Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 2:23 min • June 17th, 2025
Prélever le plexus choroïde d’un cerveau de souris dans un panier à échantillons.
Le tissu, situé à l’intérieur des ventricules cérébraux, contient une couche de cellules épithéliales comportant des microvillosités sur leur surface apicale.
Incuber le tissu dans une solution fixatrice pour préserver son architecture cellulaire.
Laver avec un tampon pour éliminer l’excès de fixateur et stabiliser le pH.
Incuber le tissu avec du tétroxyde d’osmium qui se lie aux lipides de la membrane cellulaire, préservant ainsi la stabilité de la membrane, puis rincez l’excès de réactif.
Déshydratez les tissus en augmentant les concentrations d’alcool pour éviter la distorsion des tissus pendant l’imagerie.
Séchez le tissu, fixez-le sur un support d’échantillon recouvert de carbone, puis enduisez-le d’une couche de platine conductrice.
À l’aide de la microscopie électronique à balayage, focalisez un faisceau d’électrons sur la surface. La couche de platine dissipe les électrons, empêchant l’accumulation de charge et minimisant les artefacts d’imagerie.
Un détecteur capture les électrons rétrodiffusés à partir de la surface, produisant une image du tissu présentant des cellules épithéliales avec des microvi
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