Un ensayo de código de barras para la caracterización fenotípica y funcional de células inmunitarias
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:42 min. • July 8th, 2025
Comience con muestras de prueba que contengan células inmunitarias estimuladas y fijas.
La estimulación induce la expresión de marcadores específicos en las células, mientras que la fijación conserva marcadores fenotípicos, incluidos los antígenos de la superficie celular, y los marcadores de estado funcional, incluidas las citocinas.
Agregue una combinación única de anticuerpos conjugados con isótopos de metales pesados a cada muestra.
Esta técnica codifica de forma única múltiples muestras, distinguiendo cada muestra por su combinación de isótopos de metales pesados.
Los anticuerpos se unen a un epítopo común, codificando todas las células de las muestras.
Combine todas las muestras con código de barras en un solo tubo, para el procesamiento posterior.
Agregue un cóctel de anticuerpos conjugados con metal para teñir los antígenos de superficie.
Agregue tampón de permeabilización para aumentar la permeabilidad de la membrana celular para la tinción intracelular.
Agregue otro conjunto de anticuerpos conjugados con metales para teñir citocinas intracelulares.
El código de barras permite la tinción simultánea y la adquisición de las muestras agrupadas mediante citometría de masas. Es
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