Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:21 min. • July 8th, 2025
Trate las células madre pluripotentes humanas adheridas con lentivirus modificados en un reactivo de transfección.
El virus transporta genes para la resistencia a los antibióticos y el factor de transcripción neurogénico, controlado por los elementos reguladores y sensibles a la tetraciclina.
El reactivo de transfección cargado positivamente mejora la fusión viral y la liberación de su contenido.
El ARN viral se transcribe inversamente en ADN y se integra en el ADN de la célula madre, lo que permite la expresión de elementos reguladores que producen proteínas activadoras.
Agregue un medio basal con derivado de tetraciclina, que forma un complejo con las proteínas activadoras.
Este complejo se une al elemento sensible a la tetraciclina, promoviendo la expresión génica y produciendo los factores de transcripción neurogénicos que inducen la diferenciación de las células madre en neuronas.
Agregue un medio basal con un medicamento antibiótico para eliminar las células no transfectadas.
Tratar las células con una solución de desprendimiento que contenga enzimas proteolíticas que degradan la matriz extracelular o ECM y liberan las células.
Retire las enzimas y vuelva a colocar las célula
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