Il linfedema è gonfiore delle estremità causato da disfunzione linfatica. Descriviamo un modello di coda murina cronica di linfedema e il nuovo uso della tecnologia di nanotrasfezione tissutale (TNT) per la consegna del carico genetico alla coda.
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Articolo metodologico
Un modello di linfedema della coda murina
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il linfedema è gonfiore delle estremità causato da disfunzione linfatica. L'arto interessato si allarga a causa dell'accumulo di liquidi, adiposi e fibrosi. Non esiste una cura per questa malattia. Un modello di coda di topo che utilizza un'escissione cutanea focale a tutto spessore vicino alla base della coda, con conseguente gonfiore della coda, è stato utilizzato per studiare il linfedema. Tuttavia, questo modello può causare una vascolarizzazione e conseguente necrosi della coda e una risoluzione precoce del gonfiore della coda, limitandone la traducibilità clinica. Il modello di linfedema cronico della coda murina induce linfedema prolungato per 15 settimane e una perfusione affidabile alla coda. I miglioramenti del tradizionale modello di linfedema della coda murina includono 1) escissione precisa a tutto spessore e clipping linfatico utilizzando un microscopio chirurgico, 2) conferma della perfusione arteriosa e venosa post-operatoria utilizzando speckle laser ad alta risoluzione e 3) valutazione funzionale utilizzando linfangiografia laser a infrarossi verde indocianina. Utilizziamo anche la tecnologia di nanotrasfezione tissutale (TNT) per la nuova consegna non virale, transcutanea e focale del carico genetico alla vascolarizzazione della coda di topo.
Introduzione
Il linfedema è gonfiore delle estremità causato da disfunzione linfatica. L'arto interessato si allarga a causa dell'accumulo di liquidi, adiposi e fibrosi1. Il linfedema colpisce 250 milioni di persone in tutto il mondo2,3,4. Si stima che il 20-40% delle pazienti sottoposte a trattamento per tumori maligni solidi, come il cancro al seno, il melanoma, i tumori ginecologici/urologici, o i sarcomi, sviluppino linfedema 2,4,5. La morbilità da linfedema comprende ....
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Protocollo
Il protocollo segue le linee guida del comitato etico per la ricerca animale dell'istituzione. Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati approvati dall'Indiana University School of Medicine Institutional Animal Care and Use Committee. Gli animali sono stati ospitati sotto un ciclo luce-buio di 12 ore con cibo e acqua ad libitum.
1. Interruzione chirurgica dei linfatici della coda di topo
- Utilizzare topi C57BL/6 di otto settimane di equa distribuzione di genere.
- Posizionare un topo in anestesia generale in una camera di induzione con il 3-4% di isoflurano in ossigeno al 100% seguito da sedazione di mantenimento all'1....
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Risultati
La tecnica per il modello di coda di topo per il linfedema sostenuto è mostrata nella Figura 1. La figura mostra l'anatomia rilevante del modello di coda di topo. La Figura 2 mostra il gonfiore progressivo e il linfedema persistente prolungato nella coda del topo dopo l'induzione del linfedema. Il volume della coda del topo, come calcolato dall'equazione del tronco di cono, raggiunge il picco alla settimana 4 e si stabilizzano al.......
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Discussione
Il linfedema è classificato come una lesione primaria (congenita) o secondaria (linfatica iatrogena)38,39. Il linfedema secondario comprende il 99% dei casi39. Il linfedema secondario è più comunemente causato da infezione (filariosi) o trattamento post-oncologico con linfoadenectomia o radiazione4,39. Un modello animale traslazionale è impegnativo per il linfedema secondario, poic.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno conflitti di interesse concorrenti.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato supportato da sovvenzioni fornite dall'American Association of Plastic Surgeons Academic Scholarship e dal Dipartimento della Difesa W81XWH2110135 ad AHH. Borsa di studio della Aesthetic Surgery Education and Research Foundation a MS. NIH U01DK119099, R01NS042617 e R01DK125835 a CKS.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Tegaderm Film | 1626W | ||
| Microscopio operatorio | Leica, Wetzlar, Germania | MSV266 | |
| Medicazione aderente (Tegaderm) | 3M, St. Paul, Minn. | Speckle laser 1626W | |
| (Pericam PSI System) | Perimed AB, Stoccolma, Svezia) | Laser PSIZ | |
| nel vicino infrarosso (LUNA) | Stryker (precedentemente Novadaq Technologies, Toronto, Canada) | LU3000 | |
| C57BL / 6 topi | Jackson Laboratories | 000664 | |
| Micro-Adson Forceps - 1x2 denti | Fine Science Tools (USA) Inc. | 11019-12 | |
| Gancio a V | Strumenti per la scienza fine (USA) Inc. | 18052-12 | |
| Bisturi SS NO15 | Fischer Scientific | 29556 | |
| Ago monouso 30GX1 | Fischer Scientific | 305128 | |
| Forbici operative | Fischer Scientific | 12-460-796 | |
| Pinza da chirurgo o gioielliere, Sklar 4-1/2 in | Fischer Scientific | 50-118-4255 | |
| Forbici a molla - Dritto/Affilato-Affilato/ 8mm tagliente | Fine Science Tools (USA) Inc. | 15024-10 | |
| Cardiogreen | Sigma | I2633-25MG | |
| IsosulfanBlue (Linfazurina) 50 mg/5ml | Mylan | 67457-220-05 |
Riferimenti
- Kataru, R. P., et al. Fibrosis and secondary lymphedema: chicken or egg. Translation Research. 209, 68-76 (2019).
- Brayton, K. M., et al. Lymphedema prevalence and treatment benefits in cancer: impact of a therapeutic inte....
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Ristampe e permessi
