脑内注射：复合分娩到成年斑马鱼心脏

- 首先，在培养皿上放置一块带缝隙的湿海绵。接下来，用三卡因溶液麻醉成年鱼，并小心地将其转移到缝隙中，腹腔侧朝上。 将培养皿置于立体显微镜下，观察皮肤下跳动的心脏的运动。

将针头从身体轴以 45 度角放置在位于手术和胸围之间的跳动心脏上方的 45度角。轻轻地，将针头穿过皮肤推进到心腹膜中，这是一种环绕心脏的薄膜。将注射混合物输送到腹膜中。

该镜头包含一种示踪剂染料，如苯酚红色，以跟踪溶液运动。 从胸腔中取出针头。 立即将鱼转移到含有系统水的回收罐中，并监测其从麻醉中完全恢复。在下列协议中，我们将进行心内注射，以提供测试化合物，并检查其对心脏再生的影响。

- 使用网捕获成年鱼并将其转移到麻醉溶液中。一到两分钟后，当鱼停止游泳，手术室的运动减少时，用塑料勺子触摸鱼，以确保它不会对任何接触做出反应。接下来，快速小心地将鱼转移到湿海绵的凹槽中，然后由腹侧向上移动。 鱼头应指向操作员占主导地位的手。

在立体显微镜下，仔细观察鱼皮下跳动的心脏的运动。 从视觉上，确定跳动的心脏上方的注射点，以及由心室软骨板定义的三角形中间的注射点。将毛细管尖端插入相对于身体轴的30度至 45 度之间的角度。用微胶囊的尖端轻轻穿透皮肤进入腹腔。

针头进入腹膜内后，按微注射器装置的踏板完成注射。注射后，轻轻地从胸腔中取出毛细管，并立即将鱼转移到带系统水的鱼缸中以进行恢复。 监测鱼，直到从麻醉中完全恢复。要分析注射效果，请在所需的时间点收集心脏，并准备进一步分析。