Generazione di particelle simili al virus Chikungunya utilizzando il sistema di espressione del baculovirus nelle cellule di insetti

Le particelle simili al virus Chikungunya, VLP, sono strutture non infettive composte da proteine dell'involucro virale incorporate all'interno di un doppio strato lipidico e prive di materiale genetico.

Per produrre VLP di Chikungunya, infettare le cellule di insetto Sf9 di Spodoptera frugiperda con baculovirus ricombinanti che esprimono una cassetta genica strutturale di Chikungunya. La cassetta è costituita da un promotore di baculovirus fuso con geni strutturali della chikungunya che codificano per il capside e proteine dell'involucro.

Durante l'incubazione, le glicoproteine dell'involucro del baculovirus si legano ai recettori di superficie sulle cellule dell'insetto. Ciò facilita l'ingresso e il rilascio del DNA virale nel citoplasma del baculovirus, generando poliproteine contenenti proteine del capside e dell'involucro della chikungunya.

Dopo la sintesi, la scissione autocatalitica della proteina del capside produce la poliproteina precursore che possiede proteine dell'involucro nel reticolo endoplasmatico, ER. Nel lume dell'ER, gli enzimi scindono la poliproteina precursore, generando singole proteine che entrano nel compartimento del Golgi per un'ulteriore elaborazione, f