Name: Méthodes de dosage à Drosophila Comportement (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-03-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 14 s
Description: Découvrez les méthodes d'évaluation des comportements moteurs et sensoriels chez Drosophila melanogaster. Ces tests permettent d'étudier l'influence des facteurs génétiques et environnementaux sur la coordination.

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Nous tenons à remercier Astha Maltare pour générer les données crawling larvaires. Nous tenons à remercier le Dr Nicholas Lanson Jr. pour donner ses commentaires sur le manuscrit. Ce travail a été soutenu par le Centre Robert Packard pour la SLA à l&#39;Université Johns Hopkins (à l&#39;UBP) et le Sclérose latérale amyotrophique Association (UBP), et R01MH083689 de la National Institutes of Mental Health (CDN).

Essai A. Crawling larvaire 1. Collection larves <ol><li> Mettre en place une bouteille de 8 oz de mouches (10-15 mâles + femelles 10-15). </li><li> Laissez-mouches pondent leurs œufs pendant 24 heures, puis de bouteilles claire de mouches. (Transfert des adultes dans un nouveau flacon et répéter au besoin). </li><li> Incuber bouteille pendant 3-4 jours, ou jusqu&#39;au troisième stade larvaire sont visibles. </li><li> Ajouter 50 à 100 ml de saccharose à 20% à la bouteille avec les larves et les laisser reposer pendant 20 minutes. Les larves flottent à la surface. </li><li> Recueillir les larves à l&#39;aide d&#39;une pipette de 25 ml sérologique avec la pointe coupée, et le placer dans un panier en treillis. </li><li> Laver les larves dans le panier à maille deux fois avec désionisée H 2 O. Les larves sont maintenant prêts pour les expériences. </li></ol> 2. Pour traiter les larves à la drogue <ol><li> Utilisation d&#39;une brosse pour transporter le nombre souhaité de larves à un bécher contenant 5 ml de saccharose une solution à 5% + médicament. </li><li> Laissez les larves se nourrissent pendant au moins 15 minutes.</li><li> Verser la drogue traitée larves dans un panier en treillis et rincer. Ils sont maintenant prêts à utiliser. </li></ol> 3. Essai locomoteur (mesure de la distance totale parcourue ou des contractions paroi du corps) <ol><li> Utilisez une brosse pour le transport de larve à un individu: <ol><li> 15 cm boîte de Pétri contenant 2% d&#39;agarose (précédemment versé et on laisse durcir) sur du papier millimétré avec une épaisseur de 0,2 cm 2 de grille. <ol><li> Compter le nombre de lignes de la grille traversé en 1 minute. </li></ol></li><li> Eh bien d&#39;un plat de dissection verre contenant une solution de levure diluée pâte. <ol><li> Comptez le péristaltisme (contractions antérieure sur le mouvement de contraction postérieure = 1) en une minute tout en observant sous un microscope à dissection. </li></ol></li></ol></li><li> Répétez jusqu&#39;à ce que les chiffres désirés de larves ont été comptés. </li></ol> B. itératif rapide géotaxie négative (RING) Protocole Cet essai a été à l&#39;origine deprescrite par Gargano et al 5. <ol><li> Recueillir nouvellement écloses mouches mâles adultes de moins de CO 2 anesthésie légère et le placer dans un flacon standard contenant des aliments (ou de la nourriture + médicament). </li><li> Maintenir les mouches à la température ambiante (sur la paillasse. ~ 22 ° C) pendant 2-3 jours pour permettre la récupération du CO 2 (et l&#39;accumulation des concentrations de médicament l&#39;état d&#39;équilibre, le cas échéant). </li><li> Transférer environ 25 mouches sans anesthésie dans des flacons en polystyrène préparés. </li><li> Assemblez les flacons avec des mouches dans l&#39;appareil RING (Figure 1). </li><li> Permettez-mouches pour s&#39;acclimater à l&#39;environnement, à l&#39;abri, pendant 15-20 minutes. </li><li> Au cours de cet appareil photo numérique du temps lieu ~ 1 m en avant de l&#39;appareil (sur une plate-forme si nécessaire pour aligner le centre de la lentille à mi-hauteur de la flacons), mise au point et zoom de la caméra sur l&#39;appareil, et régler une minuterie pour 3,0 secondes. </li><li> Soigneusement s&#39;emparer de l&#39;appareil sonner avec votre main gauche afin de ne pas disturb les mouches, et tiennent la minuterie avec votre main droite. </li><li> Fortement appuyez sur l&#39;appareil vers le bas sur la surface du banc à trois reprises, en s&#39;assurant que l&#39;eau du robinet est déjà assez difficile de faire tomber toutes les mouches au fond des flacons. </li><li> Parallèlement à l&#39;achèvement de la troisième prise, démarrez le compte à rebours de 3 secondes. </li><li> A trois secondes de prendre une photo. </li><li> Réinitialiser la minuterie pendant 1 minute et commencer. Pendant ce temps, réinitialiser la caméra et se concentrer sur l&#39;appareil, et fixer un autre canal de la minuterie pendant trois secondes. </li><li> Après 1 minute, répétez les étapes 1.7 à 1.10 </li><li> Après un total de 5-6 essais, télécharger des images sur un ordinateur et d&#39;utiliser votre visionneuse d&#39;image préférée pour ouvrir, et marquer la hauteur moyenne a grimpé pour chaque flacon. </li><li> Effectuer une analyse statistique sur vos différents groupes en comparant la hauteur moyenne a grimpé. </li></ol> Courtship C. et dosage d&#39;accouplement <ol><li> La première chose le matin, claires et producteurs de bouteilles de flies à être utilisé. </li><li> Au cours de la journée (toutes les 3-4 heures), de recueillir nouvellement écloses mâles sexuellement naïfs et les femmes: <ol><li> Placez les hommes individuellement dans des flacons ou des tubes avec le milieu. </li><li> Placez 5-6 femelles ensemble, par flacon / tube. </li><li> Isoler les mouches recueillies à 25 ° C de moins de 12 heures de lumière / obscurité pendant 5 jours. </li><li> Transfert d&#39;une femelle dans la chambre d&#39;une roue d&#39;accouplement. </li><li> Transférer un mâle dans la chambre d&#39;une roue d&#39;accouplement. </li><li> Observez paire sous un microscope à dissection pour les comportements suivants: <ol><li> Orientation (les mâles oriente vers la femelle) </li><li> Tapping (le mâle tape la femme) </li><li> Chanson Wing (le mâle s&#39;étend et vibre d&#39;une aile) </li><li> Lèche (les mâles lèche les organes génitaux féminins) </li><li> Curling (le mâle se recourbe son abdomen sous lui-même) </li><li> Tentative de copulation (curling activité tout en essayant de monter sur la femelle) </li></ol></li></ol></li><li> Observer pour 10 minutes ou jusqu&#39;à ce que la copulation, en notant l&#39;heure à laquelle chaque problème se produit (latence), le temps total engagé dans le comportement de cour jusqu&#39;à ce que la copulation (pour calculer l&#39;indice de cour), ainsi que le nombre de paires qui ont réussi à adopter un comportement donné ( fréquence). 100% des paires de type sauvage est généralement s&#39;accoupler dans les 5 minutes. </li><li> Calculer un indice de cour (CI) en divisant le temps passé à faire la cour, divisé par le temps total jusqu&#39;à la copulation. Pour les couples de type sauvage de cette oscille habituellement entre 0.6-0.8. </li></ol> D. des résultats représentatifs Crawling test Normale larve de type sauvage va errer ~ 3 cm / minute, et d&#39;exposition de ~ 40-50 contractions paroi du corps en une minute. Nous avons récemment développé un modèle de drosophile du FUS / TLS liée sclérose latérale amyotrophique qui montre des larves rampant défaut, la durée de vie réduite et des adultes d&#39;escalade dépréciation 6. Nous avons ciblé l&#39;expression of de type sauvage et des formes mutantes de FUS / TLS afin de les neurones moteurs (OK-371-gal4 pilote) et a effectué un test exploration des larves. Comme indiqué ci-dessous, les larves de type sauvage ramper jusqu&#39;à 12 cm, alors que l&#39;expression du FUS de type sauvage a diminué la capacité des larves rampant à environ 6 cm. Animaux exprimant la mutation R521C SLA causant dans FUS / TLS démontrer une déficience très sévère dans leur mouvement rampant (Figure 1), ramper seulement d&#39;environ 1 cm par minute. Négatif dosage RING géotaxie Les jeunes mouches adultes de type sauvage doit avoir une hauteur moyenne d&#39;escalade de ~ 4-5 cm dans un délai de 3 secondes (le temps peut être réglé de 3 secondes pour accueillir différentes souches ou des niveaux d&#39;activité pour définir une hauteur moyenne donnée pour une donnée la souche / traitement). Mouches qui restent à la partie inférieure est attribuée une valeur de 0. Il n&#39;est pas conseillé d&#39;utiliser plus de 25 mouches par flacon, car il devient alors difficile de déterminer l&#39;emplacement de chaque individu à la mouche pour mesurer la hauteur. Ndésensibilisation o a été observée à la hauteur des 6 essais consécutifs espacés de 1 minute d&#39;intervalle que nous avons employée. Il est essentiel de ne pas réutiliser les flacons d&#39;essai en polystyrène dans cet essai, après les premières poses de données sont recueillies en raison de nouvelles mouches placées dans des flacons utilisés ne veut pas monter dans la même mesure que dans des flacons frais. <img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/3795/3795fig1.jpg" /> Figure 1. Configuration pour le test RING. L&#39;appareil photo numérique est placé ~ 1 m en avant de l&#39;appareil contenant les mouches dans les tubes en polystyrène; mise au point et zoom de la caméra sur l&#39;appareil et régler une minuterie pour 3,0 secondes. <img alt="Figure 2" src="/files/ftp_upload/3795/3795fig2.jpg" /> Les données représentatives Figure 2. De l&#39;essai ramper larves à l&#39;aide mouches ectopique exprimer UAS-FUS WT, et UAS-FUS R521C sous le contrôle d&#39;un conducteur du neurone moteur (OK371-Gal4). <pclass = &quot;jove_content&quot;&gt;

<ol><li>Pandey, U. B., Nichols, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+disease+models+in+Drosophila+melanogaster+and+the+role+of+the+fly+in+therapeutic+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Human disease models in Drosophila melanogaster and the role of the fly in therapeutic drug discovery.</a> Pharmacol. Rev. 63 (2), 411-436 (2011).</li>
<li>Feany, M. B., Bender, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Drosophila+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Mar%22%5BJournal%5D)">A Drosophila model of Parkinson's disease.</a> Nature Mar. 23 (6776), 394-398 (2000).</li>
<li>Auluck, P. K., Bonini, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+prevention+of+Parkinson+disease+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Pharmacological prevention of Parkinson disease in Drosophila.</a> Nat. Med. 8 (11), 1185-1186 (2000).</li>
<li>Whitworth, A. J., Theodore, D. A., Greene, J. C., Benes, H., Wes, P. D., Pallanck, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+glutathione+Stransferase+activity+rescues+dopaminergic+neuron+loss+in+a+Drosophila+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Increased glutathione Stransferase activity rescues dopaminergic neuron loss in a Drosophila model of Parkinson's disease.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102 (22), 8024-8029 (2005).</li>
<li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+iterative+negative+geotaxis+%28RING%29%3A+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Exp. Gerontol. 40 (5), 386-395 (2005).</li>
<li>Lanson, N. A., Maltare, A., King, H., Smith, R., Kim, J. H., Taylor, J. P., Lloyd, T. E., Pandey, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Drosophila+model+of+FUS-related+neurodegeneration+reveals+genetic+interaction+between+FUS+and+TDP-43%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet%22%5BJournal%5D)">A Drosophila model of FUS-related neurodegeneration reveals genetic interaction between FUS and TDP-43.</a> Hum. Mol. Genet. 20 (13), 2510-2523 (2011).</li>
<li>Batlevi, Y., Martin, D. N., Pandey, U. B., Simon, C. R., Powers, C. M., Taylor, J. P., Baehrecke, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynein+light+chain+1+is+required+for+autophagy%2C+protein+clearance%2C+and+cell+death+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Dynein light chain 1 is required for autophagy, protein clearance, and cell death in Drosophila.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107 (2), 742-747 (2010).</li>
<li>Sang, T. K., Chang, H. Y., Lawless, G. M., Ratnaparkhi, A., Mee, L., Ackerson, L. C., Maidment, N. T., Krantz, D. E., Jackson, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Drosophila+model+of+mutant+human+parkin-induced+toxicity+demonstrates+selective+loss+of+dopaminergic+neurons+and+dependence+on+cellular+dopamine%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A Drosophila model of mutant human parkin-induced toxicity demonstrates selective loss of dopaminergic neurons and dependence on cellular dopamine.</a> J. Neurosci. 27 (5), 981-992 (2007).</li>
<li>Stacey, S. M., Muraro, N. I., Peco, E., Labbé, A., Thomas, G. B., Baines, R. A., van Meyel, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+glial+glutamate+transporter+Eaat1+is+regulated+by+fringe-mediated+notch+signaling+and+is+essential+for+larval+locomotion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Drosophila glial glutamate transporter Eaat1 is regulated by fringe-mediated notch signaling and is essential for larval locomotion.</a> J. Neurosci. 30 (43), 14446-14457 (2010).</li>
<li>Repnikova, E., Koles, K., Nakamura, M., Pitts, J., Li, H., Ambavane, A., Zoran, M. J., Panin, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sialyltransferase+regulates+nervous+system+function+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Sialyltransferase regulates nervous system function in Drosophila.</a> J. Neurosci. 30 (18), 6466-6476 (2010).</li>
<li>Repnikova, E., Koles, K., Nakamura, M., Pitts, J., Li, H., Ambavane, A., Zoran, M. J., Panin, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sialyltransferase+regulates+nervous+system+function+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Sialyltransferase regulates nervous system function in Drosophila.</a> J. Neurosci. 30 (18), 6466-6476 (2010).</li>
<li>Nedelsky, N. B., Pennuto, M., Smith, R. B., Palazzolo, I., Moore, J., Nie, Z., Neale, G., Taylor, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Native+functions+of+the+androgen+receptor+are+essential+to+pathogenesis+in+a+Drosophila+model+of+spinobulbar+muscular+atrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Native functions of the androgen receptor are essential to pathogenesis in a Drosophila model of spinobulbar muscular atrophy.</a> Neuron. 67 (6), 936-952 (2010).</li>
<li>Lorenzo, D. N., Li, M. G., Mische, S. E., Armbrust, K. R., Ranum, L. P., Hays, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectrin+mutations+that+cause+spinocerebellar+ataxia+type+5+impair+axonal+transport+and+induce+neurodegeneration+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Spectrin mutations that cause spinocerebellar ataxia type 5 impair axonal transport and induce neurodegeneration in Drosophila.</a> J. Cell Biol. 189 (1), 143-158 (2010).</li>
<li>Wang, J. W., Brent, J. R., Tomlinson, A., Shneider, N. A., McCabe, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ALS-associated+proteins+FUS+and+TDP-43+function+together+to+affect+Drosophila+locomotion+and+life+span%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">The ALS-associated proteins FUS and TDP-43 function together to affect Drosophila locomotion and life span.</a> J. Clin. Invest. , (2011).</li>
<li>Choi, J. K., Jeon, Y. C., Lee, D. W., Oh, J. M., Lee, H. P., Jeong, B. H., Carp, R. I., Koh, Y. H., Kim, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Drosophila+model+of+GSS+syndrome+suggests+defects+in+active+zones+are+responsible+for+pathogenesis+of+GSS+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet%22%5BJournal%5D)">A Drosophila model of GSS syndrome suggests defects in active zones are responsible for pathogenesis of GSS syndrome.</a> Hum. Mol. Genet. 19 (22), 4474-4489 (2010).</li>
<li>Ruan, H., Wu, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+interaction-mediated+lifespan+extension+of+Drosophila+Cu%2FZn+superoxide+dismutase+mutants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Social interaction-mediated lifespan extension of Drosophila Cu/Zn superoxide dismutase mutants.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105 (21), (2008).</li>
<li>Slawson, J. B., Kim, E. Z., Griffith, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+video+tracking+of+locomotion+in+adult+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">High-resolution video tracking of locomotion in adult Drosophila melanogaster.</a> J. Vis. Exp. (24), (2009).</li>
<li>Becnel, J., Johnson, O., Luo, J., Nässel, D. R., Nichols, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+serotonin+5-HT7+Dro+receptor+is+expressed+in+the+brain+of+Drosophila%2C+and+is+essential+for+normal+courtship+and+mating%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The serotonin 5-HT7 Dro receptor is expressed in the brain of Drosophila, and is essential for normal courtship and mating.</a> PLoS One. 6 (6), e20800(2011).</li>
<li>Johnson, O., Becnel, J., Nichols, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+5-HT%282%29+and+5-HT%281A%29-like+receptors+differentially+modulate+aggressive+behaviors+in+Drosophila+melanoga-+ster%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Serotonin 5-HT(2) and 5-HT(1A)-like receptors differentially modulate aggressive behaviors in Drosophila melanoga- ster.</a> Neuroscience. 158 (2), 1292-1300 (2009).</li>
<li>Bastock, M., Manning, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Courtship+of+Drosophila+Melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Behaviour%22%5BJournal%5D)">The Courtship of Drosophila Melanogaster.</a> Behaviour. , 85-111 (1955).</li>
<li>Greenspan, R. J., Ferveur, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Courtship+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Genet%22%5BJournal%5D)">Courtship in Drosophila.</a> Annu. Rev. Genet. 34, 205-232 (2000).</li>
<li>Villella, A., Hall, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurogenetics+of+courtship+and+mating+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Genet%22%5BJournal%5D)">Neurogenetics of courtship and mating in Drosophila.</a> Adv. Genet. 62, 67-184 (2008).</li>
</ol>

Nous n&#39;avons rien à communiquer.

Comportement chez la drosophile est étroitement régulée par des facteurs génétiques et environnementaux. Nous, et d&#39;autres, ont déjà utilisé les tests décrits ici pour recueillir des données afin d&#39;examiner les gènes liés à voler et à des comportements humains les maladies neurodégénératives modélisés chez la drosophile 5-19. Pour le dosage de l&#39;exploration, la sélection minutieuse de 3 e stade larvaire est une étape critique. Si le traitement avec un médicament, il fa...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td></tr><tr><td> Saccharose </td><td> Fisher Scientific </td><td> S5-500 </td></tr><tr><td> Agarose </td><td> Invitrogen </td><td> 16500-500 </td></tr><tr><td> 6 oz Drosophila bouteille </td><td> Genesee scientifique </td><td> 32-130 </td></tr><tr><td> Paint Brush (# 1) </td><td> Ted Pella, Inc </td><td> 11859 </td></tr><tr><td> Fly composants alimentaires </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Semoule de maïs </td><td> Fisher Scientific </td><td> NC9109741 </td></tr><tr><td> Gélose </td><td> Genesee scientifique </td><td> 66-104 </td></tr><tr><td> Mélasse </td><td> Fisher Scientific </td><td> NC9349176 </td></tr><tr><td> L&#39;acide propionique </td><td> Acros </td><td> 14930-0010 </td></tr><tr><td> Tegosept </td><td> Apex </td><td> 20-258 </td></tr><tr><td> L&#39;éthanol </td><td> PêcheurScientifique </td><td> BP2818-4 </td></tr><tr><td> Levure </td><td> Genesee scientifique </td><td> 62-107 </td></tr></tbody></table>

méthodes de dosage à drosophila comportement

Methods to Assay Drosophila Behavior

Drosophila melanogaster, la mouche des fruits, a été utilisé pour étudier les mécanismes moléculaires d&#39;un large éventail de maladies humaines comme le cancer, les maladies cardiovasculaires et de diverses maladies neurologiques 1. Nous avons optimisé simples et robustes tests comportementaux pour déterminer locomotion de la larve, la capacité d&#39;escalade adulte (dosage RING), et les comportements de séduction de la drosophile. Ces tests comportementaux sont largement applicables pour étudier le rôle des facteurs génétiques et environnementaux sur le comportement à la mouche. La capacité de ramper larvaire peut être utilisé de manière fiable pour déterminer les changements à un stade précoce dans les capacités rampants de larves de drosophile et aussi pour examiner l&#39;effet de médicaments ou de gènes de maladies humaines (des mouches transgéniques) sur leur locomotion. Le dosage des larves rampant devient plus applicable si l&#39;expression ou la suppression d&#39;un gène provoque une létalité à un stade nymphal ou adulte, que ces mouches ne survivent pas à l&#39;âge adulte où ils pourraient par ailleurs être évalué. Cette base, unssay peut également être utilisé en conjonction avec la lumière vive ou le stress d&#39;examiner d&#39;autres réponses comportementales chez les larves de Drosophila. Comportement de cour a été largement utilisée pour étudier les bases génétiques du comportement sexuel, et peut également être utilisé pour examiner l&#39;activité et de la coordination, ainsi que l&#39;apprentissage et la mémoire. Comportement de cour chez la drosophile implique l&#39;échange de divers stimuli sensoriels, y compris visuelles, auditives, et les signaux chimiosensoriels entre les hommes et les femmes qui mènent à une série complexe de comportements moteurs bien caractérisés ont abouti à la copulation avec succès. Dosages adultes traditionnels d&#39;escalade (géotaxie négatifs) sont fastidieux, de main-d&#39;œuvre, et prend du temps, avec une variation significative entre les différents essais 2-4. Le itératif rapide géotaxie négative (RING) test 5 a de nombreux avantages sur des protocoles plus largement utilisés, en fournissant une approche débit reproductible, sensible, et de haute de quantifier locomotrice des adultes et négatifs géotaxie behaviors. Dans le test RING, plusieurs génotypes ou de traitements médicamenteux peuvent être testés simultanément en utilisant grand nombre d&#39;animaux, à l&#39;approche à haut débit rend plus propice pour des expériences de dépistage.

Drosophila melanogaster est un système modèle génétiquement et comportemental souple qui a été utilisée pour comprendre la base moléculaire et cellulaire de nombreux processus biologiques importants pour plus d&#39;un siècle 1. Drosophile a été bien exploitée afin de mieux comprendre la base génétique du comportement à la mouche.

Méthodes de dosage à Drosophila Comportement

*Drosophila melanogaster*, la mouche du vinaigre, a été utilisée pour étudier les mécanismes moléculaires d'un large éventail de maladies humaines telles que le cancer, les maladies cardiovasculaires...

L'objectif général de cette procédure est de démontrer des méthodes d'analyse des comportements sensoriels, moteurs et de coordination chez la drosophile. Cela est réalisé en évaluant d'abord la fonction motrice des larves à l'aide du test de ramper, puis la fonction motrice des adultes à l'aide du test de l'anneau, et enfin les capacités de coordination et sensorielles des adultes grâce au test de parade nuptiale. En définitive, ce panel de tests comportementaux permet de montrer comment des facteurs génétiques et externes, tels que des traitements médicamenteux, peuvent influencer l'activité et la coordination.Intra sophala. Le principal avantage de ce test par rapport aux méthodes existantes, comme l'axe géo négatif, est que le test en anneau offre un débit plus élevé et une sensibilité accrue. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine des maladies neurodégénératives, telles que la détection précoce des défauts locomoteurs.La démonstration de ce test sera effectuée par le Dr Jamie Becknell, postdoctorant dans mon laboratoire. Le test de rampe des larves sert à mesurer l'effet de facteurs génétiques et environnementaux sur la motilité. Pour commence

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Déficits locomoteur Dosage, apprentissage et mémoire dans Drosophile Modèles de la neurodégénérescence

L’agression est un comportement inné et l’expérience de combat antérieure affecte la stratégie de combat et l’issue des combats ultérieurs chez les mouches. Cette vidéo décrit un test utilisé pour étudier le comportement agressif de la drosophile. L'exemple de protocole présente le test effectué dans une configuration qui élimine la manipulation des mouches et réduit donc le stress des animaux, qui aurait autrement un impact sur les performances des sujets.

drosophile Essai d’agression : une méthode pour tester la plasticité comportementale chez les mouches

Dans cet article, vidéo, nous décrivons un test automatisé pour mesurer l'effet de la faim ou de satiété sur le comportement dépend olfactif de recherche de nourriture dans le fruit de mouche adulte Drosophila melanogaster.

Une simple mouche Essai de comportement alimentaire dans Drosophila

Nous décrivons ici une méthode de mesure rapide et précise des performances de vol chez la drosophile, permettant le criblage à haut débit.

Une méthode améliorée pour la mesure précise et rapide des performances de vol en<em&gt; Drosophila</em

Ici, nous présentons un protocole pour quantifier l’évitement des individus stressés. Ce paradigme est à la fois puissant et facile à utiliser et peut être utilisé pour évaluer l’influence des gènes et de l’environnement sur un type d’interaction sociale chez Drosophila melanogaster.

Essai simple pour la quantification de l'évitement social en Drosophila melanogaster

Afin d’identifier de nouvelles mutations affectant la mécanosensation, nous avons conçu un test qui mesure la réponse comportementale à la stimulation tactile des poils de mouches chez des clones mutants générés par la méthode MARCM. La combinaison de techniques permet d’identifier des mutations mécanosensibles qui seraient autrement mortelles.

A Behavioral Essai pour mécanosensibilité de marcm-fondé clones dans<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Nous décrivons ici une configuration comportementale et une méthode d’analyse de données permettant de doser les réponses olfactives de jusqu’à 100 mouches du vinaigre (Drosophila melanogaster). Ce système peut être utilisé avec un ou plusieurs stimuli olfactifs, et adaptable pour l’activation optogénétique ou le silençage de sous-ensembles neuronaux.

Comportements olfactifs dosées par Tracking Computer Of<em&gt; Drosophila</em&gt; Dans un Olfactométre quatre quadrants

Le présent protocole évalue l’activité locomotrice de la drosophile en suivant et en analysant le mouvement des mouches dans une arène faite à la main à l’aide du logiciel open source Fiji, compatible avec des plugins pour segmenter les pixels de chaque image sur la base d’un enregistrement vidéo haute définition pour calculer des paramètres de vitesse, de distance, etc.

Une technique simple pour doser l’activité locomotrice chez la drosophile

Le trouble du spectre autistique (TSA) est associé à un comportement social et communicatif altéré et à l’émergence d’un comportement répétitif. Pour étudier l’interrelation entre les gènes TSA et les déficits comportementaux dans le modèle de la drosophile , cinq paradigmes comportementaux sont décrits dans cet article pour mesurer l’espacement social, l’agressivité, la parade nuptiale, le toilettage et le comportement d’habituation.

Paradigmes pour l’évaluation comportementale dans le modèle de trouble du spectre autistique de la drosophile

Le protocole présente une méthode à haut débit et rentable pour évaluer la neurotoxicité chez la mouche des fruits grâce à la quantification de la dysfonction locomotrice comme alternative aux modèles traditionnels de mammifères. Il vise à évaluer les effets neurotoxiques de composés pharmaceutiques, d’agents environnementaux ou de modifications génétiques à l’aide d’un modèle sensible, reproductible et éthiquement favorable.

Analyse comportementale de la dysfonction locomotrice chez Drosophila melanogaster comme lecture de la neurotoxicité

Ce protocole fournit un cadre pour évaluer les changements comportementaux induits par le stress chez Drosophila melanogaster. La combinaison d’essais complémentaires permet de quantifier l’activité, l’exploration et la prise de décision pour des mouches individuelles. Cette approche est flexible et peut être adaptée à un large éventail d’études portant sur la biologie du stress, le métabolisme et les fonctions neurocomportementales.

Phénotypage comportemental multimodal des états dépressifs induits par le stress chez Drosophila melanogaster

Découvrez les méthodes d'évaluation des comportements moteurs et sensoriels chez Drosophila melanogaster. Ces tests permettent d'étudier l'influence des facteurs génétiques et environnementaux sur la coordination.

Méthodes de dosage à Drosophila Comportement

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