La técnica de fotoconversión para explorar la dinámica de las células inflamatorias en pupas de insectos

Comience con un plato con fondo de vidrio que contenga pupas de Drosophila transgénicas que lleven epitelio herido marcado con sus proteínas de la superficie celular que exhiben fluorescencia verde.

Las células inmunitarias de las pupas, o hemocitos, expresan fluoróforos verdes fotoconvertibles en el citoplasma y proteínas fluorescentes rojas en el núcleo, lo que facilita el seguimiento celular.

Las células heridas liberan quimioatrayentes, o moléculas inflamatorias, que atraen a los hemocitos al sitio herido.

La microscopía confocal revela el área herida rodeada de células epiteliales verdes.

Durante la curación, los hemocitos verdes con núcleos rojos cerca de la herida extienden las protuberancias de la membrana: filopodios y lamelipodios y migran hacia el área herida.

Con el tiempo, a medida que el quimioatrayente se difunde, los hemocitos distantes migran hacia la herida, creando una onda de células inmunitarias.

Iluminar la subpoblación de hemocitos migratorios con una longitud de onda de 405 nanómetros. Esto convierte irreversiblemente el fluoróforo fotoconvertible de los hemocitos de verde a rojo.

Estos hemocitos fotoconvertidos reparan el epitelio herido y se alejan del sit