胸部注射:成体ゼブラフィッシュハートへの複合デリバリー

- まず、ペトリ皿にスリットを入れた濡れたスポンジを置く。次に、成魚をトリカイン溶液で麻酔し、腹側を上に向けてスリットに慎重に移します。

オペルキュラムと胸部ガードルの間にある鼓動心臓の上の体軸から45度の角度でミンクロ注射針を配置します。

ショットにはフェノールレッドなどのトレーサー染料が含まれています。胸郭から針を引き出し、魚をシステム水を含む回復タンクに直ちに移し、麻酔からの完全な回復を監視します。

- 網を使って成魚を捕まえ、麻酔液に移す。魚が泳ぎにくなくなり、オペルキュラムの動きが減ったら、プラスチックスプーンで魚に触れて接触しないようにする。

ステレオ顕微鏡では、魚の皮膚の下で鼓動する心臓の動きを注意深く観察し、心拍の心臓の上および腹側心膜板で定義された三角形の真ん中の注入ポイントを決定します。

針が心膜の中に入ったら、マイクロインジェクター装置のペダルを押して注射を完了します。注射後、毛細血管を胸郭からそっと引き出し、すぐに魚をシステム水でタンクに移して回復します。