Registros electrofisiológicos de neuronas reprogramadas en un corte de cerebro de ratón

Tome un corte coronal de ratón modificado genéticamente inmovilizado en una cámara de registro perfundida con tampón oxigenado.

El corte contiene la región estriatal, que tiene interneuronas reprogramadas a partir de células precursoras de oligodendrocitos marcadas por un marcador de interneuronas y expresión de proteínas fluorescentes.

Ensamble una pipeta de registro que consta de un electrodo sumergido en una solución intracelular.

Identifique microscópicamente una interneurona fluorescente.

Mantenga una presión positiva en la pipeta y hágala avanzar hacia la interneurona objetivo, en contacto con la membrana.

Aplique presión negativa para formar un sello de alta resistencia.

Aplique pulsos de presión negativa para romper la membrana, estableciendo una configuración de toda la célula.

Mantener el potencial de membrana de la interneurona en un valor negativo constante.

Aplique breves corrientes incrementales, abriendo los canales iónicos y cambiando el potencial de membrana, desencadenando un potencial de acción.

Eventualmente, la membrana vuelve al potencial de reposo.

Observe estos cambios en el potencial de membrana en respuesta a la inyección actual, lo que indica una maduraci