Évaluation des interactions bactéries-cellules hôtes à l’aide de billes biomimétiques

Prenez une plaque multi-puits contenant une culture de cellules épithéliales de mammifères.

Dans les puits d’essai, ajoutez un agent pathogène bactérien ainsi que des billes de polymère couplées à des protéines de surface bactériennes.

Dans les puits témoins, ajoutez l’agent pathogène et les billes dépourvues de protéines bactériennes de surface. Couver.

Dans les puits d’essai, les billes imitent la surface bactérienne et rivalisent avec l’agent pathogène pour se lier à l’acide phosphatidique de la membrane cellulaire épithéliale, réduisant ainsi l’attachement bactérien.

Dans les puits de contrôle, les billes n’affectent pas la fixation bactérienne.

Retirez le support et lavez-le avec un tampon pour éliminer les composants non liés.

Incuber avec un détergent non ionique pour lyser les cellules, libérant ainsi les bactéries et les billes attachées à la membrane.

Pipeter le lysat pour créer une suspension homogène et diluer l’homogénat en série à l’aide d’un tampon.

Transférez les dilutions sur des plaques de gélose, incubez pour permettre la formation des colonies et comptez les colonies.

La plaque d’essai présente moins de colonies que les témoins, ce qui indique une réduction des