Évaluation de la formation de connexions neuronales dans une co-culture à l’aide d’enregistrements électrophysiologiques

0 vues • 2:17 min • July 8th, 2025

Placer une lamelle contenant une co-culture dans une chambre d’enregistrement imprégnée d’une solution extracellulaire oxygénée.

La co-culture se compose d’astrocytes, de neurones corticaux de rat exprimant des canaux ioniques sensibles à la lumière fusionnés à une protéine fluorescente et de neurones dérivés d’iPSC exprimant une autre protéine fluorescente.

À l’aide d’un microscope confocal, identifiez un neurone fluorescent dérivé d’iPSC.

Avancez une pipette d’enregistrement remplie d’une solution intracellulaire vers le neurone pour établir une configuration de cellule entière.

Maintenir un potentiel de membrane négatif constant pour des mesures de courant précises.

Éclairer la co-culture avec de la lumière pour activer les canaux ioniques sensibles à la lumière dans les neurones corticaux, générant ainsi un potentiel d’action.

Le potentiel d’action provoque la libération de neurotransmetteurs dans la fente synaptique.

S’ils sont connectés synaptiquement, les neurotransmetteurs se lient aux récepteurs du neurone dérivé de l’iPSC patché, ouvrant des canaux ioniques et générant des courants postsynaptiques.

L’augmentation des courants postsynaptiques dans les neurones dérivés d’iP

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Enregistrement électrophysiologique