Sample Preparation for Mass Cytometry Analysis

Ryan L. McCarthy; Aundrietta D. Duncan; Michelle C. Barton

doi:10.3791/54394

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Sample Preparation for Mass Cytometry Analysis

לדוגמא הכנה לניתוח Cytometry Mass

Full Text

16,659 Views

06:28 min

April 29, 2017

DOI: 10.3791/54394-v

Ryan L. McCarthy¹, Aundrietta D. Duncan¹, Michelle C. Barton¹

¹Epigenetics and Molecular Carcinogenesis,The University of Texas MD Anderson Cancer Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

מאמר זה מתאר את האיסוף והעיבוד של דגימות לניתוח ציטומטריית מסה.

המטרה הכוללת של תהליך הכנת דגימה זה היא לייצר צביעת נוגדנים חזקה ועקבית של דגימות מגוונות כדי לאפשר חקירה של אוכלוסיות תאים הטרוגניות. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות לגבי זהות התא, איתות התא ותגובת התא באוכלוסיית תאים הטרוגנית מורכבת. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת מדידה של רמות חלבון בפרמטרים גבוהים ברמת התא הבודד.

מי שתדגים את ההליך הזה תהיה אונדריאטה דאנקן, סטודנטית לתואר שני מהמעבדה שלנו. עבור כל דגימת תרחיף של תא בודד, השעו אותה מחדש בארבע פעמים 10 עד שישית התאים למיליליטר במדיום נטול סרום, הוסיפו 500 מיקרוליטר של 50 מיקרו-מולר ציספלטין טרי לכל 2/10 לתוך ששת התאים, ודגרו את הדגימות על שייקר אורביטלי עם ערבוב מתמיד בטמפרטורת החדר. לאחר דקה אחת, הרוו את הציספלטין בנפח שווה של מאגר כביסה וצנטריפוגה את התאים.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos