMS-Geräten</td></tr><tr><td>Sylgard 184 Silikon-Elastomer-Kit</td><td>Krayden Dow</td><td>DC4019862</td><td>PDMS</td></tr><tr><td>SZ22-FITC&nbsp;</td><td>Beckman Coulter</td><td>IM 1756U</td><td>Thrombusverfärbung</td></tr><tr><td>Röhren</td><td>Cole-Palmer Instrument Co.</td><td>06422-01</td><td>Hardware-Montage</td></tr></tbody></table>

thrombusprofiling-assay: eine auf mikrofluidik basierende plattform zur umfassenden charakterisierung biomechanischer thrombogenese

Thrombus Profiling Assay: A Microfluidics-Based Platform for Comprehensively Characterizing Biomechanical Thrombogenesis

Thrombusprofiling-Assay: Eine auf Mikrofluidik basierende Plattform zur umfassenden Charakterisierung biomechanischer Thrombogenese

Thrombosis is a pathological condition describing the abnormal accumulation of platelets and clotting factors in a blood vessel. While many works focused ...

thrombus-profiling-assay-microfluidics-based-platform-for

Research

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Diese Studie beschreibt eine neue Mikrotiterplatte Assay, FV Gerinnungsaktivität misst während Fibrin Gerinnselbildung in Humanplasma, die zuvor noch nicht gemeldet. Das Verfahren verwendet eine kinetische Mikroplattenleser das kontinuierliche Messen der Änderung der Absorption bei 405 nm während Fibrin Gerinnselbildung in humanem Plasma.

Messung der Faktor V-Aktivität in humanem Plasma unter Verwendung eines Mikroplatten Koagulationsanalyse

Die Thrombozytentransfusion und Hämostase wurde unter Verwendung von Blutrekonstitution und mikrofluidischen Flusskammern modelliert, um die Funktion von Blutbankplättchen zu untersuchen. Die Daten zeigen die Auswirkungen einer Thrombozytenspeicherung auf die Blutstillung in vitro.

Mikrofluidik-Strömungskammern Mit Rekonstituierte Blut Hämostaseologie und Transfusions Platelet zu Modell<em&gt; In Vitro</em

Dieses Dokument beschreibt ein experimentelles Modell der Hämostase, die Thrombozytenfunktion und Koagulation gleichzeitig misst. Blutplättchen- und Fibrin- Fluoreszenz wird in Echtzeit gemessen und die Plättchenadhäsion Rate, Gerinnungsrate und Einsetzen der Gerinnung bestimmt. Das Modell wird verwendet, um die Thrombozyten Prokoagulanz-Eigenschaften unter Strömung in Konzentraten für Transfusions bestimmen.

Ein Mikrofluidik-Flow-Kammer-Modell für Platelet Transfusions und Hämostase Maßnahmen Platelet Deposition und Fibrinbildung in Echtzeit

Wir präsentieren ein In-vitro-Modell für Gefäßerkrankungen, um Vollblut-Wechselwirkungen mit patientenabgeleitetem Endothel zu untersuchen. Dieses System ermöglicht die Untersuchung der thrombogenen Eigenschaften der primären Endothelzellen unter verschiedenen Umständen. Das Verfahren eignet sich besonders zur Beurteilung der Thrombogenität und Antikoagulationstherapie in verschiedenen Phasen der Gerinnung.

In Vitro Mikrofluidic Disease Model zur Untersuchung von Blut-Endothel-Wechselwirkungen und Blutgerinnsungsdynamik in Echtzeit

Fibrin ist verantwortlich für die Gerinnselbildung während der Hämostase und Thrombose. Trübungsassays und Thromboelastograhy (TEG) können als synergistische Werkzeuge eingesetzt werden, die eine komplementäre Bewertung eines Gerinnsels ermöglichen. Diese beiden Techniken zusammen können mehr Einblick in die Art und Weise geben, wie Gerinnungsbedingungen die Bildung von Fibringer beeinflussen.

Nutzung von Trübung und Thromboelastographie zur komplementären Clot-Charakterisierung

In-vitro-Thrombolyse-Assays haben oft Schwierigkeiten, In-vivo-Bedingungen zu replizieren, sei es im Modellthrombus, der verdaut wird, oder in der Umgebung, in der die Thrombolyse stattfindet. Im Folgenden untersuchen wir, wie die Kopplung des Chandler-Loops und des Real-Time Fluorometric Flowing Fibrinolysis Assay (RT-FluFF) für eine hochgenaue Ex-vivo-Überwachung der Gerinnsellyse verwendet wird.

Verfolgung der Fibrinolyse von Chandler-Schleifen-gebildeten Vollblutgerinnseln unter Scherströmung in einem In-vitro-Thrombolysemodell

Die Thrombozytenfunktion unter Fluss kann beurteilt und eine simulierte hämostatische Wiederbelebung mit einem mikrofluidischen Gerät modelliert werden, das in der Trauma- und Transfusionsmedizin Anwendung findet.

Mikrofluidik zur Beurteilung der Thrombozytenfunktion

Dieses Protokoll beschreibt den Nijmeger Hämostasis-Assay, der eine gleichzeitige, zeitaufgelöste Messung von Thrombin- und Plasminbildung ermöglicht, um eine integrierte Bewertung der Gerinnung und Fibrinolyse zu ermöglichen. Der Test zielt darauf ab, die Charakterisierung des hämostatischen Gleichgewichts in Forschung und klinischen Einrichtungen über den Rahmen konventioneller hämostatischer Tests hinaus zu verbessern.

Der Nijmeger Hämostase-Assay: Gleichzeitige fluorogene Messung der Thrombin- und Plasminbildung in einem einzigen Bohrloch

Es wird ein Verfahren zur Herstellung einer 3-dimensionalen Matrix, bestehend aus Kollagen Typ I und primären humanen Fibroblasten beschrieben. Diese organotypischen Gel dient als nützliches Substrat invasive Zellmigration beurteilen, da es grundlegende Funktionen von Gewebestroma nachahmt und ist offen für viele Formen der Mikroskopie.

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Dieser Artikel beschreibt eine vielseitige Methode zur cell-derived Gewebe Ringe durch zelluläre self-assembly erstellen. Glatte Muskelzellen in ringförmige Agarose Brunnen sammeln und Vertrag robust dreidimensionale (3D-) Gewebe innerhalb von 7 Tagen bilden ausgesät. Millimeter-Skala Gewebe Ringe sind förderlich für die mechanische Prüfung und dienen als Bausteine ​​für Gewebe Montage.

Directed Cellular Self-Assembly to Cell-Derived Tissue Ringe für biomechanische Analyse und Tissue Engineering Fabricate

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