Analyse ultrastructurale d’une section de cerveau de souris à l’aide de la microscopie électronique à transmission

Prenez une section de cerveau de souris fixée au tétroxyde d’osmium intégrée dans un bloc de résine.

Obtenez une image de coupe et alignez-la avec une image d’atlas pré-préparée pour identifier la région d’intérêt.

Marquez les limites de cette région sur le pâté de maisons.

Chauffez la résine pour la ramollir et excisez la région marquée.

Collez l’échantillon sur une barre de maintien en verre et coupez-le.

À l’aide d’un ultramicrotome, préparez des coupes semi-minces et ultraminces.

Transférez les sections semi-minces et ultraminces sur des supports en verre et des grilles en nickel, respectivement.

Teindre les sections semi-minces avec un colorant qui se lie aux acides nucléiques, au cytoplasme riche en ribosomes et à la matrice extracellulaire.

Lavez les coupes et examinez-les au microscope optique pour confirmer la présence de la zone cible.

Observez les coupes ultraminces au microscope électronique à transmission.

Le tétroxyde d’osmium améliore la densité électronique des membranes cellulaires et des organites, offrant un contraste élevé par rapport au cytoplasme moins dense en électrons, permettant de visualiser l’ultrastructure cellulaire.

Pour cartographier une zone d’intérêt, sélect