-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

FR

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

French

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Immunology and Infection
Haut débit mesure de Membrane plasmique réapposition de sceau sur l’efficacité des cellules de ma...
Haut débit mesure de Membrane plasmique réapposition de sceau sur l’efficacité des cellules de ma...
JoVE Journal
Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Immunology and Infection
High-throughput Measurement of Plasma Membrane Resealing Efficiency in Mammalian Cells

Haut débit mesure de Membrane plasmique réapposition de sceau sur l’efficacité des cellules de mammifères

Full Text
8,225 Views
10:07 min
January 7, 2019

DOI: 10.3791/58351-v

Jonathan G.T. Lam1,2,3, Chi Song4, Stephanie Seveau1,2,3

1Department of Microbial Infection and Immunity,The Ohio State University, 2Department of Microbiology,The Ohio State University, 3Infectious Diseases Institute,The Ohio State University, 4Division of Biostatistics, College of Public Health,The Ohio State University

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article describes a high-throughput fluorescence-based assay for measuring plasma membrane resealing efficiency in living cells. The assay is designed to screen drugs or target genes that influence this critical cellular process.

Key Study Components

Area of Science

  • Cell Biology
  • Fluorescence Imaging
  • Membrane Biology

Background

  • Understanding plasma membrane resealing is vital for cell survival.
  • Damaged cells must efficiently reseal their membranes to maintain homeostasis.
  • This assay addresses key questions in plasma membrane biology.
  • Identifying proteins and pathways involved in resealing can lead to therapeutic advancements.

Purpose of Study

  • To develop a high-throughput method for assessing membrane resealing efficiency.
  • To identify specific proteins that mediate the resealing process.
  • To facilitate drug screening related to membrane repair mechanisms.

Methods Used

  • Preparation of HeLa cell suspension for assay.
  • Seeding cells in a 96-well plate for analysis.
  • Fluorescence-based measurements using a plate reader.
  • Monitoring cell behavior post-damage to assess resealing efficiency.

Main Results

  • The assay allows for the quantification of membrane resealing efficiency.
  • High-throughput capabilities enable extensive screening of conditions.
  • Specific proteins involved in the resealing process can be identified.
  • Results contribute to understanding cellular responses to membrane damage.

Conclusions

  • This assay is a valuable tool for studying plasma membrane biology.
  • It can aid in the discovery of therapeutic targets for membrane repair.
  • Future studies can expand on the identified pathways and proteins.

Frequently Asked Questions

What is the significance of plasma membrane resealing?
Plasma membrane resealing is crucial for cell survival after injury, preventing loss of cellular contents.
How does the assay measure resealing efficiency?
The assay uses fluorescence-based techniques to quantify how effectively cells can reseal their membranes after damage.
What cell type is used in this assay?
HeLa cells are used for the assay due to their robustness and ease of culture.
Can this assay be used for drug screening?
Yes, the assay is designed to screen for drugs that may enhance or inhibit membrane resealing.
What are the potential applications of this research?
Applications include understanding disease mechanisms and developing therapies for conditions involving cell membrane damage.

Nous décrivons ici un test haut débit fluorescence qui mesure la membrane plasmique rescellage d’efficacité grâce à des analyses fluorimétrique et imageries de cellules vivantes. Ce test peut être utilisé pour le dépistage des drogues ou des gènes de cible qui régulent la membrane plasmique réapposition de sceau sur des cellules mammaliennes.

Cet essai a été développé pour répondre aux questions clés dans le domaine de la biologie de membrane de plasma et pour établir comment les cellules efficacement endommagées peuvent réséaliser leur membrane plasmatique. Cette technique peut être utilisée pour mesurer l’efficacité de la membrane plasmatique resealing dans une capacité de haut débit et pour identifier les protéines spécifiques et les voies correspondantes qui médiation de la membrane plasmatique resealing. Commencez par ajouter 20 millilitres d’un 2,5 fois 10 à la cinquième cellules HeLa par millilitre de suspension moyenne de croissance dans un bassin stérile pipette et utiliser une pipette sérologique de 10 millilitres pour bien mélanger les cellules.

Ensuite, utilisez une micropipette multicanal pour ensemencer 100 microlitres de cellules par puits en triplicate dans une plaque traitée à fond plat et clair de 96 puits. Rappelez-vous qu’une distribution homogène de cellules est la clé d’une expérience réussie car les comparaisons entre toutes les conditions expérimentales nécessitent des nombres de cellules équivalents. Après 24 heures dans l’incubateur humidifié de culture cellulaire à 37 degrés Celsius et 5% de CO2, préchauffer le lecteur de plaque à 37 degrés Celsius et définir la configuration optique au monochromateur, le mode de lecture à la fluorescence, et le type de lecture à cinétique.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Immunologie et Infection numéro 143 membrane plasmique réapposition de sceau réparation de la membrane la dystrophie musculaire l’iodure de propidium liant colorant les acides nucléiques carbocyanine toxines formant des pores la listériolysine O

Related Videos

Mesure du taux plasmatique des protéines membranaires par endocytique Biotinylation réversible

11:32

Mesure du taux plasmatique des protéines membranaires par endocytique Biotinylation réversible

Related Videos

17.6K Views

Un test in vitro basé sur la fluorescence pour mesurer l’efficacité de l’étanchéité de la membrane plasmique

04:34

Un test in vitro basé sur la fluorescence pour mesurer l’efficacité de l’étanchéité de la membrane plasmique

Related Videos

574 Views

Vivre Imaging test pour évaluer les rôles de Ca 2 + Et Sphingomyélinase dans la réparation des pores formant blessures à toxines

18:25

Vivre Imaging test pour évaluer les rôles de Ca 2 + Et Sphingomyélinase dans la réparation des pores formant blessures à toxines

Related Videos

12.1K Views

Détermination Membrane Protein topologie utilisant la fluorescence protection protéase (FPP)

08:14

Détermination Membrane Protein topologie utilisant la fluorescence protection protéase (FPP)

Related Videos

18.4K Views

Essai de réparation Membrane cellulaire à l’aide d’un Microscope biphotonique Laser

06:35

Essai de réparation Membrane cellulaire à l’aide d’un Microscope biphotonique Laser

Related Videos

13.6K Views

Détermination de la Membrane plasmique partitionnement pour les protéines associées à la périphérie

11:11

Détermination de la Membrane plasmique partitionnement pour les protéines associées à la périphérie

Related Videos

8.8K Views

Mesure des interactions transcellulaires par agrégation protéique dans un système cellulaire hétéroologeux

04:47

Mesure des interactions transcellulaires par agrégation protéique dans un système cellulaire hétéroologeux

Related Videos

4K Views

Mesure de la liaison des nucléotides aux protéines membranaires fonctionnelles intactes en temps réel

08:33

Mesure de la liaison des nucléotides aux protéines membranaires fonctionnelles intactes en temps réel

Related Videos

2.3K Views

Test de fuite fluorescente pour étudier la déstabilisation de la membrane par un peptide pénétrant dans les cellules

07:33

Test de fuite fluorescente pour étudier la déstabilisation de la membrane par un peptide pénétrant dans les cellules

Related Videos

7.3K Views

Mesures basées sur la fluorescence de l’échange phosphatidylsérine/phosphatidylinositol 4-phosphate entre les membranes

08:49

Mesures basées sur la fluorescence de l’échange phosphatidylsérine/phosphatidylinositol 4-phosphate entre les membranes

Related Videos

4.7K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code