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DOI: 10.3791/62636-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study addresses the complexity of alternative splicing (AS) and alternative polyadenylation (APA) in gene expression regulation. Using bioinformatic protocols to analyze RNA sequencing data, the research highlights the advantages of both exon-based and event-based methods for detecting and visualizing alternative splicing and polyadenylation across different experimental conditions.
El empalme alternativo (AS) y la poliadenilación alternativa (APA) amplían la diversidad de isoformas de transcripción y sus productos. Aquí, describimos protocolos bioinformáticos para analizar RNA-seq a granel y ensayos de secuenciación final 3' para detectar y visualizar AS y APA que varían según las condiciones experimentales.
Este protocolo proporciona una comprensión integral de las isoformas génicas generadas por empalme alternativo y poliadenilación al proporcionar un flujo de trabajo paso a paso para identificar sitios de empalme diferencial, exones expresados diferencialmente y poli(A)sitios. La principal ventaja de este protocolo es que evalúa métodos basados en exones y basados en eventos para estudiar splicing alternativo. También aplica el método basado en exones para estudiar la poliadenilación alternativa.
Se han proporcionado los archivos R Markdown que incluyen los códigos y notas para el análisis AS y AP. Sería recomendable seguir los pasos en el archivo R Markdown y llegar a la nota para cada paso cuidadosamente. Para identificar el empalme diferencial mediante diffSplice de limma, siga el archivo de bloc de notas de R.
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