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JoVE Journal Bioengineering
Characterization of Complex Systems Using the Design of Experiments Approach: Transient Protein Expression in Tobacco as a Case Study

Caracterización de Sistemas Complejos Uso del Diseño de Experimentos Enfoque: Expresión de Proteínas transitoria en tabaco como un estudio de caso

Full Text
17,171 Views
20:24 min
January 31, 2014

DOI: 10.3791/51216-v

Johannes Felix Buyel1, Rainer Fischer1,2

1Institute for Molecular Biotechnology,RWTH Aachen University, 2Institute for Molecular Biology and Applied Ecology,Fraunhofer Gesellschaft

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Se describe un diseño de enfoque experimentos que se puede utilizar para determinar y modelar la influencia de los elementos reguladores de transgenes, los parámetros de crecimiento y desarrollo de la planta, y las condiciones de incubación en la expresión transitoria de los anticuerpos monoclonales y proteínas reportero en plantas.

El objetivo general del siguiente experimento es generar modelos predictivos para la expresión transitoria de proteínas en las hojas de las plantas. Esto se logra mediante el establecimiento de un diseño experimental para identificar los parámetros más importantes para la expresión transitoria y cuantificar su impacto en la acumulación de proteínas. Como segundo paso, los genes se clonan y se transfieren a las agrobacterias, que luego se inyectan en las hojas, lo que da lugar a una expresión transitoria de proteínas.

A continuación, se analizan muestras de hojas para determinar los niveles de expresión de proteínas. Se obtienen resultados que muestran el patrón de niveles transitorios de expresión de proteínas en hojas de diferentes edades y para diferentes condiciones de incubación a partir de un diseño de evaluación de modelos experimentales. La principal ventaja de esta técnica sobre los métodos existentes, como un factor a la vez, es que se pueden detectar y cuantificar las interacciones entre diferentes parámetros, como la edad de la hoja o la posición de la hoja.

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