Microscopie à deux photons pour l’imagerie in vivo de la microvascularisation du cerveau de souris

0 vues • 2:58 min • May 29th, 2025

Commencez avec une souris anesthésiée avec une plaque frontale fixée sur une fenêtre corticale mince du crâne préparée chirurgicalement.

Positionnez la souris en position couchée. Retirez la peau médiale de la cuisse pour exposer la veine fémorale.

Injectez un conjugué de colorant fluorescent dans la veine pour marquer le plasma sanguin, permettant ainsi la visualisation des vaisseaux sanguins.

Suturez l’incision.

Retournez la souris et fixez la plaque frontale dans un harnais pour stabiliser la souris.

Transférez la configuration sur une platine de microscope à deux photons.

Ajoutez une solution saline sur la fenêtre corticale. Abaissez la lentille de l’objectif jusqu’à ce qu’elle entre en contact avec la solution saline.

À l’aide d’un éclairage en fond clair, localisez la zone d’imagerie.

Passez à l’imagerie à deux photons.

Le laser du microscope focalise une lumière proche infrarouge de faible énergie dans le cerveau.

Au point focal du laser, deux photons combinent leur énergie pour exciter le colorant, rendant les vaisseaux sanguins fluorescents.

Identifiez un lit capillaire – un réseau de petits vaisseaux sanguins reliant les artères aux veines – et agrandissez-le.

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