Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 4:10 min • July 8th, 2025
Les septines sont des protéines cytosquelettiques comprenant un domaine de liaison au GTP flanqué de domaines aminés et carboxyles terminaux, avec une capacité inhérente à s’auto-assembler en filaments et en structures d’ordre supérieur au niveau de la membrane plasmique interne pour diverses fonctions cellulaires.
Pour étudier les interactions septine-membrane in vitro à l’aide d’un mimétique de membrane biologique, procurez-vous un tube de microcentrifugation coupé. Appliquez de l’adhésif ultraviolet sur le bord plat non coupé et positionnez-le sur une lamelle en verre hydrophile traité au plasma. Lors de l’exposition à la lumière ultraviolette, l’adhésif durcit, créant une chambre de réaction ouverte.
Transférez dans la chambre des vésicules lipidiques unilamellaires zwitterioniques monodispersées de composition lipidique souhaitée, complétées par un tampon contenant des cations mono- et divalents. Les cations facilitent l’adsorption et l’accumulation des vésicules lipidiques sur la lamelle. Secouez doucement la chambre, initiant la rupture de la vésicule, et incuber.
Les vésicules rompues se déplient et fusionnent avec la lamelle via leurs groupes de tête hydrophiles, formant d
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