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JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

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Inyección intratorácica

 
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Inyección intratorácica: Entrega compuesta al corazón adulto de pez cebra

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- Para empezar, coloca una esponja húmeda con una abertura en una placa de Petri. A continuación, anestesia un pez adulto con solución de tricarina y transfiéralo cuidadosamente en la hendidura con el lado ventral hacia arriba. Coloca la placa De Petri debajo de un microscopio estéreo y observa el movimiento del corazón palpitante debajo de la piel.

Coloque una aguja de mincroinjeción en un ángulo de 45 grados desde el eje del cuerpo por encima del corazón palpitante situado entre el operculum y la faja pectoral.

La inyección contiene un tinte trazador como el rojo fenol para rastrear el movimiento de las soluciones. Retire la aguja del tórax. Transfiera los peces inmediatamente al tanque de recuperación que contiene agua del sistema y monitoree para una recuperación completa de la anestesia.

- Utilizar una red para atrapar un pez adulto y transferirlo a la solución anestésica. Después de uno a dos minutos, cuando el pez deje de nadar y se reduzca el movimiento del operculum, toque el pescado con una cuchara de plástico para asegurarse de que no reacciona a ningún contacto.

Bajo el microscopio estéreo, observe cuidadosamente el movimiento del corazón palpitante bajo la piel del pez. Visualmente, determine el punto de inyección por encima del corazón palpitante y en el medio del triángulo definido por las placas cartilaginosas ventrales. Inserte la punta del capilar en un ángulo entre 30 y 45 grados en relación con el eje corporal.

Una vez que la aguja esté dentro del pericardio, presione el pedal del dispositivo microinyector para completar la inyección. Después de la inyección, retire suavemente el capilar del tórax, y transfiera inmediatamente el pescado a un tanque con agua del sistema para su recuperación.

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